一种应用STING蛋白亲合纯化环二核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN110590888B

    公开(公告)日:2022-10-28

    申请号:CN201910850586.3

    申请日:2019-09-10

    申请人: 山东大学

    发明人: 朱德裕 吕云 朱敬

    摘要: 本发明公开了一种应用STING蛋白亲合纯化环二核苷酸的方法,属于微生物发酵提纯的技术领域。本发明是利用了镍螯合琼脂糖为固相载体,与C端带有组氨酸标签(His‑tag)的人源干扰素基因刺激蛋白的配体结合结构域(STINGLBD,residues 149‑341)相结合后,填入柱子中制成STING亲合柱。该亲合柱能够和环二核苷酸特异性结合,然后可通过含尿素溶液对所结合的配体进行专一的洗脱。本发明的有益效果为:1、解决了现有技术无法从复杂样品中直接提取环二核苷酸的难题;2、只需经过一步纯化即可从复杂样品中获得纯度>80%的环二核苷酸;3、大大的降低了环二核苷酸的制备成本。

    使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN108913737B

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN201810545363.1

    申请日:2018-05-31

    申请人: 山东大学

    发明人: 朱德裕 吕云 朱敬

    摘要: 本发明公开了一种使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法,包括使用目的基因和质粒构建重组载体,将所述重组载体转化至大肠杆菌感受态细胞中,验证并选择转化成功的重组大肠杆菌加以诱导和培养,使其产生目标环二核苷酸,并从培养物分离纯化所述环二核苷酸。本发明方法的步骤较少,所需原材料和设备较少,从而显著降低生产成本,且产率较高。

    一种应用STING蛋白亲合纯化环二核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN110590888A

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201910850586.3

    申请日:2019-09-10

    申请人: 山东大学

    发明人: 朱德裕 吕云 朱敬

    摘要: 本发明公开了一种应用STING蛋白亲合纯化环二核苷酸的方法,属于微生物发酵提纯的技术领域。本发明是利用了镍螯合琼脂糖为固相载体,与C端带有组氨酸标签(His-tag)的人源干扰素基因刺激蛋白的配体结合结构域(STINGLBD,residues 149-341)相结合后,填入柱子中制成STING亲合柱。该亲合柱能够和环二核苷酸特异性结合,然后可通过含尿素溶液对所结合的配体进行专一的洗脱。本发明的有益效果为:1、解决了现有技术无法从复杂样品中直接提取环二核苷酸的难题;2、只需经过一步纯化即可从复杂样品中获得纯度>80%的环二核苷酸;3、大大的降低了环二核苷酸的制备成本。

    使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN108913737A

    公开(公告)日:2018-11-30

    申请号:CN201810545363.1

    申请日:2018-05-31

    申请人: 山东大学

    发明人: 朱德裕 吕云 朱敬

    摘要: 本发明公开了一种使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法,包括使用目的基因和质粒构建重组载体,将所述重组载体转化至大肠杆菌感受态细胞中,验证并选择转化成功的重组大肠杆菌加以诱导和培养,使其产生目标环二核苷酸,并从培养物分离纯化所述环二核苷酸。本发明方法的步骤较少,所需原材料和设备较少,从而显著降低生产成本,且产率较高。