可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111850040A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010756545.0

    申请日:2020-07-31

    Abstract: 本发明公开了可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法和应用,其中制备方法包括:将重组质粒pTol2-lck-NTR-mVenus与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼胚胎中;以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系,所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼,其中,所述重组质粒pTol2-lck-NTR-mVenus中携带斑马鱼lck基因启动子序列和大肠杆菌NTR基因序列。利用该方法能够有效制备获得在T细胞特异性表达NTR基因且能够稳定遗传的转基因斑马鱼,并且在甲硝唑的作用下,该转基因斑马鱼的少T细胞可以被特异性清除,使其出现免疫功能缺陷,进而,该转基因斑马鱼能够为活体研究免疫细胞发育、器官移植及肿瘤异种移植,以及相关药物筛选提供动物模型。

    一种模式动物斑马鱼鱼苗评价药物急性毒性的方法

    公开(公告)号:CN103301479A

    公开(公告)日:2013-09-18

    申请号:CN201310165111.3

    申请日:2013-05-07

    Abstract: 本发明的目的是提供易操作、快速、准确度高的一种用模式动物斑马鱼鱼苗评价药物毒性的方法。其特点在于:将药物以二甲亚砜或乙醇配成不同浓度的供试液,实验挑选受精后72小时发育正常的斑马鱼鱼苗,随机分配于多孔板,加入不同浓度的受试药物,并于受精后96小时在显微镜下观察。当鱼苗心脏停止跳动后,则判断死亡,计算各组斑马鱼鱼苗生存率并做统计。以GraphPad Prism软件拟合曲线计算半数致死量(LD50)值,以LD50值反应药物的急性毒性。该方法的有点在于:方法操作简单、快速、准确度高,能初步判断受试药物的急性毒性。

    一种模式动物斑马鱼鱼苗评价药物急性毒性的方法

    公开(公告)号:CN103301479B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310165111.3

    申请日:2013-05-07

    Abstract: 本发明的目的是提供易操作、快速、准确度高的一种用模式动物斑马鱼鱼苗评价药物毒性的方法。其特点在于:将药物以二甲亚砜或乙醇配成不同浓度的供试液,实验挑选受精后72小时发育正常的斑马鱼鱼苗,随机分配于多孔板,加入不同浓度的受试药物,并于受精后96小时在显微镜下观察。当鱼苗心脏停止跳动后,则判断死亡,计算各组斑马鱼鱼苗生存率并做统计。以GraphPad Prism软件拟合曲线计算半数致死量(LD50)值,以LD50值反应药物的急性毒性。该方法的有点在于:方法操作简单、快速、准确度高,能初步判断受试药物的急性毒性。

    可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111850040B

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202010756545.0

    申请日:2020-07-31

    Abstract: 本发明公开了可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法和应用,其中制备方法包括:将重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼胚胎中;以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系,所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼,其中,所述重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus中携带斑马鱼lck基因启动子序列和大肠杆菌NTR基因序列。利用该方法能够有效制备获得在T细胞特异性表达NTR基因且能够稳定遗传的转基因斑马鱼,并且在甲硝唑的作用下,该转基因斑马鱼的少T细胞可以被特异性清除,使其出现免疫功能缺陷,进而,该转基因斑马鱼能够为活体研究免疫细胞发育、器官移植及肿瘤异种移植,以及相关药物筛选提供动物模型。

    一种光化学诱导斑马鱼缺血性脑卒中模型的应用

    公开(公告)号:CN108739556A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201811018875.9

    申请日:2018-08-31

    CPC classification number: A01K61/10

    Abstract: 本发明公开了一种光化学诱导斑马鱼缺血性脑卒中模型的应用,以端脑组织作为斑马鱼缺血性脑卒中模型的鉴定指标。本发明利用已发明的光化学诱导血栓形成的原理,通过斑马鱼腹腔注射玫瑰红溶液,短时间内照射造成斑马鱼脑皮层区域的完全性局部性梗塞,建立了光照射下引发玫瑰红释放单线态氧损伤血管内皮细胞造成凝血的体内动物模型,有效的模拟了缺血性脑卒中的病理过程。根据观察指标的实验结果显示,斑马鱼的端脑区域组织具有显著的松散及梗死现象,同时斑马鱼出现转圈、直立等神经功能障碍的游泳行为。该构建方法简便得当、模型成功率高、便于推广,端脑组织受损伤灵敏度高、重复性好,可作为筛选脑梗塞后血管保护及溶栓治疗的实用性工具指标。

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