一种宏基因组DNA的提取方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN104560951A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201410724663.8

    申请日:2014-12-03

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种宏基因组DNA的提取方法。该方法包括:取待测样品与裂解液混合后,经溶菌酶溶液处理、震荡破壁、蛋白酶K处理后,经NaCl处理、异丙醇处理、乙醇洗涤,即得;本发明通过在提取前加入裂解液和溶菌酶,并调节提取条件,使微生物细胞壁更易破碎,DNA分子更多的溶出,从而保证了提取所得DNA的丰度、片段完整性和纯度,且操作简单,成本较低。实验表明,采用本发明提供的方法提取唾液宏基因组DNA或对细菌、真菌的总DNA进行提取,与现有试剂盒相比,所得产物经PCR后电泳条带更加清晰,特别是对唾液样本的提取,所得产物经PCR后电泳条带较用现有试剂盒提取的结果更加清晰,明亮,完整。

    一种单细胞转录组的测序方法

    公开(公告)号:CN109971843B

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN201711447883.0

    申请日:2017-12-27

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种单细胞转录组的测序方法。本发明使用了PAP/PGP在RNA链的尾部加入多聚A/G,使RNA稳定性增加,同时产一条可以用于逆转录和cDNA合成的延伸链。本发明在下游进行有效RNA富集时,采用标记核糖体DNA探针的磁珠纯化小片段PCR非特异性产物,使用半退火夹板杂交,去除5s,5.8s,18s和28s大小的cDNA形式存在的rRNA,并在测序时减少大量无效的Reads数。本发明可以对单个真核细胞进行一站式non‑coding RNA、microRNA和mRNA的总转录组测序并产生该转录组的表达矩阵,摆脱了一个细胞只能进行一种测序的应用局限。

    模型及其构建方法
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110111841A

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201810010227.2

    申请日:2018-01-05

    Abstract: 本发明提供了一套基于宏基因组测序的动脉粥样硬化早期识别模型构建技术。本发明采用国际先进的Illumina NovaSeq平台,对人的粪便和口腔菌群宏基因组DNA采用Nextera转座子鸟枪宏基因组测序技术,配合传统的高通量测序,并产生宏基因组数据。进而运用数据库和系统等进行宏基因组测序数据分析。通过对数据进行训练集和验证机矫正,并配合机器学习和神经网络算法,产生可靠的早期动脉粥样硬化识别模型,并通过扩大宏基因组生物标志物进行验证。本发明基于较大规模的系统性队列研究,通过队列将病程变化和菌谱进行关联性分析,从而对早期标记物进行判断,在预防医学领域提供了更具价值的系统性研究方法。

    动脉粥样硬化的识别模型的构建方法

    公开(公告)号:CN110111841B

    公开(公告)日:2023-03-10

    申请号:CN201810010227.2

    申请日:2018-01-05

    Abstract: 本发明提供了一套基于宏基因组测序的动脉粥样硬化早期识别模型构建技术。本发明采用国际先进的Illumina NovaSeq平台,对人的粪便和口腔菌群宏基因组DNA采用Nextera转座子鸟枪宏基因组测序技术,配合传统的高通量测序,并产生宏基因组数据。进而运用数据库和系统等进行宏基因组测序数据分析。通过对数据进行训练集和验证机矫正,并配合机器学习和神经网络算法,产生可靠的早期动脉粥样硬化识别模型,并通过扩大宏基因组生物标志物进行验证。本发明基于较大规模的系统性队列研究,通过队列将病程变化和菌谱进行关联性分析,从而对早期标记物进行判断,在预防医学领域提供了更具价值的系统性研究方法。

    一种单细胞转录组的测序方法

    公开(公告)号:CN109971843A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201711447883.0

    申请日:2017-12-27

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种单细胞转录组的测序方法。本发明使用了PAP/PGP在RNA链的尾部加入多聚A/G,使RNA稳定性增加,同时产一条可以用于逆转录和cDNA合成的延伸链。本发明在下游进行有效RNA富集时,采用标记核糖体DNA探针的磁珠纯化小片段PCR非特异性产物,使用半退火夹板杂交,去除5s,5.8s,18s和28s大小的cDNA形式存在的rRNA,并在测序时减少大量无效的Reads数。本发明可以对单个真核细胞进行一站式non‑coding RNA、microRNA和mRNA的总转录组测序并产生该转录组的表达矩阵,摆脱了一个细胞只能进行一种测序的应用局限。

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