公开(公告)号：CN118086594A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410437577.2

申请日：2024-04-12

Applicant: 复旦大学

Inventor： 何纳 ,  周素娟 ,  吴烜赫 ,  王雪琪

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种基于RPA/RAA恒温扩增反应快速检测HIV‑1RNA或DNA各亚型毒株的通用引物组、试剂盒及其应用与方法，包括由SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示核苷酸序列组成的针对HIV‑1保守区基因的引物组，基于RPA/RAA恒温扩增法，在同一管体系内20分钟内完成HIV‑1RNA或DNA各亚型毒株的检测，检测限低至101copies/μL。本发明有3种结果呈现方法：当选择直接电泳法时，可根据目的条带位置进行判定；当选择荧光法时，根据荧光曲线是否CT值

公开(公告)号：CN118895391A

公开(公告)日：2024-11-05

申请号：CN202410988726.4

申请日：2024-07-23

Applicant: 复旦大学

Inventor： 何纳 ,  周素娟 ,  王雪琪 ,  吴烜赫

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种一管式多重RPA/RAA‑CRISPR/Cas12a可视化检测HIV‑1DNA、RNA的引物组、试剂盒及其应用。本发明建立了针对HIV‑1DNA、RNA的多重RPA/RAA与CRISPR/Cas12a联合快速检测方法，该方法能够特异性检测到10copies/μL的HIV‑1DNA、RNA，且与其他常见病毒无交叉反应。本方法结合侧向流层析试纸条和蓝光灯或紫外灯在30分内即可肉眼观察并进行定性判断。本发明的多重RPA/RAA核酸扩增产物被crRNA识别后激活Cas12a对ssDNA核酸小分子酶切释放荧光信号被检测，在一管内实现逆转录、扩增、酶切反应，具有防污染的优势。本发明所述的多重RPA/RAA‑CRISPR/Cas12a可视化检测HIV‑1DNA、RNA的方法兼容了国内所有HIV‑1流行毒株亚型，同时具备特异性强、灵敏度高、操作简单快速、可肉眼观察结果、无设备需求的优势，可供偏远基层、学校、机场等地方使用。

公开(公告)号：CN112695110A

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN202011604528.1

申请日：2020-12-29

Applicant: 复旦大学

Inventor： 周素娟 ,  何纳 ,  丁盈盈 ,  刘星 ,  梁欣悦

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6848 ,  C12Q1/14 ,  C12N15/11 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及聚合酶螺旋反应快速检测肺炎链球菌核酸的引物组、试剂盒及其应用。引物组或试剂盒至少包括一对检测引物Ft和Bt，推荐加入加速引物IF，检测引物Ft选择Ft‑spn时，检测引物Bt选择Bt‑spn，加速引物IF为IF‑spn，检测引物Ft选择Ft‑cps时，检测引物Bt选择Bt‑cps，加速引物IF为IF‑cps。引物Ft‑spn、Bt‑spn、IF‑spn的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.2，SEQ ID NO.3所示，引物Ft‑cps、Bt‑cps、IF‑cps的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4，SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.6所示。扩增反应结束后通过SYBR Green I染料染色，根据颜色是否产生变化就可裸眼观察和判断出目的基因是否存在，从而对样本进行定性检测分析。本发明系首次采用聚合酶螺旋反应检测肺炎链球菌核酸，具有特异性强、灵敏度高、操作简单快速、不依赖大型实验设备等优势。