公开(公告)号：CN110396509B

公开(公告)日：2021-02-12

申请号：CN201910670475.4

申请日：2019-07-24

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  申玉姣 ,  熊伟 ,  凌雪萍 ,  卢英华

IPC分类号： C12N9/04 ,  C12N15/11 ,  H01M8/16

摘要： 本发明提供了一种改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述方法通过对葡萄糖脱氢酶保守序列GXXXGXG第四位氨基酸进行定点突变，无需通过大量筛选就可以简单直接获得改变辅酶活性和偏好性的突变蛋白，可以广泛应用酶催化辅酶再生反应。在本发明实施例中，通过对不同来源的葡萄糖脱氢酶中广泛存在的保守序列GXXXGXG中与烟酰胺辅酶核糖2’‑磷酸结合的第4位氨基酸进行定点突变，最终得到四种葡萄糖脱氢酶突变体T17G、T17K、T17R以及K17G，且经过验证，其酶活以及偏好性等都发生了变化。

公开(公告)号：CN110396509A

公开(公告)日：2019-11-01

申请号：CN201910670475.4

申请日：2019-07-24

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  申玉姣 ,  熊伟 ,  凌雪萍 ,  卢英华

IPC分类号： C12N9/04 ,  C12N15/11 ,  H01M8/16

摘要： 本发明提供了一种改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述方法通过对葡萄糖脱氢酶保守序列GXXXGXG第四位氨基酸进行定点突变，无需通过大量筛选就可以简单直接获得改变辅酶活性和偏好性的突变蛋白，可以广泛应用酶催化辅酶再生反应。在本发明实施例中，通过对不同来源的葡萄糖脱氢酶中广泛存在的保守序列GXXXGXG中与烟酰胺辅酶核糖2’-磷酸结合的第4位氨基酸进行定点突变，最终得到四种葡萄糖脱氢酶突变体T17G、T17K、T17R以及K17G，且经过验证，其酶活以及偏好性等都发生了变化。

公开(公告)号：CN111186874B

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN202010055132.X

申请日：2020-01-17

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  熊攀 ,  申玉姣 ,  张旺

IPC分类号： C02F1/28 ,  C02F1/30 ,  B01J20/22 ,  B01J31/38 ,  B01J35/00 ,  B01J20/30 ,  C02F101/20

摘要： 本发明涉及水污染处理领域，提供了一种硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料及其制备方法和应用。本发明通过将钛酸四丁酯原位还原后与氧化石墨烯复合，然后再与N‑(三甲氧基甲硅烷基丙基)乙二胺三乙酸钠反应，制备得到了以氧化石墨烯为基底，键合二氧化钛和N‑(三甲氧基甲硅烷基丙基)乙二胺三乙酸钠的复合材料。本发明由上述方法制备得到的硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料对污染物的吸附性能较好，而且光催化性能较好。实施例结果表明，本发明提供的硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料能够有效降低污染物Cd2+的含量，且对苯酚的降解效果较好。

公开(公告)号：CN111849933A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010800001.X

申请日：2020-08-11

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  熊伟 ,  申玉姣 ,  卢英华

IPC分类号： C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明所述突变体是由野生型亮氨酸脱氢酶氨基酸序列突变而来，所述野生型亮氨酸脱氢酶氨基酸序列第89位的赖氨酸饱和突变为NNN或第122位的丙氨酸定点突变为甘氨酸，所述野生型亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。实验结果表明：K89T亮氨酸脱氢酶对Asn和Thr表现出一定活性，A122G亮氨酸脱氢酶对Phe、His、Met表现一定活性，而野生型亮氨酸脱氢酶对这些氨基酸完全无活性；并且，K89T亮氨酸脱氢酶对于Asp氧化脱氨反应的酶活是野生型亮氨酸脱氢酶的2倍。

公开(公告)号：CN111186874A

公开(公告)日：2020-05-22

申请号：CN202010055132.X

申请日：2020-01-17

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  熊攀 ,  申玉姣 ,  张旺

IPC分类号： C02F1/28 ,  C02F1/30 ,  B01J20/22 ,  B01J31/38 ,  B01J35/00 ,  B01J20/30 ,  C02F101/20

摘要： 本发明涉及水污染处理领域，提供了一种硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料及其制备方法和应用。本发明通过将钛酸四丁酯原位还原后与氧化石墨烯复合，然后再与N-(三甲氧基甲硅烷基丙基)乙二胺三乙酸钠反应，制备得到了以氧化石墨烯为基底，键合二氧化钛和N-(三甲氧基甲硅烷基丙基)乙二胺三乙酸钠的复合材料。本发明由上述方法制备得到的硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料对污染物的吸附性能较好，而且光催化性能较好。实施例结果表明，本发明提供的硅烷化还原氧化石墨烯二氧化钛复合材料能够有效降低污染物Cd2+的含量，且对苯酚的降解效果较好。

公开(公告)号：CN111849933B

公开(公告)日：2022-01-14

申请号：CN202010800001.X

申请日：2020-08-11

申请人： 厦门大学

发明人： 敬科举 ,  熊伟 ,  申玉姣 ,  卢英华

IPC分类号： C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明所述突变体是由野生型亮氨酸脱氢酶氨基酸序列突变而来，所述野生型亮氨酸脱氢酶氨基酸序列第89位的赖氨酸饱和突变为NNN或第122位的丙氨酸定点突变为甘氨酸，所述野生型亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。实验结果表明：K89T亮氨酸脱氢酶对Asn和Thr表现出一定活性，A122G亮氨酸脱氢酶对Phe、His、Met表现一定活性，而野生型亮氨酸脱氢酶对这些氨基酸完全无活性；并且，K89T亮氨酸脱氢酶对于Asp氧化脱氨反应的酶活是野生型亮氨酸脱氢酶的2倍。