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公开(公告)号：CN112553183B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011509092.8
申请日：2020-12-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖苷水解酶CmChi3及其在降解胶体几丁质上的应用。将从土壤中筛选到的菌株Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC‑H1进行基因组测序分析、克隆CmChi3、构建重组菌株、表达CmChi3蛋白、纯化HIS‑TAG、并鉴定重组蛋白具有两个催化结构域，两个几丁质结合域，具有内切酶和糖苷水解酶两种酶的性质，能高效水解几丁质并以GlcNAc为终产物。此研究预期为单酶法高效生产GlcNAc提供理论依据和基础。
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公开(公告)号：CN101456843B
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN200910028603.1
申请日：2009-01-04
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07D231/14
Abstract: 本发明涉及医药中间体的制备方法领域，特别涉及一种5-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基吡唑-3-羧酸的制备方法。本发明以对氯苯丙酮和三甲基氯硅烷作用后，与草酰氯反应得到5-(4-氯苯基)-4-甲基-2，3-呋喃二酮(III)，5-(4-氯苯基)-4-甲基-2，3-呋喃二酮(III)与2，4-二氯苯肼缩合得粗品，通过重结晶得到的5-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基吡唑-3-羧酸含量达99.5以上，总收率可达60.9％。本发明合成路线短，条件温和，产率较高，反应中间体质量易于控制，适合工业化，并且产品纯度高，质量稳定。
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公开(公告)号：CN112876438A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110073615.7
申请日：2021-01-20
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07D307/66
Abstract: 本发明公开了一种高纯度3‑乙酰氨基‑5‑乙酰基呋喃的分离纯化方法。3‑乙酰氨基‑5‑乙酰基呋喃（3A5AF）是一种重要的平台化合物，可用来制备众多高附加值化学品，有着广泛的应用前景。本发明分离纯化方法，包括萃取，脱色，结晶等工艺过程，其特征在于对萃取剂种类，结晶浓度、温度以及结晶时间进行了优化，从而生产出高纯度的3A5AF，并且操作工艺简单，生产成本低。另本发明工艺中所用溶剂均可回收再利用。
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公开(公告)号：CN112522246A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011398844.8
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供人工构建几丁质小体多酶复合体scaford‑chiC‑chiA‑sg的方法及应用。多酶复合体利用来源于自然界中的纤维小体中存在的相互作用蛋白对，人工融合表达其中的粘连蛋白(cohesins)构建蛋白支架，并在相应的几丁质内切酶、几丁质外切酶、N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶上融合表达锚定蛋白，从而使其胞外自组装得到几丁质酶多酶复合体；然后将多酶复合体应用于几丁质的降解制备N‑乙酰氨基葡萄糖。本发明多酶复合体不但实现了游离几丁质酶的胞外自组装，而且固定了酶与酶之间的距离，提升体系中酶元件的协同效应，形成底物通道，从而提高了对几丁质的降解效率，得到单一的单糖产物，降低了生产和后续分离的成本。
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公开(公告)号：CN113621603A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110948167.0
申请日：2021-08-18
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/10
Abstract: 本发明公开了一种辅因子与辅因子依赖性酶的共固定化连续催化的方法，研究是通过几丁质部分脱乙酰的通过电荷作用对辅因子进行固定，几丁质结合结构域与将辅因子依赖性酶融合表达实现部分脱乙酰几丁质对酶进行固定化，形成共固定化催化剂。在不额外添加辅因子的情况下，能够实现良好的重复利用效果，在连续利用五次，最优条件下转化率能保持60%‑90%，这种辅因子固定化循环利用方法能够大大降低体外酶催化过程的成本，具有非常好的经济利用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112795556A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110028065.7
申请日：2021-01-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159及其克隆表达与应用。通过基因工程手段将β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159的基因构建在质粒pET‑28a(+)上，并转入E.coli BL21(DE3)中表达，该重组酶分子量大小为92kDa，通过对比分析，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159属于糖苷水解酶GH20家族。对该重组酶进行酶学性质研究表明，纯酶的比活力为16.67 U/mg，其最适温度为40℃，最适pH为9.0，在pH高于7的条件下能保持高于80%的酶活，与其他几丁质酶协同作用时，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159表现出较高的pH稳定性和协同效应,为高效制备N‑乙酰氨基葡萄糖提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN112553183A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011509092.8
申请日：2020-12-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖苷水解酶CmChi3及其在降解胶体几丁质上的应用。将从土壤中筛选到的菌株Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC‑H1进行基因组测序分析、克隆CmChi3、构建重组菌株、表达CmChi3蛋白、纯化HIS‑TAG、并鉴定重组蛋白具有两个催化结构域，两个几丁质结合域，具有内切酶和糖苷水解酶两种酶的性质，能高效水解几丁质并以GlcNAc为终产物。此研究预期为单酶法高效生产GlcNAc提供理论依据和基础。
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公开(公告)号：CN101456843A
公开(公告)日：2009-06-17
申请号：CN200910028603.1
申请日：2009-01-04
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07D231/14
Abstract: 本发明涉及医药中间体的制备方法领域，特别涉及一种5－(4－氯苯基)－1－(2，4－二氯苯基)－4－甲基吡唑－3－羧酸的制备方法。本发明以对氯苯丙酮和三甲基氯硅烷作用后，与草酰氯反应得到5－(4－氯苯基)－4－甲基－2，3－呋喃二酮(III)，5－(4－氯苯基)－4－甲基－2，3－呋喃二酮(III)与2，4－二氯苯肼缩合得粗品，通过重结晶得到的5－(4－氯苯基)－1－(2，4－二氯苯基)－4－甲基吡唑－3－羧酸含量达99.5以上，总收率可达60.9％。本发明合成路线短，条件温和，产率较高，反应中间体质量易于控制，适合工业化，并且产品纯度高，质量稳定。
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公开(公告)号：CN113621603B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202110948167.0
申请日：2021-08-18
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/10
Abstract: 本发明公开了一种辅因子与辅因子依赖性酶的共固定化连续催化的方法，研究是通过几丁质部分脱乙酰的通过电荷作用对辅因子进行固定，几丁质结合结构域与将辅因子依赖性酶融合表达实现部分脱乙酰几丁质对酶进行固定化，形成共固定化催化剂。在不额外添加辅因子的情况下，能够实现良好的重复利用效果，在连续利用五次，最优条件下转化率能保持60%‑90%，这种辅因子固定化循环利用方法能够大大降低体外酶催化过程的成本，具有非常好的经济利用价值。
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公开(公告)号：CN112876438B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202110073615.7
申请日：2021-01-20
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07D307/66
Abstract: 本发明公开了一种高纯度3‑乙酰氨基‑5‑乙酰基呋喃的分离纯化方法。3‑乙酰氨基‑5‑乙酰基呋喃（3A5AF）是一种重要的平台化合物，可用来制备众多高附加值化学品，有着广泛的应用前景。本发明分离纯化方法，包括萃取，脱色，结晶等工艺过程，其特征在于对萃取剂种类，结晶浓度、温度以及结晶时间进行了优化，从而生产出高纯度的3A5AF，并且操作工艺简单，生产成本低。另本发明工艺中所用溶剂均可回收再利用。
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