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公开(公告)号:CN110438263B
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN201910730757.9
申请日:2019-08-08
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种快速鉴别PRRSV基因亚型的PCR‑HRM引物、检测方法与应用。该引物的序列如SEQ ID NO.1~2所示,其对目前市场广泛使用的PRRSV疫苗株和猪场的流行毒株均具有很好的扩增性,PCR扩增效率高,检测灵敏度高,且特异性好,重复性高。本发明提供的PCR‑HRM检测方法分析鉴别PRRSV 4个基因亚型的操作简单,全部过程只需2小时,极大缩短了基因分型所需时间;费用低,不用测序,也无需合成探针,只需添加廉价易得的荧光饱和染料。该PCR‑HRM引物可用于制备PRRSV亚型检测试剂盒、养殖场PRRSV亚型鉴定、分子流行病学调查以及养殖中PRRSV亚型风险评估,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN114948915B
公开(公告)日:2023-10-24
申请号:CN202210843258.2
申请日:2022-07-18
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: A61K31/122 , A61K36/71 , A61P31/04 , A61K131/00
Abstract: 本发明公开了百里醌在制备抗副猪嗜血杆菌药物中的应用,涉及生物医药技术领域。本发明还公开了一种抗副猪嗜血杆菌药物,成分包括百里醌。本发明发现不同浓度的百里醌对不同副猪嗜血杆菌菌株的生长曲线均有影响,各菌株在1/2MIC、1MIC和2MIC百里醌浓度下细菌生长明显受到抑制。百里醌对副猪嗜血杆菌有强烈的杀菌作用,可以作为副猪嗜血杆菌的一种杀菌剂。百里醌有望替代临床上常用的氨苄西林、氟喹诺酮类、头孢菌素、四环素、庆大霉素、磺胺类等药物来防治副猪嗜血杆菌病,避免为防治副猪嗜血杆菌病而滥用抗生素对公共安全造成的隐患。
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公开(公告)号:CN115932252A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202210810201.2
申请日:2022-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种PRRSV抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包括PRRSV抗体时间分辨免疫荧光检测卡;该检测卡包括PVC底板和PVC底板上依次连接的吸收垫、反应膜、结合垫和样品垫;结合垫上负载有镧系元素离子标记的重组rGP5‑M蛋白和镧系元素离子标记的羊抗鸡IgY;反应膜的检测线T上包被有重组rGP5‑M蛋白,质控线C上包被有羊抗鸡IgY免疫球蛋白。本发明可以定量检测PRRSV抗体,并与中和抗体水平具有正相关性,相关系数为0.955,具有较高的灵敏度、特异性及精密度;操作简单快速可,大幅度降低人为误差和增加检测结果的可靠性。
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公开(公告)号:CN114457078A
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202210159915.1
申请日:2022-02-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种可促进伪狂犬病毒增殖的猪源MLKL基因缺失细胞株及其应用,属于生物技术领域。本发明公开了用于敲除猪源MLKL基因的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA包括sgRNA1和sgRNA2,所述sgRNA1的引物序列如SEQ ID NO:1‑2所示;所述sgRNA2的引物序列如SEQ ID NO:3‑4所示。利用上述的sgRNA引物以及CRISPR/Cas9载体构建敲除猪源MLKL基因,再采用有限稀释法对所得的敲除猪源MLKL基因的猪肾上皮细胞进行传代、筛选,得到猪源MLKL基因缺失细胞株,将其接种伪狂犬病毒后,该细胞株与正常猪肾上皮细胞相比能持续促进病毒增殖。
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公开(公告)号:CN114410845A
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202210121406.X
申请日:2022-02-09
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了检测非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰的一步巢式PCR引物组、试剂盒,涉及分子生物领域;包括外引物对、内引物对和探针,所述外引物对的上游引物序列为SEQ ID NO:1所示序列,所述外引物对的下游引物序列为SEQ ID NO:2所示序列;所述内引物对的上游引物序列为SEQ ID NO:3所示序列,所述内引物对的下游引物序列为SEQ ID NO:4所示序列;所述探针的序列为SEQ ID NO:5所示序列。本发明基于巢式PCR原理,通过设计两对嵌套式引物,同时对外引物进行锁核酸修饰,提高外引物的Tm值和稳定性,进行两次独立的循环镶套式扩增,具有较高的灵敏度和特异性,易于操作,交叉污染少。
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公开(公告)号:CN110927390A
公开(公告)日:2020-03-27
申请号:CN201911293735.7
申请日:2019-12-16
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟CD2v蛋白抗体的ELISA方法、试剂盒及应用。该ELISA方法为双抗原夹心法。通过该方法,获得了检测非洲猪瘟CD2v蛋白抗体的ELISA试剂盒,其包括辣根过氧化物酶标记的CD2v抗原和CD2v蛋白包被的酶标板。利用本发明设计的试剂盒不仅能大量筛查非洲猪瘟病毒抗体,还能用于鉴别CD2v缺失株免疫猪群中非洲猪瘟疫苗株与野毒株,检测快速、灵敏,特异性好,非常适合非洲猪瘟疫情的大面积快速检测普查,以及猪场将来进行非洲猪瘟的净化与根除,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN110777221A
公开(公告)日:2020-02-11
申请号:CN201911302311.2
申请日:2019-12-17
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物、检测方法及检测试剂盒,属于分子生物学领域。本发明的检测引物、探针和检测试剂盒,利用锁核酸的特点,设计含有锁核酸的特异性探针,该探针对DNA有强大的识别能力和强大的亲和力,从而能够很好的应用于非洲猪瘟病毒精准检测,提高了非洲猪瘟病毒的检测效率,漏检的概率降低,为非洲猪瘟病毒检测提供了一种新的检测方法和检测试剂。本发明的探针、引物和试剂盒,与现有的常规检测方法相比,具有特异性强、灵敏度高等优点,特别适用于科研及临床应用,具有很好的商业应用价值。
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公开(公告)号:CN110724769A
公开(公告)日:2020-01-24
申请号:CN201911221389.1
申请日:2019-12-03
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的PCR引物组、试剂盒及检测方法。该引物组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~3所示的引物和探针;试剂盒包括上述的引物、探针、反应试剂。试剂盒使用时,在ROX通道出现一条S型扩增曲线为非洲猪瘟病毒阳性,无S型扩增曲线为非洲猪瘟病毒感染阴性,预期可用于缺失株的鉴别诊断。本发明提供的试剂盒具有有效防止气溶胶污染,并且操作简单、成本低廉,敏感性高、特异性好,适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的非洲猪瘟病毒鉴别检测。
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公开(公告)号:CN110129482A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910404610.0
申请日:2019-05-16
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法。该引物组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~5所示的引物组;试剂盒包括上述的引物组、反应试剂;该试剂盒的使用方法如下:首先配制LAMP反应体系;恒温反应所得产物直接进行肉眼判读:阳性结果为黄色,阴性结果为红色。本发明提供的试剂盒操作简单、成本低廉,反应快速,特异性好,结果易于观察,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN118344494B
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202410644754.4
申请日:2024-05-23
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/102 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于病原菌疾病防治技术领域,具体涉及一种副猪嗜血杆菌IRP蛋白N末端与RLPB蛋白融合抗原及应用。该融合抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该融合抗原经过Western‑Blot鉴定其反应原性可以得知,该融合蛋白抗原能被副猪嗜血杆菌抗体阳性血清所识别;并且,基于该融合抗原构建的间接ELISA方法对副猪嗜血杆菌抗体阳性血清具有优异的特异性、敏感性和重复性;除此之外,利用该融合抗原免疫豚鼠可以获得抵抗副猪嗜血杆菌1型菌株、5型菌株和13型菌株的攻毒保护效果。
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