公开(公告)号：CN103173559B

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201310121958.1

申请日：2013-03-26

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 朱砺 ,  张顺华 ,  朱康平 ,  李雪梅 ,  李学杰 ,  陈晨 ,  洪蜜 ,  袁红敏 ,  张宇 ,  熊勇

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了实时荧光PCR中目的基因的表达量的校正方法，本方法主要是通过看家基因模板和已有cDNA按照一定比例的混合以后作为模板进行荧光定量，根据混合的比例所导致的Ct值的差异来计算得到看家基因在各个样本中的表达量，通过这个定量结果来对目的基因的表达量进行校正。

公开(公告)号：CN103290105A

公开(公告)日：2013-09-11

申请号：CN201310041300.X

申请日：2013-02-01

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 高菲 ,  朱砺 ,  沈静 ,  李雪梅 ,  张顺华 ,  李学伟 ,  李学杰 ,  沈林園 ,  雷怀刚 ,  蒋小兵

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种猪源性成分实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：设计猪特异性引物、内参照GCG-R基因的外部引物和内部引物；PCR扩增内参照GCG-R基因中长度为270bp的基因片段；用DEPC水将基因片段稀释10倍；提取样本中的DNA；采用猪特异性引物、内部引物和稀释后的基因片段对DNA进行猪源性成分实时荧光PCR检测。本发明还公开了一种猪源性成分实时荧光PCR检测方法采用的引物，包括猪特异性引物、外部引物和内部引物。本发明通过引入内参照GCG基因模板及其引物，能够准确、有效、快捷地检测猪源性成分，检测结果准确可靠。与现有鉴定技术相比，本发明可以实现对肉食品中是否含有猪源性成分进行准确、快捷的鉴别。

公开(公告)号：CN103173559A

公开(公告)日：2013-06-26

申请号：CN201310121958.1

申请日：2013-03-26

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 朱砺 ,  张顺华 ,  朱康平 ,  李雪梅 ,  李学杰 ,  陈晨 ,  洪蜜 ,  袁红敏 ,  张宇 ,  熊勇

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了实时荧光PCR中目的基因的表达量的校正方法，本方法主要是通过看家基因模板和已有cDNA按照一定比例的混合以后作为模板进行荧光定量，根据混合的比例所导致的Ct值的差异来计算得到看家基因在各个样本中的表达量，通过这个定量结果来对目的基因的表达量进行校正。

公开(公告)号：CN103103280A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201310041295.2

申请日：2013-02-01

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 沈林園 ,  朱砺 ,  李雪梅 ,  沈静 ,  张顺华 ,  李学伟 ,  李学杰 ,  高菲 ,  蒋小兵 ,  郑梦月

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基因组多拷贝基因拷贝数的快速批量测定方法，一种利用PCR技术对基因组多拷贝基因拷贝数的快速批量测定方法，本方法通过对同一组织DNA样本分别实施某些多拷贝基因和某已知单拷贝基因的PCR扩增并纯化产物，测定各基因PCR纯化产物的质量浓度后根据其核酸序列，将质量浓度换算成摩尔浓度，再分别以梯度稀释后的PCR产物以及组织DNA样本为模板通过同一RT-PCR反应制作这些基因的标准曲线同时获得各基因在DNA样品中的浓度，由于在同一抽提效率下，多拷贝基因的拷贝数就是在相同体积下多拷贝基因的数量除以单拷贝基因的数量，由此可以利用一次96孔RT-PCR反应测定同一生物个体中7个不同多拷贝基因的拷贝数；也可以利用一次384孔RT-PCR反应测定11个不同多拷贝基因的拷贝数，实现快速批量的测定效率。