公开(公告)号：CN104046701B

公开(公告)日：2016-10-05

申请号：CN201410267882.8

申请日：2014-06-12

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 杨泽晓 ,  徐秋梅 ,  王印 ,  汪开毓 ,  姚学萍 ,  曾辉 ,  耿毅

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种不用于诊断目的的兔病毒性出血症病毒RT‑LAMP检测方法，根据RT‑PCR法扩增测序的基因序列，运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4software针对目的序列的6个不同位点，设计了4条特异性引物和1条环引物，通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验，初步建立了RHDV的RT‑LAMP检测法，并进行临床检样初步应用。试验结果显示：该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物，可以检测到25copies的目的基因，对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM‑T‑EBHSV的扩增均为阴性，有着比RT‑PCR法更高的敏感性，在临床检测中该法阳性检出率与RT‑PCR法检测结果相符合。

公开(公告)号：CN104046701A

公开(公告)日：2014-09-17

申请号：CN201410267882.8

申请日：2014-06-12

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 杨泽晓 ,  徐秋梅 ,  王印 ,  汪开毓 ,  姚学萍 ,  曾辉 ,  耿毅

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明公开了一种兔病毒性出血症病毒RT-LAMP检测方法，根据RT-PCR法扩增测序的基因序列，运用在线LAMP引物设计软件Primer Explorer V4 software针对目的序列的6个不同位点，设计了4条特异性引物和1条环引物，通过反应条件优化、敏感性试验和特异性试验，初步建立了RHDV的RT-LAMP检测法，并进行临床检样初步应用。试验结果显示：该法可以扩增出183bp以上的一个梯状条带产物，可以检测到25copies的目的基因，对兔大肠杆菌、兔巴氏杆菌和实验室构建的欧洲野兔综合症病毒蛋白VP60基因重组质粒pGM-T-EBHSV的扩增均为阴性，有着比RT-PCR法更高的敏感性，在临床检测中该法阳性检出率与RT-PCR法检测结果相符合。