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公开(公告)号：CN103690997B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310654387.8
申请日：2013-12-05
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明公开一种用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒，包括溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV。溶栓液的各组分及浓度为：尿激酶100000IU/L、NaCL 9g/L；灌注液I的各组分及浓度为：EDTA 0.2g/L、NaCL 9g/L；灌注液II的各组分及浓度为：十二烷基硫酸钠5g/L、NaCL 9g/L；灌注液III的组分及浓度为：DNase I0.01g/L；灌注液IV的组分及浓度为：过氧乙酸0.01%。溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV依次对肝脏进行灌注，可制备去细胞肝脏支架，此方法去肝脏细胞效果稳定，能够保留完整的细胞外基质结构及胶原蛋白等成分。
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公开(公告)号：CN103421831B
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201310282063.6
申请日：2013-07-05
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明公开一种用于提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达的嵌合基因及其构建方法；所述嵌合基因，包括人核因子孕烷X受体基因全长序列和野生型P53基因的激活域序列。还有一种重组真核表达载体，其包括前所述的嵌合基因；一种如前所述的重组真核表达载体的构建方法，其中，其包括以下步骤：从正常人原代肝细胞来源的cDNA分别克隆所述人核因子孕烷X受体基因全长序列和野生型P53基因的激活域序列；将前述步骤获得的两段序列定向克隆到所述PCI-neo哺乳动物表达载体的β-globin/IgG嵌合内含子序列和SV40Late poly(A)信号序列之间，获得重组真核表达载体。本发明能够明显提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达。
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公开(公告)号：CN101837152B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010130359.2
申请日：2010-03-19
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12M3/00
Abstract: 本发明公开一种辐射式流向生物反应器及其控制系统和方法，其主要改进在于其中的生物反应器，该生物反应器中，对应于出口通路和入口通路之间的滤膜在其紧邻入口通路处设置结扎件以改变第二流体进入反应室后的流向，该结扎件设有箍紧包覆滤膜的芯轴的轴孔，结扎件的半径占3/10至7/10筒件半径。本发明综合解决了现有的生物反应器存在的灌注不均、死腔、堵塞及交换率低等问题。
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公开(公告)号：CN102311938A
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN201110276700.X
申请日：2011-09-16
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种用于肝细胞培养的无血清培养基，其包含基础培养基和添加组分。其中，所述添加组分包括：胰岛素0.1～10μg/mL、转铁蛋白0.5～10μg/mL、亚硒酸钠5～10μg/L、表皮生长因子1～100ng/mL、肝细胞生长因子1～100ng/mL、纤粘连蛋白0.1～1μg/mL、地塞米松0.1～10nmol/mL和胰高血糖素0.05～5μg/mL。本发明所提供的无血清培养基不含有胎牛血清及不含任何动物来源成份，能提供细胞生长增值所需的充足营养与良好环境，各添加组份能通过各种机制在肝细胞培养过程中有效地代替血清成分，细胞生长良好，细胞形态、密度、活力、功能与含血清培养基基本相同。
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公开(公告)号：CN102061284A
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN201010205227.1
申请日：2010-06-13
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明提供了一种人原代肝细胞分离培养方法，包括以下步骤：用D-Hank’s液清洗肝组织表面血块，并将结缔组织剪除；用针头注射器多点穿刺灌注预温38℃的前灌流液，使肝组织块由暗红色变为灰白色且流出的前灌流液变清亮；继以预温的II型胶原酶溶液针头多点穿刺灌注，直至组织块变疏松、失去弹性，表面呈龟背状裂隙，II型胶原酶溶液可循环使用；剪开组织块，钝性分离肝组织，并去除残存的包膜和纤维结缔组织，然后继续在II型胶原酶溶液中37℃震荡消化；将消化物吹打为细胞悬液，在冰浴条件下，过滤，收集过滤后的肝细胞悬液，移至离心管中，低速离心；第一次低速离心所得底层沉淀加入红细胞裂解液，吹打，室温静置后加入DMEM混匀清洗、低速离心，再加入DMEM混匀、低速离心重复2-4次，最后一次低速离心所得沉淀加入Williams’Medium E完全培养基悬浮；调整肝细胞密度为1×105/ml，接种于铺有鼠原胶原的培养瓶中，于CO2培养箱中37℃恒温培养，贴壁后，换液除去死亡及未贴壁细胞，继续培养。本发明建立的人原代肝细胞培养模型简便易行，成本低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107727463B
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN201710841373.5
申请日：2017-09-18
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: G01N1/28 , G01N1/30 , G01N1/34 , G01N33/533 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开一种超厚组织切片的制备方法，其包括以下步骤：获取待观察的组织材料；制备所述组织材料1～8mm的组织切片并对该组织切片进行透明化；对透明化的所述组织切片进行荧光染色。其次是一种组织切片三维组织形态结构的再现方法，其包括以下步骤：制备厚度为1～8mm的透明化组织切片；利用荧光显微镜获取组织切片的图像数据；重组所述图像数据以形成三维模型数据；基于所述三维模型数据输出三维图像。本发明超厚组织切片的制备方法及三维组织形态结构再现的方法，对组织切片进行除脂达到透明以增加激光穿透肝组织的深度，减少光散射，进而实现组织的深度成像，以更真实的状态反映组织的细胞结构，同时提高了成像的效率和保真度。
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公开(公告)号：CN107727463A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201710841373.5
申请日：2017-09-18
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: G01N1/28 , G01N1/30 , G01N1/34 , G01N33/533 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开一种超厚组织切片的制备方法，其包括以下步骤：获取待观察的组织材料；制备所述组织材料1～8mm的组织切片并对该组织切片进行透明化；对透明化的所述组织切片进行荧光染色。其次是一种组织切片三维组织形态结构的再现方法，其包括以下步骤：制备厚度为1～8mm的透明化组织切片；利用荧光显微镜获取组织切片的图像数据；重组所述图像数据以形成三维模型数据；基于所述三维模型数据输出三维图像。本发明超厚组织切片的制备方法及三维组织形态结构再现的方法，对组织切片进行除脂达到透明以增加激光穿透肝组织的深度，减少光散射，进而实现组织的深度成像，以更真实的状态反映组织的细胞结构，同时提高了成像的效率和保真度。
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公开(公告)号：CN103630679B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310597958.9
申请日：2013-11-22
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种单核淋巴细胞体内示踪方法，包括步骤：采集食蟹猴腋窝处的淋巴结；利用密度梯度离心法获取淋巴结中的单核淋巴细胞；将单核淋巴细胞进行荧光染色；将染色后的单核淋巴细胞输注至食蟹猴掌侧大鱼际下方的结缔组织中；再次采集与所述输注位置同侧的食蟹猴腋窝处的淋巴结，并对再次采集的淋巴结采用流式细胞仪进行检测。通过上述方法，本发明能够使荧光染色后的单核淋巴细胞富集于淋巴结中，以便进行免疫示踪。
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公开(公告)号：CN1943785A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610122811.4
申请日：2006-10-17
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明提供了一种治疗肝脏移植排斥反应的悬液，该悬液包含受体骨髓间充质干细胞和缓冲液，还包含受体骨髓造血干细胞。本发明所述的悬液的制备方法是先从受体骨髓中分离得到的受体骨髓间充质干细胞和受体骨髓造血干细胞，再将受体骨髓间充质干细胞调制成细胞浓度为0.25～1×106个/ml得到，或者再将所制得两种干细胞分别调制成细胞浓度为0.25～1×106个/ml的悬液后再按1∶1的比例混合制得。本发明所述的治疗肝脏移植排斥反应的悬液，由于其中骨髓干细胞取自受体本身，因此不仅能有效治疗肝脏移植排斥反应，而且安全性极高，几乎没有不良反应，更无外源性污染和疾病传播问题。
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公开(公告)号：CN103751843A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201310651684.7
申请日：2013-12-05
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明公开了一种制备全肝脏生物支架的试剂盒，包括灌注液Ⅰ和灌注液Ⅱ，其中，灌注液Ⅰ包括0.2g/L？EDTA、25000U/L肝素钠及磷酸缓冲液，灌注液Ⅱ包括2.5g/L十二烷基硫酸钠。利用本试剂盒的灌注液来制备全肝脏生物支架，具体为灌注液Ⅰ以15ml/min的灌注流速经离体肝脏的门静脉对离体肝脏进行灌注，灌注液Ⅱ以3ml/min的灌注流速经离体肝脏的门静脉对离体肝脏进行灌注。通过上述试剂盒和方法，能够降低十二烷基硫酸钠与全肝脏生物支架的接触时间，使制备的全肝脏生物支架最大程度的保留肝脏细胞外基质成分，并可完全去除肝脏细胞。
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