公开(公告)号：CN117568363A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202310973827.X

申请日：2023-08-03

Applicant: 宁夏农林科学院动物科学研究所(宁夏草畜工程技术研究中心)

Inventor： 郭亚男 ,  何生虎 ,  杨萌萌 ,  王建东 ,  马科 ,  李勇 ,  梁小军 ,  张小梅 ,  张久盘

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/23 ,  C07K1/16 ,  C07K1/14 ,  C12N15/70 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种Omp2b蛋白与TrbJ蛋白、制备方法及其应用，编码所述Omp2b蛋白的基因Omp2b基因，编码所述TrbJ蛋白的基因为TrbJ基因，所述Omp2b蛋白和TrbJ蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO1所示，本申请采用含有原核表达载体pet‑28a‑Omp2b、pet28a‑TrbJ质粒的DH5α菌株于含有100μg/mL卡那霉素抗性的LB平板上划线，37℃过夜培养，LB平板生长出单菌落，挑取LB平板生长出的单菌落并接于5mL的LB卡那霉素抗性液体培养基中，于温度为37℃且转速为220r/min的条件下震荡培养过夜，并通过质粒提取试剂盒提取质粒并转化入表达菌BL21中，通过蛋白大量表达、His标签亲和镍柱纯化蛋白得到Omp2b蛋白与TrbJ蛋白；本发明的Omp2b蛋白与TrbJ蛋白并未与其他菌株发生交叉反应，并且具备良好的特异性与敏感性。