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公开(公告)号:CN1818065A
公开(公告)日:2006-08-16
申请号:CN200510104303.9
申请日:2005-10-14
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及棉花中CCCH型锌指结构的GhZFP1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。从0.3mol· L-1NaCl处理的棉花叶片中提取总RNA,分离出mRNA,构建棉花盐胁迫下的cDNA文库,进行差异筛选,从中分离出编码CCCH型锌指结构的GhZFP1蛋白的基因。进一步构建正义表达载体,转化烟草和水稻,转基因植株具有较高的耐盐性,获得的转基因烟草能在200mmol·L-1的盐浓度下正常生长,转基因水稻能在100mM的盐浓度正常生长。因此,该基因是一个重要的抗盐基因,可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力,对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植,具有非常重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN101974525A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010268501.X
申请日:2010-08-30
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明涉及一种显著提高外源基因在植物中转化效率、表达水平以及遗传稳定性的方法。利用核基质分离法,从烟草中分离的一段核基质结合序列(MAR)TM6构建到不同启动子驱动下的单/双子叶植物表达载体报告基因表达盒的两端,通过农杆菌介导法导入植株。获得转基因植物中,携带有TM6的外源基因的表达量比未携带TM6的高10倍,其转化效率提高了40%,同时转有MAR的转基因植物将外源基因在后代个体间的遗传稳定性提高了30%。同时TM6可以作为增强子元件显著提高启动子的表达强度,但并不改变启动子的表达模式。因此,TM6可以用于植物基因工程,能有效的提高外源基因在植物中得转化效率,表达水平及转基因后代遗传稳定性。
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公开(公告)号:CN100360672C
公开(公告)日:2008-01-09
申请号:CN200510104301.X
申请日:2005-10-14
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及棉花中金属硫蛋白蛋白GhMT1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。通过构建棉花盐胁迫cDNA文库和对照cDNA文库,再进行差异筛选,获得一系列表达有显著差异的cDNA序列,其中有一条为棉花金属硫蛋白基因,将其命名为GhMT1。进一步利用该基因转化烟草,获得的转基因植株能在200mmol·L-1的盐浓度下较好生长。利用该基因转化水稻,获得该基因转基因植株能在100mmol·L-1的盐浓度下较好生长。因此,该基因是一个抗盐基因,可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力,对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植,具有重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN1818064A
公开(公告)日:2006-08-16
申请号:CN200510104301.X
申请日:2005-10-14
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及棉花中金属硫蛋白蛋白GhMT1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。通过构建棉花盐胁迫cDNA文库和对照cDNA文库,再进行差异筛选,获得一系列表达有显著差异的cDNA序列,其中有一条为棉花金属硫蛋白基因,将其命名为GhMT1。进一步利用该基因转化烟草,获得的转基因植株能在200mmol·L-1的盐浓度下较好生长。利用该基因转化水稻,获得该基因转基因植株能在100mmol·L-1的盐浓度下较好生长。因此,该基因是一个抗盐基因,可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力,对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植,具有重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN1789422A
公开(公告)日:2006-06-21
申请号:CN200510104302.4
申请日:2005-10-14
Applicant: 山东农业大学
Abstract: 本发明涉及裂叶牵牛PNZIP启动子的序列和应用,属于分子生物学和生物技术领域。从短日照植物裂叶牵牛的叶片中提取基因组DNA,利用接头聚合酶链式反应技术得到1558bp的DNA序列。将该序列的1~1420bp定向替换表达载体pBI121中的35S启动子,得到的表达载体PBI-PNZIP,将PBI-PNZIP和pBI121分别转化烟草和水稻。转基因烟草的GUS活性分析表明PNZIP启动子在叶片中的活性比35S启动子高9倍,而在烟草的花和根部则检测不到GUS活性。在转基因水稻中,PNZIP启动子在水稻叶片中的活性比35S启动子高6倍,而在水稻的花和根部则检测不到GUS活性。因此,该启动子是一个重要的光合组织特异表达启动子,可以作为一种高效特异启动子用于植物基因工程的产业化开发,具有重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN105420270A
公开(公告)日:2016-03-23
申请号:CN201510808006.6
申请日:2015-11-19
Applicant: 山东农业大学
Abstract: 本发明公开了AtMAPKKK18基因提高植物干旱抗性的应用,从拟南芥中通过PCR的方法克隆得到AtMAPKKK18基因,插入到植物表达载体pBI121中CaMV35S启动子的下游,转化目标植株,获得超表达转基因植株抗旱能力得到了大大提升。本发明基因及其编码蛋白对于植物耐逆机制的研究,以及提高植物的耐旱等耐逆性及相关性状的改良具有重要的理论及实际意义,将在植物的耐逆基因工程改良中发挥重要作用,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN1190492C
公开(公告)日:2005-02-23
申请号:CN02151530.1
申请日:2002-12-31
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12P19/34 , A01H1/00
Abstract: 本发明涉及棉花中Na+/H+反向转运蛋白GhNHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。从0.4mol·L-1NaCl处理的棉花叶片中提取总RNA,反转录成cDNA。利用兼并引物,进行常规聚合酶链式反应(PCR),得到中间片段,然后进行3′和5′末端快速扩增获得全长cDNA。将该基因转入盐敏感酵母突变体,能在一定程度上恢复其抗盐能力。进一步利用该基因转化烟草,获得的转基因植株能在200mmol·L-1的盐浓度下正常生长。因此,该基因是一个重要的抗盐基因,可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力,对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植,具有非常重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN102250896A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201010268450.0
申请日:2010-08-30
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/10
Abstract: 本发明涉及一种提高种子抗氧化能力及种质改良的方法。应用种子特异启动子At2S3与三个抗氧化基因的重组,提高种子抗氧化能力。At2S3基因的上游1760bp的启动子序列分别融合GUS报告基因、锰-超氧化物歧化酶基因MSD1、过氧化氢酶基因CAT1和维生素E生物合成中的关键酶尿黑酸植基转移酶基因HPT1,转化拟南芥并进行株系杂交。结果表明GUS报告基因在种子中特异、高效表达;单价MSD1(M7)、双价MSD1/CAT1(M7/C9)和三价MSD1/CAT1/HPT1(M7/C9/H3)转基因拟南芥株系在10μM百草枯氧化胁迫处理时的种子萌发率及1μM百草枯氧化胁迫处理时的幼苗成活率均明显高于野生型。因此,该启动子是一个种子特异高效启动子,与三个抗氧化基因的重组,对于种子贮藏期延长、种子品质和抗逆性状改良,具有重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN1425675A
公开(公告)日:2003-06-25
申请号:CN02151530.1
申请日:2002-12-31
Applicant: 山东农业大学
IPC: C07H21/00 , C07K14/415 , C12P19/34 , C12N15/29 , A01H1/00
Abstract: 本发明涉及棉花中Na+/H+反向转运蛋白GhNHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。从0.4mol·L-1NaCl处理的棉花叶片中提取总RNA,反转录成cDNA。利用兼并引物,进行常规聚合酶链式反应(PCR),得到中间片段,然后进行3′和5′末端快速扩增获得全长cDNA。将该基因转入盐敏感酵母突变体,能在一定程度上恢复其抗盐能力。进一步利用该基因转化烟草,获得的转基因植株能在200mmol·L-1的盐浓度下正常生长。因此,该基因是一个重要的抗盐基因,可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力,对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植,具有非常重要的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN1492041A
公开(公告)日:2004-04-28
申请号:CN03139044.7
申请日:2003-09-12
Applicant: 山东农业大学
IPC: C12N9/36
Abstract: 本发明涉及鸡蛋清溶菌酶高活性的简易纯化、浓缩与干燥方法。蛋清溶菌酶被树脂吸附、洗脱、硫酸铵盐析、透析,再用创新技术调整透析液pH值、离心,收集上清液。其沉淀加少量蒸馏水、重复处理两次后弃褐色不容物,合并上清液、调pH=5.5,加入1mol/L、pH=5.5的磷酸盐缓冲液、达终浓度为10mmol/L,静置片刻、离心,收集纯化液,于40℃真空旋转蒸发,浓缩液冰冻后室温真空干燥。产品呈淡黄色、活性范围13539U/mg~15741U/mg,与超滤浓缩、冷冻干燥产品(14610U/mg)基本一致。其产率(0.7248g/kg蛋清)比文献报道的工艺(树脂吸附→洗脱→硫酸铵盐析→透析→结晶纯化→丙酮浓缩蒸发干燥)产率(0.0367g/kg蛋清)高19.75倍。生产成本低,效果显著。
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