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公开(公告)号：CN118440933A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410409451.4
申请日：2024-04-07
Applicant: 南昌大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种基于尿嘧啶碱基PCR的基因组步移方法，包括：1）在初级PCR中使用dUTP代替dTTP进行扩增；2）对初级PCR产物过柱纯化去除多余的底物、引物和酶；3）然后用初级特异性引物Specific primer，SP和四种正常碱基（A、T、C、G），对纯化产物进行单引物单循环扩增，合成完全由正常碱基组成的单链DNA；4）随后对单引物单循环扩增产物进行UNG处理，破坏含U的DNA，而在单引物单循环扩增中合成的分子则不受影响；5）最后目标单链DNA分子在后续的高严格循环中被特异性引物SP2和AP进行指数扩增得到目的产物。本发明方法能够有效扩增目标DNA分子，抑制非目标产物的扩增，相较传统PCR方法，具有更高的成功率和步移效率。
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公开(公告)号：CN112779323B
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202110007363.8
申请日：2021-01-05
Applicant: 南昌大学
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6876 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及分子PCR步移技术领域，具体为一种滴斗式的步移引物及基于滴斗式引物的PCR新方法，其中步移引物包括三条滴斗引物DBP，长度均为25bp，三者5′端12bp、3′端3bp完全相同，中间10bp两两错配，滴斗引物只能在低温下退火到前一轮产物的滴斗互补位点，形成滴斗结构，并延伸合成新的含特异性引物互补位点的目标单链；在随后的一个高退火循环中，目标单链转变为两端分别被特异性引物和滴斗引物包围的双链分子，从而被指数扩增；非目标单链由于缺乏任何引物的完整退火位点，不能转变为被任何引物包围的双链而无法扩增。本发明通过步移获取短乳杆菌CD0817和水稻基因组已知DNA的未知侧翼，验证了该方法的可行性。
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公开(公告)号：CN115462504A
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202210899010.8
申请日：2022-07-28
Applicant: 南昌大学
IPC: A23L11/30
Abstract: 本发明提出了一种减少大豆及制品豆腥味的方法，通过嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)CGMCC 1.1854菌种，得到乳酸菌酸浆液。每份大豆加入1.5份乳酸菌酸浆液和1.5份水，在25℃下浸泡发酵8h，利用酸和蛋白酶等作用，使大豆中的脂肪氧化酶活性和脲酶活性降低到小于2％，并提高大豆蛋白肽含量，得到脱豆腥味整颗粒湿大豆，通过常规食品加工工艺即可生产出无豆腥味干大豆、无豆腥味豆浆、豆腐等豆制品。
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公开(公告)号：CN109777748A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201811431445.X
申请日：2018-11-27
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供一株高产GABA的短乳杆菌CD0817，已于2018年7月9日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，中国典型培养物保藏中心，其简称为CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M2018462，本发明的短乳杆菌CD0817具有高产GABA的特性，基因功能更加丰富，可在高渗透压环境下生长。
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公开(公告)号：CN104404092B
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201410608982.2
申请日：2014-11-04
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种共轭亚油酸异构体的生物富集方法，包括生物富集培养基的制备、生产用菌种的制备、共轭亚油酸异构体的生物富集等步骤，得到c9,t11‑共轭亚油酸异构体。本发明所得产品中c9,t11‑CLA异构体的含量大于质量百分比0.45%，底物的转化率大于90%，产品中c9,t11‑CLA异构体的含量显著增加，通过生物富集培养，不仅得到富含c9,t11‑CLA异构体的抗癌功能产品，脱脂大豆中的蛋白质和纤维素也被乳酸菌分解成多肽和可溶性膳食纤维等具有保健功能的活性因子，产物的保健功能显著增强，进一步拓宽了该产品的应用范围。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104480150B
公开(公告)日：2017-08-25
申请号：CN201410609389.X
申请日：2014-11-04
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种共轭亚麻酸异构体的生物富集方法，包括生物富集培养基的制备、生产用菌种的制备、共轭亚麻酸异构体的生物富集等步骤，得到c9,t11,c15‑共轭亚麻酸异构体。本发明所得产品中c9,t11,c15‑共轭亚麻酸异构体的含量大于质量百分比0.36%，底物的转化率大于90%，通过生物富集培养，不仅得到富含c9,t11,c15‑共轭亚麻酸异构体的抗癌功能产品，脱脂大豆中的蛋白质和纤维素也被乳酸菌分解成多肽和可溶性膳食纤维等具有保健功能的活性因子，产物的保健功能显著增强，进一步拓宽了该产品的应用范围。
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公开(公告)号：CN104404092A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410608982.2
申请日：2014-11-04
Applicant: 南昌大学
CPC classification number: C12P7/6427
Abstract: 一种共轭亚油酸异构体的生物富集方法，包括生物富集培养基的制备、生产用菌种的制备、共轭亚油酸异构体的生物富集等步骤，得到c9,t11-共轭亚油酸异构体。本发明所得产品中c9,t11-CLA异构体的含量大于质量百分比0.45%，底物的转化率大于90%，产品中c9,t11-CLA异构体的含量显著增加，通过生物富集培养，不仅得到富含c9,t11-CLA异构体的抗癌功能产品，脱脂大豆中的蛋白质和纤维素也被乳酸菌分解成多肽和可溶性膳食纤维等具有保健功能的活性因子，产物的保健功能显著增强，进一步拓宽了该产品的应用范围。
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公开(公告)号：CN101333508A
公开(公告)日：2008-12-31
申请号：CN200810106950.7
申请日：2008-06-26
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种高产γ－氨基丁酸的短乳杆菌，其特征和工艺方法步骤为：经鉴定为Lactobacillus brevis(短乳杆菌)，国家菌种保藏号：Lactobacillus brevis CCTCCM 208054。将保藏于MRS琼脂斜面的短乳杆菌，转接于MRS液体培养基，经活化后，以2－5％的接种量接种于MRSG液体培养基，于25－30℃培养60－90h，发酵液中的γ－氨基丁酸达到50－145mM。
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公开(公告)号：CN118048440A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410104483.3
申请日：2024-01-25
Applicant: 南昌大学
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于N7HW‑PCR的基因组步移引物及方法，通过将一级PCR的随机步移引物pWP的5’端的7个碱基简并为N7，其余部分保持不变，得到引物ds/tWP；将ds/tWP用于二级和三级PCR中，使得二级、三级步移引物与一级步移引物之间不完全匹配，进而使一级PCR所得非目标产物在二级和三级PCR中不能被有效扩增而被消除。本发明方法相较于传统PCR方法，具有引物用量少、操作简单、效率高等优点。
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公开(公告)号：CN117844910A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311854834.4
申请日：2023-12-29
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明公开了一种基于尿嘧啶引物PCR的基因组步移方法，通过在随机引物（arbitrary walking primer，AWP）3’端的倒数第二个位置引入了尿嘧啶碱基，并在二级UP‑PCR之前，使AWP序列在UNG的作用下被破坏，使得在二级UP‑PCR的热循环中，避免不需要的扩增子被扩增，仅两轮UP‑PCR就足以完成基因组步移任务，并获得足够的扩增特异性，相较传统的热不对称交错PCR、腕表PCR、桥接PCR等基因组步移方法更为简单易行，且具有同等的成功率。
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