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公开(公告)号：CN104046701B
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201410267882.8
申请日：2014-06-12
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种不用于诊断目的的兔病毒性出血症病毒RT‑LAMP检测方法，根据RT‑PCR法扩增测序的基因序列，运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4software针对目的序列的6个不同位点，设计了4条特异性引物和1条环引物，通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验，初步建立了RHDV的RT‑LAMP检测法，并进行临床检样初步应用。试验结果显示：该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物，可以检测到25copies的目的基因，对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM‑T‑EBHSV的扩增均为阴性，有着比RT‑PCR法更高的敏感性，在临床检测中该法阳性检出率与RT‑PCR法检测结果相符合。
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公开(公告)号：CN105463135A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201610023649.4
申请日：2016-01-14
Applicant: 四川农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法，包括LAMP最佳反应体系为25μL：1μL 8U Bst DNA聚合酶，2.5μL 10×ThermoPol buffer缓冲液，6μL 2.5mM each dNTPs，4μL 25mM MgCl2，外引物F3、B3(5μM)各1μL、内引物FIP、BIP(50μM)各1μL，1μL DNA模板，2.5μL 10M甜菜碱，加ddH2O补至25μL；在恒温水浴锅内进行LAMP反应，反应温度为63℃，反应时间为45min。本发明的特异性极高，灵敏度极高，快速高效，成本低廉、操作简便，可以有效应用于非洲猪瘟的快速诊断中，且适用于动物检疫机构和养殖场现场操作。
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公开(公告)号：CN107058393B
公开(公告)日：2021-01-08
申请号：CN201710470525.5
申请日：2017-06-20
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用，该方法以拟态弧菌SCCF01株基因组为模板，使用目的基因上臂和目的基因下臂引物对扩增目的基因上臂序列和下臂序列；并扩增卡那霉素抗性基因片段；将扩增得到的卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段进行融合，得到含有卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段的融合PCR产物；将获得融合PCR产物与受体拟态弧菌SCCF01株进行自然转化，经过对抗性标记基因的筛选，获得拟态弧菌SCCF01株的缺失株。本发明操作过程相较于自杀质粒介导的基因重组技术和λ‑RED重组技术，无需电转质粒或打靶DNA，操作简单。
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公开(公告)号：CN108546780A
公开(公告)日：2018-09-18
申请号：CN201810383767.5
申请日：2018-04-26
Applicant: 四川农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2521/107 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明涉及检测技术领域，特别涉及一种同时检测RHDV和RHDVa的PCR引物及其试剂盒和非诊断目的检测方法。该PCR引物由RHDV检测引物和RHDVa检测引物组成；RHDV检测引物由SEQ ID NO：1所示的上游引物和SEQ ID NO：2所示的下游引物组成；RHDVa检测引物由SEQ ID NO：3所示的上游引物和SEQ ID NO：4所示的下游引物组成。本发明具有特异性好、灵敏且准确、无需大型仪器设备或后续测序验证、操作简便且快速等优点。
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公开(公告)号：CN106350460A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201611035630.8
申请日：2016-11-21
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法，该培养基由以下原料制备而成：琼脂粉3g；氯化钠0.5-1g；蒸馏水或超纯水150mL；DMEM培养液50-100mL；葡萄糖0.175-0.35g，双抗2-3mL；胎牛血清(犊牛血清)0-6mL；所述双抗为青霉素与链霉素各20000U/mL。本发明所制备的培养基不仅适用于霉菌培养的营养需求，并且制作程序简化，培养基使用方便和便于结果的观察。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104046701A
公开(公告)日：2014-09-17
申请号：CN201410267882.8
申请日：2014-06-12
Applicant: 四川农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种兔病毒性出血症病毒RT-LAMP检测方法，根据RT-PCR法扩增测序的基因序列，运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4 software针对目的序列的6个不同位点，设计了4条特异性引物和1条环引物，通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验，初步建立了RHDV的RT-LAMP检测法，并进行临床检样初步应用。试验结果显示：该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物，可以检测到25copies的目的基因，对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM-T-EBHSV的扩增均为阴性，有着比RT-PCR法更高的敏感性，在临床检测中该法阳性检出率与RT-PCR法检测结果相符合。
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公开(公告)号：CN115725511B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202211039517.2
申请日：2022-08-29
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明中公开了一种杂交瘤细胞株R2McAb2A1，所述杂交瘤细胞R2McAb2A1保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2022年7月27日，保藏编号为CCTCCNO:C2022205。本发明同时公开了由上述杂交瘤细胞株R2McAb2A1分泌的单克隆抗体。本发明还公开了上述单克隆抗体在制备兔出血症病毒2型检测试剂盒中的应用。本发明通过杂交瘤技术成功制备出一株杂交瘤细胞株R2McAb2A1，其分泌出的单克隆抗体与兔出血症病毒2型(RHDV2)VP60蛋白产生特异性免疫反应；且经间接ELISA试验、Westernblot试验与血凝与血凝抑制试验的检测，该单克隆抗体效价高，特异性良好，能有效鉴别兔出血症病毒1型(RHDV1)毒株与RHDV2毒株。(56)对比文件田浪;王红宁;李建文;廖娟;张夏兰;周万蓉;王鸿宾.一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析.畜牧兽医学报.2006,(10),全文.
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公开(公告)号：CN107201376A
公开(公告)日：2017-09-26
申请号：CN201710438804.3
申请日：2017-06-12
Applicant: 四川农业大学
CPC classification number: Y02A50/407 , C12N15/79 , A61K39/0275 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K2039/523 , A61K2039/53 , A61K2039/542 , A61K2039/552 , A61K2039/55533 , A61K2039/575 , C07K14/55 , C12N2770/16034 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开了一种兔瘟口服疫苗IL‑2佐剂及应用，该兔瘟口服疫苗IL‑2佐剂是由重组菌SL7207‑pVAX1‑IL‑2和重组菌SL7207‑pVAX1‑VP60混合制备而成。本发明分别构建减毒沙门氏菌SL7207递呈的重组菌株SL7207‑pVAX1‑IL2和SL7207‑pVAX1‑VP60并将两种重组细菌共同免疫家兔，IL‑2能够发挥免疫刺激作用从而增强口服疫苗的免疫效果。本发明的佐剂安全、生物安全性高，免疫方式简单高效，疫苗制备简单并且具有双重佐剂效果。
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公开(公告)号：CN119391581A
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202411593501.5
申请日：2024-11-08
Applicant: 四川农业大学 , 四川省动物疫病预防控制中心
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一株多杀性巴氏杆菌荚膜突变株及其应用，属于微生物领域，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 20242234。小鼠免疫攻毒试验和Pm菌株抗体检测间接ELISA方法的检测试验表明，RPmF2019s具有更良好的免疫效果且作为Pm检测ELISA方法包被原更具优势性。
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公开(公告)号：CN111500790A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010525553.4
申请日：2020-06-10
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种荧光定量PCR检测非洲猪瘟的引物探针组及其应用，所述的引物为MGF360-F和MGF360-R，所述的探针为MGF360-Taq Man，所述的MGF360-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的MGF360-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的MGF360-Taq Man的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，并提供了该引物探针组用于检测非洲猪瘟的方法和试剂盒。本发明引物探针组具有高灵敏性和特异性，弥补现有技术的缺陷，为我国生猪产业的复兴奠定坚实的技术储备与理论基础。
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