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公开(公告)号:CN116554355A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310532492.8
申请日:2023-05-12
Applicant: 可孚医疗科技股份有限公司
Inventor: 黄微
Abstract: 本发明提供了一种融合葡萄糖氧化酶及其制备方法和应用,该融合葡萄糖氧化酶包括原料组分野生型葡萄糖氧化酶和碱性氨基酸侧链。该制备方法包括制备由所述野生型葡萄糖氧化酶通过连接肽连接精氨酸构成的融合葡萄糖氧化酶和由所述野生型葡萄糖氧化酶通过连接肽连接组氨酸构成的融合葡萄糖氧化酶。该应用包括所述融合葡萄糖氧化酶在电化学传感器方面的应用。本发明制备方法简单易行,便于大量制备所述融合葡萄糖氧化酶,具有很好的应用前景,所形成的融合葡萄糖氧化酶具有较高的电子传递效率,所制作的电化学传感器具有较高的灵敏度和较快的响应速度,更适用于制作电化学传感器。
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公开(公告)号:CN114854809A
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202210613419.9
申请日:2022-05-31
Applicant: 可孚医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种微氧诱导大肠杆菌发酵重组类人源胶原蛋白质的方法,包括菌种活化、种子液的培养和分批补料发酵,其特征在于,所述分批补料发酵的过程包括:细胞快速繁殖阶段:将二级种子液接种至基础发酵培养基中进行培养;在培养过程中,溶氧维持在30%‑33%,通过向发酵液中补加第一种补料培养基来控制基因工程菌的比生长速率在0.1‑0.5之间;微氧诱导表达重组蛋白阶段:向发酵液中流加乳糖诱导基因工程菌表达蛋白,并将第一种补料培养基更换为第二种补料培养基;根据发酵液中的溶氧量进行反馈补料以及流加乳糖诱导剂,溶氧维持在0%‑5%,直至发酵结束。
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公开(公告)号:CN115043897B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202210686277.9
申请日:2022-06-16
Applicant: 可孚医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种去除重组蛋白内毒素的方法,包括步骤S1、对第一填料柱进行第一预处理;步骤S2、上样;步骤S3、去除待处理样品中的内毒素,先采用第二平衡液冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,再采用体积分数为10%‑60%的异丙醇冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,以去除待处理样品中的内毒素,获得结合在第一填料柱上的粗制蛋白;所述第二平衡液包括体积分数为0.5%‑1.25%的曲拉通X‑114。本发明将TritonX‑114与异丙醇组合使用,以提高对内毒素的去除率,且降低去除成本。
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公开(公告)号:CN114854809B
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202210613419.9
申请日:2022-05-31
Applicant: 可孚医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种微氧诱导大肠杆菌发酵重组类人源胶原蛋白质的方法,包括菌种活化、种子液的培养和分批补料发酵,其特征在于,所述分批补料发酵的过程包括:细胞快速繁殖阶段:将二级种子液接种至基础发酵培养基中进行培养;在培养过程中,溶氧维持在30%‑33%,通过向发酵液中补加第一种补料培养基来控制基因工程菌的比生长速率在0.1‑0.5之间;微氧诱导表达重组蛋白阶段:向发酵液中流加乳糖诱导基因工程菌表达蛋白,并将第一种补料培养基更换为第二种补料培养基;根据发酵液中的溶氧量进行反馈补料以及流加乳糖诱导剂,溶氧维持在0%‑5%,直至发酵结束。
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公开(公告)号:CN115043897A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210686277.9
申请日:2022-06-16
Applicant: 可孚医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种去除重组蛋白内毒素的方法,包括步骤S1、对第一填料柱进行第一预处理;步骤S2、上样;步骤S3、去除待处理样品中的内毒素,先采用第二平衡液冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,再采用体积分数为10%‑60%的异丙醇冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,以去除待处理样品中的内毒素,获得结合在第一填料柱上的粗制蛋白;所述第二平衡液包括体积分数为0.5%‑1.25%的曲拉通X‑114。本发明将TritonX‑114与异丙醇组合使用,以提高对内毒素的去除率,且降低去除成本。
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