基于CRISPR-Cas12a检测松树脂溃疡病原菌的方法及应用

    公开(公告)号:CN114807311A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210465278.0

    申请日:2022-04-29

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a体系可视化检测松树脂溃疡病病原菌(Fusarium circinatum)的检测方法,该方法通过重组酶聚合酶扩增后的目的DNA片段,再在crRNA序列介导下,引导CRISPR‑Cas12a体系对扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的单链DNA荧光探针得到裂解产物,最后通过裂解产物的显色检测进行判断。该检测平台通过重组酶聚合酶扩增及crRNA识别可双重特异地对松树脂溃疡病病原菌进行检测,特异性强,可视化强,且在灵敏度上可低至1 pg·μL‑1,对于港口的进境植物上携带的松树脂溃疡病病原菌实现即检即防。

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