一种葡萄糖酯酶法合成及机制分析的方法

    公开(公告)号:CN118703579A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202410726130.7

    申请日:2024-06-06

    Abstract: 本发明提供了一种在低共熔溶剂中酶法催化合成葡萄糖月桂酸酯的方法,并通过分子动力学模拟对催化机制进行了解析。以DL‑薄荷醇为氢键受体,月桂酸为氢键供体,两者以2:1的摩尔比进行加热搅拌,以此生成实验所需的低共熔溶剂。该方法所制的低共熔溶剂不仅具有保持酶活性能的优点,而且溶剂性能较好,可用于葡萄糖酯的酶法合成。步骤包括:葡萄糖和月桂酸乙烯酯加入到15mL反应管中,然后加入诺维信435,以及DL‑薄荷醇:月桂酸(2:1)溶剂,于60℃,300r/min条件下进行搅拌反应。反应48小时后以液相监测反应收率,葡萄糖月桂酸酯的收率为92.85%。本发明为葡萄糖酯的酶法合成提供了新思路。

    一种低共熔溶剂协同脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法

    公开(公告)号:CN116694696A

    公开(公告)日:2023-09-05

    申请号:CN202310773973.8

    申请日:2023-06-28

    Abstract: 本发明提供了一种低共熔溶剂中脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法,属于生物催化技术领域。以脂肪酸正癸酸作为氢键受体,利多卡因作为氢键供体,以加热搅拌法合成了低共熔溶剂。此方法制备的低共熔溶剂具有保持酶学性能、对底物溶解度好等优点,可用于催化维生素E与琥珀酸酐发生酯化反应制备维生素E琥珀酸酯。该方法可以在较低温度50℃下进行,反应迅速只需6h,脂肪酶的用量少(只需4%底物质量比),条件温和,维生素E琥珀酸酯收率高达95.67%。本发明提供了一种绿色高效的合成维生素E琥珀酸酯的新方法。

    一种低共熔溶剂协同脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法

    公开(公告)号:CN116694696B

    公开(公告)日:2025-02-25

    申请号:CN202310773973.8

    申请日:2023-06-28

    Abstract: 本发明提供了一种低共熔溶剂中脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法,属于生物催化技术领域。以脂肪酸正癸酸作为氢键受体,利多卡因作为氢键供体,以加热搅拌法合成了低共熔溶剂。此方法制备的低共熔溶剂具有保持酶学性能、对底物溶解度好等优点,可用于催化维生素E与琥珀酸酐发生酯化反应制备维生素E琥珀酸酯。该方法可以在较低温度50℃下进行,反应迅速只需6h,脂肪酶的用量少(只需4%底物质量比),条件温和,维生素E琥珀酸酯收率高达95.67%。本发明提供了一种绿色高效的合成维生素E琥珀酸酯的新方法。

    一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法

    公开(公告)号:CN119028421A

    公开(公告)日:2024-11-26

    申请号:CN202410720584.3

    申请日:2024-06-05

    Abstract: 本发明提供了一种提高脂肪酶热稳定性的理性设计方法,属于酶工程领域。通过分子动力学模拟初步确定待改造脂肪酶的柔性区域,经过结构分析来确定改造区域,再经多种计算工具综合衡量来确定改造位点,采用NNK简并密码子进行定点饱和突变来建立突变体文库,再采用基于分光光度法的微孔板筛选方法筛选出热稳定性提高的优异突变体。本发明的南极假丝酵母脂肪酶B突变体在50℃下的半衰期较野生型提高了9倍,同时比酶活也较野生型提升了6.32%。本发明突破了“稳定性活性的权衡”,实现了脂肪酶热稳定性的改善,这有利于脂肪酶突变体在食品、药品或生物柴油等领域的工业应用中发挥重要作用。

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