公开(公告)号：CN108314709A

公开(公告)日：2018-07-24

申请号：CN201810239679.8

申请日：2018-03-22

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王秀然 ,  刘思阳 ,  付玉芹 ,  王岩 ,  卢天成 ,  李思圆 ,  孙喆 ,  李海燕 ,  胡祥坤 ,  王茗宇 ,  郑晗旭

IPC: C07K14/23 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/22 ,  C07K1/16 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  A61K39/39 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04

Abstract: 一种重组糖基化蛋白P39及其制备方法和应用，涉及重组蛋白领域。本发明包括：对p39基因进行克隆，将PCR片段与克隆载体pMD-19T(Simple)相连，经测序和酶切验证正确后将目的片段与真核表达载体pPICZαA相连构建重组表达质粒pPICZαA-P39；电转化法将质粒pPICZαA-P39转化至毕赤酵母GS115感受态细胞，经诱导表达，亲和层析纯化，分子筛进一步分离纯化后经western blot验证即为目的蛋白，最佳发酵条件为：pH6、磷酸盐浓度0.02M、甲醇诱导浓度1％、诱导72h，纯化后的重组蛋白P39浓度为5mg/ml。本发明为布鲁氏菌流行性疾病免疫预防奠定基础。