一种硫酸葡聚糖钠诱导白色念珠菌预先定植的结肠炎模型的构建方法

    公开(公告)号:CN112514849A

    公开(公告)日:2021-03-19

    申请号:CN202011487039.2

    申请日:2020-12-16

    Abstract: 一种硫酸葡聚糖钠诱导白色念珠菌预先定植的结肠炎模型的构建方法,包括下列步骤:步骤1:将浓度为0.8‑1.2×109 CFU/mL的白念珠菌菌液灌入SPF级6‑8周的小鼠;步骤2:给予小鼠自由饮用质量分数为3%的硫酸葡聚糖钠水溶液7 d,期间断绝其他饮水,且每隔1 d更换新鲜的质量分数为3%的硫酸葡聚糖钠水溶液;步骤3:然后连续4天,每天上午9时给予白念株菌灌胃,1.0×108 CFU/只,生理盐水自由饮用,标准颗粒饲料自由饮食;从第5天起,停止白念株菌灌胃且开始自由饮用质量分数为3%的硫酸葡聚糖钠水溶液7 d,期间停止饮水,自由饮食;室温18‑22℃,相对湿度55%‑70%,形成结肠炎模型。本发明采用自由饮用DSS(MW:36000~50000)水溶液的方法建立动物模型,简单易行。

    一种通过白色念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用的方法

    公开(公告)号:CN111707815A

    公开(公告)日:2020-09-25

    申请号:CN201911407233.2

    申请日:2019-12-31

    Abstract: 一种通过白色念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用的方法,包括将中药单体加入至评价菌液,孵育12h后用无菌PBS洗涤一次,再用无菌PBS配制的质量分数为2%的BSA封闭1小时,再然后用无菌PBS洗涤一次;接下来加入100ul的β-葡聚糖抗体,放在4°C冰箱进行染色4h,染色结束后,用无菌PBS洗涤2次,再用cy3单抗鼠标记IgG在室温下避光染色1小时,然后用无菌PBS避光洗涤3次后用1ml的无菌PBS进行避光重悬,避光震荡混匀后用流式细胞仪进行葡聚糖荧光暴露强度的检测;或者用流式细胞仪进行几丁质荧光暴露强度的检测;或者用倒置荧光显微镜记录β-葡聚糖与几丁质荧光图像。本发明利用白色念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用,具有临床意义。

    一种通过耳道念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用的方法

    公开(公告)号:CN111679069A

    公开(公告)日:2020-09-18

    申请号:CN201911401864.3

    申请日:2019-12-31

    Abstract: 一种通过耳道念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用的方法,包括将中药单体加入至评价菌液,孵育12h后用无菌PBS洗涤一次,再用无菌PBS配制的质量分数为2%的BSA封闭1小时,再然后用无菌PBS洗涤一次;接下来加入100ul的β-葡聚糖抗体,放在4°C冰箱进行染色4h,染色结束后,用无菌PBS洗涤2次,再用cy3单抗鼠标记IgG在室温下避光染色1小时,然后用无菌PBS避光洗涤3次后用1ml的无菌PBS进行避光重悬,避光震荡混匀后用流式细胞仪进行葡聚糖荧光暴露强度的检测;或者用流式细胞仪进行几丁质荧光暴露强度的检测;或者用倒置荧光显微镜记录β-葡聚糖与几丁质荧光图像。本发明利用耳道念珠菌细胞壁重构来评价中药单体抗真菌作用,具有临床意义。

    一种念珠菌属真菌生物被膜胞外基质的提取方法

    公开(公告)号:CN108373979A

    公开(公告)日:2018-08-07

    申请号:CN201810083189.3

    申请日:2018-01-29

    Abstract: 一种念珠菌属真菌生物被膜胞外基质的提取方法,包括成膜导管片的制得,以及将成膜导管片放于磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液或Tris-HCl缓冲液中,接着先进行涡旋震荡,再进行超声处理,得到悬浮液;接下来将所述悬浮液与离子交换树脂置于一容器内进行摇床孵育;用500mM的NACl溶液洗脱第三步得到的离子交换树脂得到洗脱液,然后对所述洗脱液进行摇床作用1.5~2.5小时,洗脱液经0.22μm的微孔滤膜过滤,离心后得到的上清液即为念珠菌属真菌生物被膜胞外基质提取液。本发明采用离子交换树脂辅助提取的方法,应用于常见的念珠菌属生物被膜EPS的提取中,具有提取效率高的优点。

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