一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法

    公开(公告)号:CN118344459B

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202410542803.3

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法,本发明涉及一种黏蛋白提取纯化的方法。本发明解决了现有动物消化道黏蛋白提取纯化的方法存在的无法达到最佳效果的问题。方法:溶液配制、获得黏液样品、黏液粗提液的提取与制备、黏蛋白提取纯化。本发明延长半胱氨酸蛋白酶抑制剂孵育时间,进而在减少半胱氨酸蛋白酶抑制剂浓度梯度的条件下,尽可能的保证提取蛋白的新鲜和活性,达到和蛋白提取浓度一致的效果。本发明降低了离心的转速,因此在仪器的选择上和可操作上,降低了提取的难度。本发明的方法保证了蛋白质的新鲜,电泳检测结果显示没有拖尾的现象,提取效果好,提取纯度高。

    一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法

    公开(公告)号:CN117229997A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202311220857.X

    申请日:2023-09-21

    Abstract: 一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法,涉及细胞生物技术领域,具体涉及一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法。是要解决现有方法分离纯化得到上皮细胞无法反映出消化道的实际机能,现有方法无法用于不同种属动物,不同生理状态动物的问题。方法:一、将动物肠段去除肠道脂肪和结缔组织,清洗;二、将肠段切成小段放入Na2EDTA溶液中孵育;三、上皮剥离,孵育;四、终止消化,得到细胞沉淀;五、取Percoll分离液,离心形成线性密度梯度;六、将细胞悬液加入到线性密度梯度液面上,离心收集下层细胞,离心,得到消化道杯状细胞沉淀。本发明用于提取纯化动物消化道杯状细胞。

    一种大豆抗原β-conglycinin的检测方法

    公开(公告)号:CN104897902A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510271439.2

    申请日:2015-05-25

    CPC classification number: G01N33/68 G01N33/531

    Abstract: 本发明一种大豆抗原β-conglycinin的检测方法,建立一种检测大豆抗原β-conglycinin直接ELISA方法。由方阵实验确定包被抗原为1μg/mL,抗体最适稀释度1:400,由正交响应面实验设计确定最佳封闭时间为58.31min,酶标抗体最佳反应时间为139.16min,底物液作用最佳反应时间为19.43min,灵敏度达1ug/ml,线性检测范围在20ng/ml~640ng/ml之间。板间变异系数(CV%)的平均数为8.16%,板内变异系数(CV%)的平均数为6.91%,交叉反应小于20%。本发明检测方法具有样品前处理相对简单、快速、成本低、仪器化程度低、耗时短等特点,可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测,适用于现场监控和大量样本筛查。

    于污染条件下分离肠道上皮细胞的方法

    公开(公告)号:CN114480255A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210240520.4

    申请日:2022-03-10

    Abstract: 本申请公开了一种于污染条件下分离肠道上皮细胞的方法,污染条件包括肠道包含细菌数不低于105cfu/m3以及所述方法实施环境中浮游微生物不低于104cfu/L,该方法包括对肠道组织块进行消化、密度梯度离心得到纯化的上皮细胞步骤。本申请适用于不同年龄阶段和生理状态的不同种属动物(新生和已采食动物均可)肠道上皮细胞的分离纯化,且无需控制和使用无菌提取条件及细胞传代纯化技术,操作方法快速、简便、高效,所用仪器设备为实验常规仪器设备,成本低廉,在医学、动物学、营养学等领域的研究以及试剂盒的研发等具有重要的指导意义。

    大豆凝集素提取纯化方法

    公开(公告)号:CN102212105B

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201110114904.3

    申请日:2011-05-05

    Abstract: 本发明公开了亲和层析填料D-GalN-FF-sepharose4B,成本低、机械强度好,能够耐受较高的纯化压力,流动相的流速加快,纯化周期短,化学性质稳定,能够耐受较高浓度的强碱,使用过的填料可以再生使用,再生方法简单;本发明大豆凝集素纯化方法,纯化工艺比以往的纯化工艺简单、省时,只需一步离心,避免了过量硫酸铵的使用,遭成环境的污染。一个纯化周期内产量(>100mg)高于其他方法一个周期内的纯化产量(<45mg);可实现工业化生产。对本发明制得的纯化大豆凝集素,进行了大豆凝集素分子量及纯度的测定、Western blot鉴定、兔红细胞凝集效价的比较,与标准品相同,无差异。

    一种快速区分黑猪肉与白猪肉的方法

    公开(公告)号:CN119269190A

    公开(公告)日:2025-01-07

    申请号:CN202411426765.1

    申请日:2024-10-14

    Abstract: 一种快速区分黑猪肉与白猪肉的方法,本发明涉及一种区分黑猪肉与白猪肉的方法。本发明解决了现有区分黑猪肉与白猪肉的方法操作难度较高、操作复杂、时间长、无法快速有效区分的问题。本发明方法:一、制成匀浆液;将匀浆液进行超声破碎或反复冻融,再离心取上清液;二、上清液测定DHA的含量。本发明通过快速、有效测定DHA含量,进而区分出黑猪肉与白猪肉。本发明的方法操作简单,不需要使用昂贵的仪器设备,检测周期短,极大的降低了黑猪肉和白猪肉的区分成本。

    一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法

    公开(公告)号:CN118344459A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410542803.3

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法,本发明涉及一种黏蛋白提取纯化的方法。本发明解决了现有动物消化道黏蛋白提取纯化的方法存在的无法达到最佳效果的问题。方法:溶液配制、获得黏液样品、黏液粗提液的提取与制备、黏蛋白提取纯化。本发明延长半胱氨酸蛋白酶抑制剂孵育时间,进而在减少半胱氨酸蛋白酶抑制剂浓度梯度的条件下,尽可能的保证提取蛋白的新鲜和活性,达到和蛋白提取浓度一致的效果。本发明降低了离心的转速,因此在仪器的选择上和可操作上,降低了提取的难度。本发明的方法保证了蛋白质的新鲜,电泳检测结果显示没有拖尾的现象,提取效果好,提取纯度高。

    一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN104865388A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510271474.4

    申请日:2015-05-25

    CPC classification number: G01N33/68

    Abstract: 本发明涉及一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法及应用。所述一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法通过优化直接ELISA检测法的参数,包括包被抗原为1μg/mL,抗体最适稀释度1:800;最佳封闭时间为60.42min,酶标抗体最佳反应时间为149.63min,底物液作用最佳反应时间为15.03min,最终绘制直接ELISA检测法的标准曲线。在应用直接ELISA检测法测量时,将待测大豆球蛋白溶液先后与大豆球蛋白特异多克隆一抗、将酶标记抗兔IgG作为酶标二抗进行反应,再加入底物液显色,用标准曲线进行判断,直接得到待测大豆球蛋白溶液的大豆球蛋白含量。该检测方法具有简单,快速、成本低,耗时短等特点,可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测。

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