同时检测区分鹅星状病毒Ⅰ型与Ⅱ型的荧光定量PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN116334311A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202310211271.0

    申请日:2023-03-06

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了同时检测区分鹅星状病毒Ⅰ型与Ⅱ型的荧光定量PCR试剂盒,属于荧光定量PCR试剂盒技术领域,实时荧光PC是目前测定样品中核酸拷贝数最敏感、最准确的检测技术,基于SYBR Green I的实时荧光定量PCR适用性广、灵敏、方便且便宜,在扩增结束后增加了一步熔解曲线分析,随温度升高,一半扩增产物发生解链时的熔解温度为Tm峰值,每个峰值代表不同产物。通过对Tm峰值的差别进行分析,可实现病原的多重检测,且对荧光PCR仪器要求低,通用性好。且本方案通过一步法完成,即逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,中间无开管和移液动作,操作简便,也大大提高了实验的效率,并降低了反应的污染风险。

    一种检测神经型牛星状病毒的引物探针组

    公开(公告)号:CN116837143A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310961164.X

    申请日:2023-08-01

    IPC分类号: C12Q1/70 C12N15/11 C12R1/93

    摘要: 本发明提出了一种检测神经型牛星状病毒的引物探针组,包括样品核酸1.8‑2.5μL、阳性标准品1.8‑2.5μL、阴性标准品1.8‑2.5μL、引物探针混合物4‑5μL、2X One Step RT‑qPCR Buffer(Probe)8‑12μL、浓度为5U/μl的Pro Taq HS DNA Polymerase 0.3‑0.5μL、Evo M‑MLV RTase Enzyme Mix 0.3‑0.5μL。综上,本发明通过牛星状病毒的ORF1ab基因的高度保守序列,设计得到引物对BAstV‑F、BAstV‑R及探针BAstV‑P,对神经型牛星状病毒引起的脑炎和脑膜炎疾病进行诊断,可以检测到病原体的核酸分子,敏感性和特异性都比较高,对BAstV感染引起脑炎和脑膜炎的研究提供理论参考。