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公开(公告)号：CN118272413A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410512795.8
申请日：2024-04-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种ATP动态调控系统调控两阶段发酵的重组质粒、菌株及其应用，属于菌株代谢改造领域。从头合成磷酸烯醇式丙酮酸激酶并在大肠杆菌中表达，PCR拷贝枯草芽孢杆菌来源的ATP响应的核糖开关ydaO，PCR拷贝来源大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，构建了pCWJ‑ppc‑ydaO‑pck重组质粒。将该质粒在赖氨酸高产的大肠杆菌中进行表达，得到的重组菌株生长良好、基因表达稳定、葡萄糖被高效利用、发酵周期短。从发酵结果可以看出，重组的大肠杆菌KA30‑ppc‑ydaO‑pck的联产发酵丁二酸产量有显著提高。
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公开(公告)号：CN114806996B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202210648397.X
申请日：2022-06-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株高产戊二胺基因工程菌及构建方法与应用，所述高产戊二胺基因工程菌为在出发菌中过表达大肠杆菌生物膜调控基因pgaABCD，得到高产戊二胺基因工程菌。该菌株使大肠杆菌固定化发酵产戊二胺过程中生物膜量增加，能够发挥出固定化发酵的优势，在12批连续发酵后，菌株发酵性能保持稳定，最终戊二胺的产量与原始菌株KACCPG相比提高16.45％，发酵周期也从84h减少到72h，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114774472A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210654192.2
申请日：2022-06-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐受戊二胺的重组大肠杆菌构建及应用。通过大肠杆菌ASKA文库筛选出大量潜在戊二胺耐受靶点，结合生物信息学技术，最终挖掘到编码内膜蛋白的耐受基因ydgK。通过在高产赖氨酸的大肠杆菌KA30中过表达，菌株在含30 g/L戊二胺的培养基中生长延滞期缩短39.3%，证实靶点具有提升底盘细胞戊二胺耐受能力的功能，进一步将其整合至KA30基因组中转座子IS1上，实现基因组多拷贝稳定表达。将重组大肠杆菌应用到戊二胺生产中，最终实现发酵生产戊二胺产量提升20.6%。本发明具有过程简洁、效果显著等特点，是一条简单、快速、高效的提升工业底盘细胞鲁棒性的方法。
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公开(公告)号：CN112209809B
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202011125260.3
申请日：2020-10-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种利用阴离子交换树脂对丁三醇发酵液进行脱色的方法，将1,2,4‑丁三醇发酵液除杂后，上样到阴离子交换树脂中，收集流出液，即得脱色后的1,2,4‑丁三醇发酵液。本发明能够有效地脱除了发酵液的颜色，提高了1,2,4‑丁三醇最终产品的品质，脱色率达到90％，1,2,4‑丁三醇回收率达到85％。
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公开(公告)号：CN112899297A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110254866.5
申请日：2021-03-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶催化产辛弗林的方法，该方法具体包括以下步骤：生成表达苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶的基因工程菌BL21（DE3）/pET28a‑PNMT；培养基因工程菌BL21（DE3）/pET28a‑PNMT和诱导表达PNMT；收集上述菌体，用缓冲液重悬菌体后，匀浆破碎，离心消除杂质，得PNMT的粗酶液；以章鱼胺和S‑腺苷‑蛋氨酸为底物，加入PNMT粗酶液反应得产物辛弗林。本发明方法是首次系统的做出从章鱼胺到辛弗林的酶催化生产工艺，催化效率高达0.5g/l，转化率高达95％以上，环境友好，原料易得，生产成本低，工艺简单，反应条件温和，具有很好的工业化生产前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108531494B
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN201810195975.2
申请日：2018-03-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用基因工程菌共发酵制备生物基尼龙‑54前体——戊二胺丁二酸盐的方法，它通过在丁二酸生产菌株内过表达赖氨酸脱羧酶，在丁二酸发酵过程中添加赖氨酸进行脱羧反应，两个脱羧产物，戊二胺及CO2分别用于体系pH的调控剂及丁二酸的合成，实现了共发酵生产丁二酸与戊二胺及CO2的固定，且发酵液中的戊二胺丁二酸盐可作为前体进一步用于聚合制备生物基尼龙‑54。与现有的尼龙‑54制备方法相比，本发明工艺简单，成本低，过程安全可控，绿色环保，具有重要的应用价值和良好的经济性。
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公开(公告)号：CN111607624A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010581923.6
申请日：2020-06-23
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于苯乙醇胺-N-甲基转移酶催化产肾上腺素的方法，该方法具体包括以下步骤：生成表达苯乙醇胺-N-甲基转移酶（PNMT）的基因工程菌BL21（DE3）/pET28a-PNMT；培养基因工程菌BL21（DE3）/pET28a-PNMT和诱导表达PNMT；收集上述菌体，用缓冲液重悬菌体后，匀浆破碎，离心消除杂质，得PNMT的粗酶液；以去甲肾上腺素和S-腺苷-蛋氨酸（SAM）为底物，加入PNMT粗酶液反应得产物肾上腺素。本发明方法是首次系统的做出从去甲肾上腺素到肾上腺素的酶催化生产工艺，催化效率高达2g/l，转化率高达95％以上，环境友好，原料易得，生产成本低，工艺简单，反应条件温和，具有很好的工业化生产前景。
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公开(公告)号：CN111139231A
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN202010050293.X
申请日：2020-01-17
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/14 , C12N11/096 , C12N11/093 , C12N11/089 , C12N11/082 , C12N11/06 , C12P13/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种分区定向固定化双细胞制备1,5-戊二胺的方法。该方法基于固定化微生物的角度，以固定化微生物进而生成生物膜提高发酵过程中的可控性和耐受性。其次本研究基于分区的定向特异性固定化技术，提高混菌发酵之间的耦合作用，进而提升1,5-戊二胺的产量。该方法对于投放的菌体数量可以精确控制，并且显著提升了发酵过程中的菌体耐受性，大大提高了产率，降低了资源浪费。
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公开(公告)号：CN108795916B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201810787121.3
申请日：2018-07-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种赖氨酸脱羧酶突变体，它是由氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶通过定点突变得到，为如下(1)和(2)中的任意一种：(1)将氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶的第12位的缬氨酸突变为半胱氨酸，第41位的天冬氨酸突变为半胱氨酸，得到赖氨酸脱羧酶突变体V12C/D41C；(2)将氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶的第89位的亮氨酸突变为半胱氨酸，第442位的亮氨酸突变为半胱氨酸，得到赖氨酸脱羧酶突变体L89C/L442C。本发明提供的赖氨酸脱羧酶突变体其在耐碱及催化性能方面有大幅度提高，更加适合工业化生产需求，满足社会生产的要求。
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公开(公告)号：CN109810024A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910244372.1
申请日：2019-03-28
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07C265/14 , C07C263/10
Abstract: 本发明具体公开了一种用于制备戊二异氰酸酯的喷射回路反应器及其使用方法。该喷射回路反应器包括喷射混合器、液相进料管、气相进料管、循环泵、气液分离器、列管式换热器、接收器、取样管。本发明设计的喷射回路反应器，特别是喷射混合器的设计，喷射混合器使得气液固三相高效强混，喷射混合器内的气泡粒径平均小于0.4mm，气液混合冲击管道内的气泡粒径平均小于0.1mm，气液在整个回路中混合传质，喷射回路反应器中的流体负载反应液体含气量体积比达不低于30%，显著提高了反应效率，提高了生产能力，降低生产成本，原料采用1,5-戊二胺碳酸盐代替1,5-戊二胺，有效解决1,5-戊二胺与氯化氢不规则成盐易结块堵塞的问题。
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