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公开(公告)号：CN108753837A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810618328.8
申请日：2018-06-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027 , C12N15/113
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0275 , A01K2217/07 , A01K2227/107 , A01K2267/0375 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N2310/10
Abstract: 本发明公开了一种高血脂或动脉粥样硬化兔模型的构建方法及sgRNA。构建方法包括：以兔LDLR基因第2外显子或/和第7外显子为靶向，删除LDLR基因部分序列，使得兔子呈现高血脂和动脉粥样硬化的表型。设计的sgRNA引导序列如SEQ ID NO.1～4所示，本发明对兔特定基因的特定位点进行编辑，可成功获得自发性的高血脂和动脉粥样硬化兔，提供了高血脂和动脉粥样硬化兔模型的建立方法，可用于降血脂功效研究，如类似药物的筛选与评价，和对AS病因病机的探讨、治疗对策的探索和防治药物的研发。
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公开(公告)号：CN105734032A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610176047.2
申请日：2016-03-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/63 , C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C12N9/22 , A01K67/0276 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , C07K14/47 , C12N5/0656 , C12N15/8509 , C12N15/8772
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种山羊BLG基因定点敲除修饰系统及应用。所述定点敲除修饰系统为剪切山羊BLG基因靶序列的转录激活样效应因子核酸酶TALENs；本发明是利用该系统定点敲除山羊BLG基因和敲入人乳铁蛋白(hLF)基因，获得BLG?/hLF+转基因胎儿成纤维细胞，并应用该细胞作为供核细胞，通过体细胞核移植制备BLG?/hLF+基因打靶转基因山羊。为定点修饰的转基因哺乳动物制备建立了更为便捷、可靠和经济的技术体系。
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公开(公告)号：CN103571864B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201310563264.3
申请日：2013-11-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 载体pGEMT/rhPA及其构建方法、在高效重组人纤溶酶原激活剂制备方法中的应用，属于生物工程领域的基因工程和细胞工程技术，本发明采用先构建pGEMT/5’P载体，再构建pGEMT/5’+3’P载体，最后构建成于9203－10269位置共1068bp，其中编码356个氨基酸的pGEMT/rhPA载体，试验证明其表达的重组产物具有含量高、比活性高的优点，可用于开发人溶血栓药。
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公开(公告)号：CN108753837B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201810618328.8
申请日：2018-06-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种高血脂或动脉粥样硬化兔模型的构建方法及sgRNA。构建方法包括：以兔LDLR基因第2外显子或/和第7外显子为靶向，删除LDLR基因部分序列，使得兔子呈现高血脂和动脉粥样硬化的表型。设计的sgRNA引导序列如SEQ ID NO.1～4所示，本发明对兔特定基因的特定位点进行编辑，可成功获得自发性的高血脂和动脉粥样硬化兔，提供了高血脂和动脉粥样硬化兔模型的建立方法，可用于降血脂功效研究，如类似药物的筛选与评价，和对AS病因病机的探讨、治疗对策的探索和防治药物的研发。
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公开(公告)号：CN103194468A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310147589.3
申请日：2013-04-25
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
Abstract: 本发明属生物工程领域，提供了重组人纤溶酶原激活剂的新序列，如SEQ ID NO.1所示，这种序列可用制备乳腺特异性表达重组人纤维蛋白酶原激活剂；此DNA序列的动物表达重组产物促进纤维蛋白溶解的作用也得到试验和证实；本发明还公开了用于hrPA转基因羊制备的乳腺表达载体的结构。细胞转染外源基因操作步骤、转染外源基因的细胞筛选及转基因细胞核移植，获得转基因克隆羊；该技术可用于大规模制备用于人心血病治疗的溶血栓药物，其生产成本低、安全性高、产物活性高。本发明具有完全自主的知识产权，后续开发产品为自主产品。该发明具有广阔的产业前景和巨大的经济效益。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102732560A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210225140.X
申请日：2012-07-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种人工锌指核酸酶表达载体及其构建方法和应用。所述的人工锌指核酸酶表达载体，是将SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示序列，分别插入到载体pMLM290、pMLM292上的Xbal/BamHI位点而获得。该载体可用于突变转基因细胞中的增强绿色荧光蛋白标记基因。该载体能高效地突变细胞中的增强绿色荧光蛋白标记基因，解决了删除或突变标记基因效率的问题，且操作方法简单、可靠，可为以后标记基因的删除或突变提供了一种新的高效的方法。
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公开(公告)号：CN102358894A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110308200.X
申请日：2011-10-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/877 , A61D19/04 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，该方法包括以下步骤：（1）将外源基因通过表达载体转染体外培养的乳腺上皮细胞，并应用催乳素3-8µM诱导表达；（2）筛选获得高效表达乳腺上皮细胞系；（3）高效表达细胞系进行一步或二步细胞核移植，获得乳腺特异性表达个体。本发明方法可提高转基因动物制备效率，应用该技术可以在细胞筛选阶段预测其转基因动物的表达特性，提高乳腺特异表达转基因动物制备效率3倍。由于整合的位置效应，获得的转基因个体表达几率在10-30%，并且可能出现低水平表达。应用这一技术系统可在制备转基因细胞的同时鉴定将要获得个体的表达潜能，从而获得更多的表达动物。
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公开(公告)号：CN101492662A
公开(公告)日：2009-07-29
申请号：CN200810242890.1
申请日：2008-12-30
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
IPC: C12N9/48 , C12N15/85 , C12N5/20 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种大规模生产人组织纤溶酶原激活剂(tPA)的方法，该方法是用含有核心启动子的调控序列和cDNA以及BLG信号肽。表达载体制备转基因小鼠，取转基因小鼠淋巴细胞或乳腺上皮细胞，与肿瘤细胞融合，获得转基因杂交瘤细胞，催乳素诱导转tPA基因杂交瘤细胞，并筛选获得高表达细胞株，将表达细胞再转染，再筛选获得高表达杂交瘤细胞株；高表达细胞接种泌乳期BALB/C小鼠腹腔，收集腹水，获得重组人组织纤溶酶原激活剂。其生产成本较细胞培养法明显降低，产品使用相对安全，生产流程简单，无需复杂仪器设备。
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公开(公告)号：CN1896268A
公开(公告)日：2007-01-17
申请号：CN200610085611.6
申请日：2006-06-27
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
Abstract: 从羊胚胎中提取活化小分子羊胎素的方法及其用途，属生物工程技术领域，将去除肠胃肠的40～90日龄新鲜羊胚胎切碎后，加蒸馏水，制成匀浆，在－20℃条件下反复冻融，过滤，将滤液加热后，分别取得滤过液A及沉淀物A；将滤过液A超滤，取透明淡黄色滤过液B和沉淀物B；将沉淀物A及沉淀物B合并，调pH至2.0，加入胃蛋白酶，再调pH至7.0，在100±2℃条件下保温后，取滤过液C；将滤过液B和滤过液C合并，即为活化小分子羊胎素。可用于制备外用祛除皱纹、美化皮肤用品。本发明的羊胎素分子量控制在3000～6000之间，大部分为小分子肽及细胞因子成份，活化性高，减少了过敏等副作用，并提高了皮肤吸收率。
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公开(公告)号：CN114150007B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202111525445.8
申请日：2021-12-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种适用于家兔乳腺特异性表达去氨普酶DSPAα1的编码基因，应用所述编码基因来制备去氨普酶DSPAα1，表达量高，生产成本低。本发明还涉及一种从兔乳中提取、纯化去氨普酶rDSPA的方法，通过联用苯甲醚亲和层析、阳离子交换层析和活性蓝亲和层析进行分离纯化，操作简便、产品纯度高，可达98%。
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