一种利用胚胎干细胞快速批量诱导制备人肺分支类器官的方法及实验模型

    公开(公告)号:CN118126931A

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202410353628.3

    申请日:2024-03-27

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种利用胚胎干细胞快速批量诱导制备人肺分支类器官的方法及实验模型,涉及生物技术领域,将胚胎干细胞诱导至前肠内胚层阶段形成前肠期小球,然后利用分支类器官完全培养基对前肠期小球进行培养,获得边缘光滑、结构致密的AFE小球,最后将其转移至Transwell中培养,形成具有分支状结构的人肺分支类器官。可以作为实验模型,用于肺发育研究、药物筛选、药物相互作用的机制研究。本发明所提出的这种快速批量诱导方法不仅可以培养出与体内肺脏形态和结构相似的具有分支状结构的人肺类器官,而且该培养方法产量高,可以实现批量冻存,从而适合应用于高通量筛选实验。

    一种利用烷烃传感器进化产烃酶生产长链烷烃的方法

    公开(公告)号:CN114107285B

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202111471306.1

    申请日:2021-12-04

    Abstract: 一种利用烷烃传感器进化产烃酶生产长链烷烃的方法,涉及酶工程酶蛋白定向进化技术领域,利用烷烃诱导型传感器对产烃基因进行进化和筛选,所利用的烷烃传感器是野生型烷烃诱导型启动子的突变子,基于该传感器对产烃基因进行进化和筛选,得到进化后的产烃突变子基因,最后利用该产烃突变子基因发酵生产长链烷烃。本发明首次提出了利用烷烃诱导型传感器对产烃基因进行进化和筛选,所利用的烷烃传感器是野生型烷烃诱导型启动子的突变子,基于该传感器对产烃基因进行进化和筛选,经过四轮的进化筛选,得到进化后的产烃突变子,相较于野生型基因的产烃量,本发明进化后的产烃基因,其发酵后烷烃的产量显著提高。

    一种三氯生诱导小鼠COPD模型的构建及应用

    公开(公告)号:CN113995737B

    公开(公告)日:2023-01-10

    申请号:CN202111343859.9

    申请日:2021-11-14

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供了抗菌剂三氯生(TCS)在建立小鼠COPD动物模型中的应用。本发明还提供一种小鼠COPD模型的构建方法。具体是,将成年小鼠用TCS处理,处理方法分别为腹腔注射和气道内手术给药。在TCS处理后继续饲养7天,14天和28天,通过对小鼠肺部组织病理切片分析,发现TCS处理后小鼠呈现典型的COPD病理特征,并复制临床COPD进行性加重的发病过程,获得所述COPD小鼠模型。本发明方法建立的动物模型操作简单,造模时间短,经济,小鼠成活率高,并能很好模拟人类COPD疾病发生过程,有效填补了COPD动物模型的空白。本发明还提供上述方法获得的小鼠模型在COPD疾病发病机制和治疗药物研究中的应用。

    一种检测微/纳米塑料及其表面吸附有机污染物的方法

    公开(公告)号:CN114166820A

    公开(公告)日:2022-03-11

    申请号:CN202111447271.8

    申请日:2021-11-30

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明涉及痕量污染物检测技术领域,具体为一种检测微/纳米塑料及其表面吸附有机污染物的方法,先合成SERS信号增强剂,利用TLC技术对微/纳米塑料及其表面吸附的有机污染物进行分离,将添加了凝聚剂的SERS信号增强剂滴加至TLC板上除微/纳米塑料以外的有机污染物位点上,最后使用拉曼光谱仪对TLC板进行光谱采集,本发明将薄层色谱与表面增强拉曼技术(TLC‑SERS)联用,实现了微/纳米塑料及有机污染物的共检测,通过添加SERS信号增强剂,提升了对有机污染物的检测灵敏度,解决了仅用TLC对目标分析物的无特异性和无法准确定量的不足,也解决了对比移值相近的污染物无法分离的问题。

    一种短链氯代烃诱导型生物传感器及其应用

    公开(公告)号:CN116555143B

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202310447470.1

    申请日:2023-04-24

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种短链氯代烃诱导型生物传感器及其应用,涉及基因工程生物传感器技术领域,该诱导型生物传感器具体为含有C50‑AlkS‑EGFP载体的Top10工程菌,其中AlkS及其操纵子基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明所采用的氯代烃诱导型操纵子是野生型烷烃诱导型启动子的突变子,基于该操纵子优化的氯代烃诱导型细菌生物传感器,成功实现了对多种短链氯代烃的检测。该生物传感器对短链氯代烃的检测易于操作,制样过程简单快捷。其检测限提高,具有良好的重复性。大大提高了检测效率,而且降低试剂成本。该氯代烃生物传感器具有低背景荧光泄露,高诱导荧光表达的优势,表现出极高的灵敏度和特异性。

    一种短链氯代烃诱导型生物传感器及其应用

    公开(公告)号:CN116555143A

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202310447470.1

    申请日:2023-04-24

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种短链氯代烃诱导型生物传感器及其应用,涉及基因工程生物传感器技术领域,该诱导型生物传感器具体为含有C50‑AlkS‑EGFP载体的Top10工程菌,其中AlkS及其操纵子基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明所采用的氯代烃诱导型操纵子是野生型烷烃诱导型启动子的突变子,基于该操纵子优化的氯代烃诱导型细菌生物传感器,成功实现了对多种短链氯代烃的检测。该生物传感器对短链氯代烃的检测易于操作,制样过程简单快捷。其检测限提高,具有良好的重复性。大大提高了检测效率,而且降低试剂成本。该氯代烃生物传感器具有低背景荧光泄露,高诱导荧光表达的优势,表现出极高的灵敏度和特异性。

    一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用

    公开(公告)号:CN114134160B

    公开(公告)日:2024-01-09

    申请号:CN202111471309.5

    申请日:2021-12-04

    Abstract: 一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用,涉及基因工程全菌生物传感器及基因表达调控领域,四环素类抗生素诱导型操纵子基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。该四环素类抗生素诱导型操纵子是野生型四环素调控蛋白TetR的突变子,可直接用于四环素类抗生素诱导型生物传感器的优化构建,用于检测四环素类抗生素含量,检测限高,具有良好的专一性,并且可检测包含四环素在内的八种四环素类抗生素。该四环素类抗生素诱导型操纵子基因还可用于基因表达调控,其对(56)对比文件Stefanie Urlinger et al..Exploringthe sequence space fortetracyclinedependent transcriptionalactivators: Novel mutations yieldexpanded range and sensitivity《.PNAS》.2000,第97卷(第14期),第7963-7968页.

    一种基于SERS机理实时原位监测还原反应的方法

    公开(公告)号:CN114486848B

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202210069385.1

    申请日:2022-01-20

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于SERS机理实时原位监测还原反应的方法,包括以下步骤:①制备1‑3nm金种子;②配置HAuCl4镀液;③用PS@Fe3O4分散液和步骤①得到的金种子制备PS@Fe3O4/Au;④用步骤③得到的PS@Fe3O4/Au和步骤②得到HAuCl4镀液制备PS@Fe3O4@Au;⑤用步骤④得到的PS@Fe3O4@Au制备PS@Fe3O4@Au/4‑NTP;⑥在超纯水中加入步骤⑤得到的PS@Fe3O4@Au/4‑NTP,加入适量NaBH4后进行拉曼检测。本发明的有益效果表现如下:①通过磁铁固定水溶液中的SERS材料,在单颗粒上进行拉曼检测,克服了常规SERS材料拉曼信号不稳定的缺点。②利用60x水镜实时监测反映水溶液中正在进行的催化还原反应,实现了真正意义上的原位监测。

    一种气道上皮细胞气-液界面培养物石蜡切片的制备方法

    公开(公告)号:CN119309884A

    公开(公告)日:2025-01-14

    申请号:CN202411553670.6

    申请日:2024-11-03

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种气道上皮细胞气‑液界面培养物石蜡切片的制备方法,涉及石蜡切片制备技术领域,首先对临床肺组织样本来源的基底细胞进行扩增,当细胞铺满Transwell小室后使用分化培养基培养获得气‑液界面培养物。使用多聚甲醛固定后将含有气‑液界面培养物的Transwell膜使用手术剪刀对半剪开,使用琼脂糖对气‑液界面培养物进行预包埋,将预包埋好的气‑液界面培养物进行脱水、石蜡包埋、切片。通过本发明制作的气道上皮细胞气‑液界面培养物的石蜡切片,能够完整保持细胞的形态,并能够反映细胞的生长状态、极性等。通过免疫荧光染色可对各类型上皮细胞进行鉴定,确定各类型细胞的比例,对于呼吸系统疾病的体外研究具有重要意义。

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