一种基于锰和聚乙烯亚胺修饰的氧化铁纳米酶及其在制备流感疫苗黏膜佐剂中的应用

    公开(公告)号:CN116712538A

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202310764467.2

    申请日:2023-06-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于疫苗技术领域,涉及一种基于锰和聚乙烯亚胺修饰的氧化铁纳米酶及其在制备流感病毒疫苗黏膜佐剂中的应用,通过磁力搅拌将三氯化铁彻底溶解于乙二醇中,缓慢加入三水醋酸钠,搅拌并超声助溶直至形成均匀的褐色悬浊液;加入四水氯化锰磁力搅拌并伴随超声至充分溶解,然后再加入支化聚乙烯亚胺,充分搅拌均匀形成悬浊液后,将悬浊液转移至聚四氟乙烯反应釜中进行水热合成,收集悬浊液离心弃上清并洗涤,干燥后得到基于锰和聚乙烯亚胺修饰的氧化铁纳米酶,该纳米酶类过氧化物酶催化活性显著增强。本发明作为免疫佐剂能够显著增强流感黏膜疫苗的黏膜免疫和系统免疫应答水平,本发明为流感黏膜疫苗的设计提供新思路。

    JAK1蛋白泛素化位点在制备干扰素耐受细胞中的应用

    公开(公告)号:CN116064461A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202210968253.2

    申请日:2022-08-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于分子病毒学和细胞生物学技术领域,公开了一种酪氨酸激酶蛋白JAK1泛素化位点赖氨酸lysine(K)859和860在制备干扰素耐受细胞中的应用。本发明发现流感病毒(IAV)PB2蛋白与JAK1蛋白发生相互作用,并通过泛素‑蛋白酶体途径降解JAK1。最终明确JAK1蛋白的K859和860是其泛素化位点。本发明将JAK1蛋白第859和860位的K突变为精氨酸arginine(R),解除JAK1所受到流感病毒PB2介导的泛素化降解,同时也降低了JAK1介导的ISGs的产生从而抑制了其介导的抗病毒活性。该位点有望成为开发制备干扰素耐受细胞的新靶点。

    禽流感病毒聚合酶蛋白PB2在制备JAK-STAT信号转导抑制剂中的应用

    公开(公告)号:CN116004565A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202210975065.2

    申请日:2022-08-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域,涉及禽流感病毒(AIV)聚合酶蛋白PB2在制备JAK‑STAT信号转导抑制剂中的应用。本发明发现PB2蛋白阻碍了IFNAR‑JAK STAT信号转导。PB2蛋白以剂量依赖的方式抑制哺乳动物JAK1蛋白的功能,即通过与JAK1的激酶样和激酶结构域相互作用并以泛素‑蛋白酶体方式降解JAK1,从而抑制JAK1介导的抗病毒基因表达。携带不降解JAK1的PB2基因的AIV诱导更强的ISGs的水平,对小鼠致病力降低。本发明为禽流感病毒跨种间传播的防控和疫苗设计提供了新的靶点和理论支持。

    一种检测禽流感病毒H5、H7和H9亚型的多重荧光RT-PCR引物探针组和试剂盒

    公开(公告)号:CN112626267A

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN202011336654.3

    申请日:2020-11-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测禽流感病毒H5、H7和H9亚型的多重荧光RT‑PCR引物探针组和试剂盒,属于病毒检测技术领域。本发明所述引物探针组包括检测禽流感病毒H5亚型、检测禽流感病毒H7亚型和检测禽流感病毒H9亚型的引物探针及内参引物探针。本发明引物探针组加入MS2内参质控核酸提取和扩增的过程,可有效避免假阴性结果,可用于禽类血液、组织、咽喉拭子、泄殖腔拭子等样品中的禽流感病毒H5、H7和H9亚型核酸检测,为禽流感病毒的诊断、流行病学调查、防控及净化提供一定的技术支持与帮助。

    多种亚型流感病毒HA2蛋白共同抗原表位、抗体、鉴定方法和应用

    公开(公告)号:CN111440228A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN202010157367.X

    申请日:2020-03-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及多种亚型流感病毒HA2蛋白共同抗原表位、抗体、鉴定方法和应用,该抗原表位能够与H1、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9和H10亚型流感病毒的免疫血清结合。选择一株H5N1亚型流感毒株S,根据其HA2蛋白的序列设计长度为20个氨基酸且互相重叠10个氨基酸的18条多肽,人工合成后点样至改性硅胶摸制成多肽芯片,使用针对不同亚型IAV的抗血清筛选通用表位。构建该表位突变的重组病毒,通过蛋白质印迹分析表位与免疫血清的结合能力。结果表明,HA2蛋白上485-FYHKCDNECME-495具有与H1,H3,H4,H5,H6,H7,H8,H9和H10亚型IAV抗血清的广谱结合活性。重组病毒中的K/D突变导致血清结合活性降低,表明它们是血清结合活性的关键氨基酸。该肽段还包含HLA-DR1限制性CD4 T细胞表位。

    哺乳动物细胞非易感H9N2亚型冷适应禽流感病毒的拯救

    公开(公告)号:CN110305898A

    公开(公告)日:2019-10-08

    申请号:CN201910524214.1

    申请日:2019-06-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及动物疫苗技术领域,尤其涉及转染293T和DF-1共培养细胞的H9N2亚型冷适应减毒活疫苗的拯救方法。选择一株H9N2亚型冷适应减毒株TX-25-CE30,构建表达其基因的8个质粒,以TX-25-CE30内部基因为骨架,以其母本毒株TX株HA、NA基因为外部基因,转染人胚肾细胞293T与鸡成纤维细胞系DF-1共培养细胞,拯救出对哺乳动物细胞感染能力较弱的毒株,命名为rTXca-HA-NA,该重组病毒免疫鸡后对同源毒株的一次免疫保护率可达100%。

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