公开(公告)号：CN119309884A

公开(公告)日：2025-01-14

申请号：CN202411553670.6

申请日：2024-11-03

Applicant: 安徽大学

Inventor： 陈彪 ,  朱海燕 ,  吴李君 ,  张雯 ,  徐升敏

IPC: G01N1/28 ,  G01N1/36 ,  G01N1/30

Abstract: 一种气道上皮细胞气‑液界面培养物石蜡切片的制备方法，涉及石蜡切片制备技术领域，首先对临床肺组织样本来源的基底细胞进行扩增，当细胞铺满Transwell小室后使用分化培养基培养获得气‑液界面培养物。使用多聚甲醛固定后将含有气‑液界面培养物的Transwell膜使用手术剪刀对半剪开，使用琼脂糖对气‑液界面培养物进行预包埋，将预包埋好的气‑液界面培养物进行脱水、石蜡包埋、切片。通过本发明制作的气道上皮细胞气‑液界面培养物的石蜡切片，能够完整保持细胞的形态，并能够反映细胞的生长状态、极性等。通过免疫荧光染色可对各类型上皮细胞进行鉴定，确定各类型细胞的比例，对于呼吸系统疾病的体外研究具有重要意义。

公开(公告)号：CN119307438A

公开(公告)日：2025-01-14

申请号：CN202411553669.3

申请日：2024-11-03

Applicant: 安徽大学

Inventor： 陈彪 ,  朱海燕 ,  张雯 ,  吴李君 ,  徐升敏

IPC: C12N5/071 ,  C12Q1/02

Abstract: 一种长期快速高效诱导多种人气道上皮体外模型的方法，涉及类器官培养技术领域，首先利用临床肺组织样本诱导分化形成纤毛朝内肺气道类器官，将其消化为单细胞并使用基底细胞培养基扩增培养，得到的基底细胞经过诱导分化形成纤毛朝外肺气道类器官以及气‑液界面培养物模型。这两类模型可在体外成功模拟人气道上皮的功能性细胞形态，可作为实验模型，用于疾病建模、药物筛选以及毒性测试等，能够模拟人气道结构和功能的生物模型，可解决肺气道类器官构建过程中临床样本获取困难以及原代肺上皮细胞具有有限传代次数等问题，实现多种人气道上皮体外模型的长期快速高效的诱导。

公开(公告)号：CN118126931A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202410353628.3

申请日：2024-03-27

Applicant: 安徽大学

Inventor： 陈彪 ,  张雯 ,  吴李君 ,  朱海燕 ,  徐升敏

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/0735 ,  C12Q1/02

Abstract: 一种利用胚胎干细胞快速批量诱导制备人肺分支类器官的方法及实验模型，涉及生物技术领域，将胚胎干细胞诱导至前肠内胚层阶段形成前肠期小球，然后利用分支类器官完全培养基对前肠期小球进行培养，获得边缘光滑、结构致密的AFE小球，最后将其转移至Transwell中培养，形成具有分支状结构的人肺分支类器官。可以作为实验模型，用于肺发育研究、药物筛选、药物相互作用的机制研究。本发明所提出的这种快速批量诱导方法不仅可以培养出与体内肺脏形态和结构相似的具有分支状结构的人肺类器官，而且该培养方法产量高，可以实现批量冻存，从而适合应用于高通量筛选实验。