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公开(公告)号：CN112609008A
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN202110042966.1
申请日：2021-01-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于环介导恒温扩增技术LAMP建立一种对绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的快速检测方法，属于害虫抗药性分子检测和害虫综合防治范畴。本技术旨在解决绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的快速分子检测，并由此判断绿盲蝽是否对毒死蜱产生抗药性。技术要点包括：提取单头绿盲蝽成虫基因组DNA；设计2对特异性引物；建立LAMP反应体系；明确LAMP反应程序；确定反应结果的颜色判定标准。本方法稳定性好、灵敏度高、用时短、操作简便，可为田间绿盲蝽的抗药性监测和抗药性早期预警提供技术支持，为绿盲蝽的科学防治、合理选药提供准确的判定标准，同时也为植保基层工作者提供简便易行的分子检测手段。
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公开(公告)号：CN105713959A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201410720089.9
申请日：2014-12-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了小菜蛾对阿维菌素靶标抗性的分子检测方法。采用根据小菜蛾谷氨酸氯离子通道基因序列设计的特异性引物，以提取的小菜蛾单头基因组DNA为模板，进行谷氨酸氯离子通道基因片段的PCR扩增，分析目标片段纯化产物直接测序色谱图即可区分小菜蛾个体的基因型(敏感纯合子SS、抗性杂合子RS和抗性纯合子RR)，检测种群样本的抗性等位基因突变频率。本发明涵盖小菜蛾谷氨酸氯离子通道基因A309V突变的检测方法及专用引物序列，该方法具有快速简便、准确性高的优点，可用于监测小菜蛾田间种群对阿维菌素的抗性等位基因频率和抗药性发生发展动态，为调整小菜蛾化学防治策略、制订延缓抗性发展措施提供重要依据。
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公开(公告)号：CN105713959B
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201410720089.9
申请日：2014-12-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了小菜蛾对阿维菌素靶标抗性的分子检测方法。采用根据小菜蛾谷氨酸氯离子通道基因序列设计的特异性引物，以提取的小菜蛾单头基因组DNA为模板，进行谷氨酸氯离子通道基因片段的PCR扩增，分析目标片段纯化产物直接测序色谱图即可区分小菜蛾个体的基因型(敏感纯合子SS、抗性杂合子RS和抗性纯合子RR)，检测种群样本的抗性等位基因突变频率。本发明涵盖小菜蛾谷氨酸氯离子通道基因A309V突变的检测方法及专用引物序列，该方法具有快速简便、准确性高的优点，可用于监测小菜蛾田间种群对阿维菌素的抗性等位基因频率和抗药性发生发展动态，为调整小菜蛾化学防治策略、制订延缓抗性发展措施提供重要依据。
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公开(公告)号：CN105624278B
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201410720320.4
申请日：2014-12-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了小菜蛾对钠离子通道阻断剂靶标抗性的分子检测方法。该方法利用SEQ ID NO.1所示的特异性正向引物F和SEQ ID NO.2所示的特异性反向引物R对小菜蛾基因组DNA模板进行PCR扩增，对PCR纯化产物直接测序，根据测序色谱图鉴定小菜蛾个体钠离子通道在编码1845和1848位氨基酸的核苷酸是否突变及其具体类型，一次性区分出所述钠离子通道阻断剂抗性靶标的敏感纯合子、抗性杂合子和抗性纯合子。该方法具有快速简便、准确性高的优点，专用于小菜蛾对钠离子通道阻断剂(茚虫威和氰氟虫腙)抗性的监测和预警。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105624278A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201410720320.4
申请日：2014-12-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了小菜蛾对钠离子通道阻断剂靶标抗性的分子检测方法。该方法利用SEQ ID NO.1所示的特异性正向引物F和SEQ ID NO.2所示的特异性反向引物R对小菜蛾基因组DNA模板进行PCR扩增，对PCR纯化产物直接测序，根据测序色谱图鉴定小菜蛾个体钠离子通道在编码1845和1848位氨基酸的核苷酸是否突变及其具体类型，一次性区分出所述钠离子通道阻断剂抗性靶标的敏感纯合子、抗性杂合子和抗性纯合子。该方法具有快速简便、准确性高的优点，专用于小菜蛾对钠离子通道阻断剂(茚虫威和氰氟虫腙)抗性的监测和预警。
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公开(公告)号：CN119410707A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411250514.2
申请日：2024-09-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/34 , C12N15/57 , C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及用于构建棉铃虫雄性不育系的方法及涉及的转化事件。一种构建棉铃虫雄性不育系的方法。将含有Chr16‑Vasa‑Cas9转化事件的棉铃虫与含有Chr5‑U6‑S2sgRNA转化事件的棉铃虫杂交，获得共表达Cas9和sgRNA的杂交F1代棉铃虫后，棉铃虫表现出雄性不育表型，同时没有其他适合度代价，即其交配成功率、交配时间和产卵量均没有发生显著变化。本发明一方面为构建棉铃虫雄性不育系提供了两种优选的转化事件，为开发无抗性风险且绿色环保的棉铃虫高效防治策略奠定了坚实的基础；同时提供了对这两种转化事件进行分子鉴定的方法，为对其进行身份识别以及对转基因棉铃虫进行追溯和监管提供了重要的科学依据。
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公开(公告)号：CN113293215A
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN202010112224.7
申请日：2020-02-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12N15/12
Abstract: 本发明公开了草地贪夜蛾对苏云金芽孢杆菌Bt Cry1F毒素抗性基因的分子检测方法。该方法利用SEQ ID NO.1所示的特异性正向引物F和SEQ ID NO.2所示的特异性反向引物R对草地贪夜蛾基因组DNA模板进行PCR扩增，对PCR纯化产物直接测序，根据测序色谱图鉴定草地贪夜蛾个体腺苷三磷酸(ATP)结合盒转运蛋白C2基因第15号外显子是否发生了12‑bp的碱基插入，且一次性区分出所述抗性基因的敏感纯合子、抗性杂合子和抗性纯合子。该方法具有快速简便、准确性高的优点，专用于草地贪夜蛾对Bt Cry1F毒素抗性的分子检测和早期预警。
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公开(公告)号：CN106939332A
公开(公告)日：2017-07-11
申请号：CN201610005744.1
申请日：2016-01-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体基因突变的方法及其专用引物。通过检测烟碱型乙酰胆碱受体α6亚基基因第十二号外显子区域是否发生9个碱基的缺失突变从而判定待测小菜蛾对多杀霉素的抗性，发生了所述的9个碱基的缺失突变的小菜蛾具有对多杀霉素抗性，未发生所述的9个碱基的缺失突变的小菜蛾不具备对多杀霉素抗性。该方法具有快速简便、准确性高的优点，可用于监测小菜蛾田间种群对多杀霉素的抗性等位基因频率和抗药性发生发展动态，为制订小菜蛾化学治理方案提供重要依据，为延缓多杀霉素类杀虫剂抗性发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106939332B
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN201610005744.1
申请日：2016-01-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体基因突变的方法及其专用引物。通过检测烟碱型乙酰胆碱受体α6亚基基因第十二号外显子区域是否发生9个碱基的缺失突变从而判定待测小菜蛾对多杀霉素的抗性，发生了所述的9个碱基的缺失突变的小菜蛾具有对多杀霉素抗性，未发生所述的9个碱基的缺失突变的小菜蛾不具备对多杀霉素抗性。该方法具有快速简便、准确性高的优点，可用于监测小菜蛾田间种群对多杀霉素的抗性等位基因频率和抗药性发生发展动态，为制订小菜蛾化学治理方案提供重要依据，为延缓多杀霉素类杀虫剂抗性发展具有重要意义。
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