公开(公告)号：CN119979718A

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202510211843.4

申请日：2025-02-25

Applicant: 全国畜牧总站 ,  华南农业大学

Inventor： 邱小田 ,  杨劲松 ,  李广栋 ,  张哲 ,  袁晓龙 ,  高亚辉 ,  刘楚桥

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了IRS1基因启动子区SNP位点作为猪性成熟分子遗传标记的应用。本发明以IRS1基因启动子区域为研究对象，采用分子和细胞生物学方法研究其与母猪性成熟的相关性：发现g.128307611C>A与g.128307308C>T与杜黑猪群体性成熟日龄显著相关；然后通过转染不同载体，研究上述位点不同基因型对IRS1基因启动子活性的影响不同。进一步以母猪卵巢颗粒细胞为实验材料，采用转录组测序、总铁比色法、丙二醛比色法等实验技术，研究IRS1基因对母猪卵巢颗粒细胞转录水平、铁死亡的影响，发现IRS1基因影响细胞转录组差异基因主要富集到铁离子稳态等信号通路，抑制细胞发生铁死亡。

公开(公告)号：CN119753156A

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202411502458.7

申请日：2024-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  张哲 ,  袁晓龙 ,  李硕 ,  何颖婷 ,  周菁钰 ,  杨甜甜 ,  缪汾

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种影响猪性成熟的分子遗传标记及其应用。本发明以RBP1为研究对象，采用了分子和细胞生物学方法研究其与初情期的相关性：RBP1启动子区6个SNP位点与初情期相关。进一步研究表明g.80408109T>C位点CC基因型的启动子活性显著高于TT基因型，g.80409632A>G位点AA基因型的启动子活性显著高于GG基因型，并证实RBP1可以抑制颗粒细胞的铁死亡。可见，RBP1启动子区的突变会影响RBP1的表达，RBP1通过抑制猪卵巢颗粒细胞发生铁死亡加速初情启动。本发明对研究卵巢卵泡发育和初情启动等具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN114934051B

公开(公告)日：2023-11-28

申请号：CN202210582494.3

申请日：2022-05-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  云冰 ,  李加琪 ,  吕媛媛 ,  周尹祺 ,  曾李清 ,  张豪 ,  袁晓龙 ,  陈赞谋

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  A61K31/7088 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开了LncRNA TAB2‑AS及其在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以lncRNA TAB2‑AS为研究对象，通过DNA甲基转移酶抑制剂5‑Aza‑CdR处理细胞，检测DNA甲基化对其转录的影响；通过核质分离实验和构建lncRNA的EGFP融合蛋白载体检测其亚细胞定位及其编码能力；通过构建lncRNA的过表达载体和合成其反义寡核苷酸，检测其对猪卵巢颗粒细胞功能的影响。本发明验证了DNA甲基化能抑制lncRNA TAB2‑AS的转录；阐明了其对猪卵巢颗粒细胞的影响：其能促进猪(56)对比文件王静；包日强；董麒铭；张春平.非编码RNA在卵泡发育和卵巢疾病中的研究进展.生殖与避孕.2016,(02),第135-141页.

公开(公告)号：CN114836424B

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202210605258.9

申请日：2022-05-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周小枫 ,  袁晓龙 ,  张哲 ,  李加琪 ,  何颖婷 ,  潘向春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  A61K31/713 ,  A61K45/00 ,  A61P15/00 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开一种lncRNA IFFD及其在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以lncRNA IFFD为研究对象，通过构建lncRNA IFFD超表达载体和合成siRNA，分别将lncRNA IFFD超表达载体或siRNA转染到卵巢颗粒细胞，然后检测与卵巢颗粒细胞凋亡、增殖以及E2分泌相关的信号通路基因mRNA以及蛋白水平的变化，最后再检测卵巢颗粒细胞的表型变化。结果表明，lncRNA IFFD可促进卵巢颗粒细胞的凋亡和抑制增殖以及E2分泌。本发明通过探究lncRNA IFFD对卵巢颗粒细胞的影响，为研究卵巢卵泡闭锁以及初情启动障碍等机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN114874993B

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202210599960.9

申请日：2022-05-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李泳光 ,  李加琪 ,  吕媛媛 ,  方明 ,  张哲 ,  张豪

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/57 ,  C12N15/12 ,  C12N15/66 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种调控猪卵巢颗粒细胞MMP2基因表达的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以MMP2基因以及转录因子ESR1为研究对象，通过利用分子生物学、细胞生物学等技术，构建转录因子ESR1的超表达载体并设计其干扰片段，研究转录因子ESR1对MMP2基因表达的影响。本发明技术方案设计周详，结果可靠。转录因子ESR1可以结合于MMP2基因启动子(‑1317～‑1274bp)区域，并抑制MMP2基因的表达。通过探究转录因子ESR1对MMP2基因转录表达机制的应用，对研究MMP2基因影响卵巢卵泡闭锁以及母猪初情启动等的分子机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN110106182B

公开(公告)日：2023-01-10

申请号：CN201910393139.X

申请日：2019-05-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  李忠慧 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  孔亚茹 ,  李丽莹

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了p65基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明检测了猪未成熟和成熟卵巢组织中，以及不同大小卵泡颗粒细胞中p65 mRNA的相对表达量，并在超表达和干扰p65后检测了颗粒细胞增殖、凋亡及雌激素分泌情况，为母猪卵巢卵泡发育过程中的分子机制积累材料。同时，本发明的结果显示p65基因参与促进颗粒细胞增殖和分泌雌激素，并激活雌激素信号通路，调节相关基因ESR1、ESR2、HSD3B1、HSD17B4和CYP19A的表达。

公开(公告)号：CN113388614B

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN202110476520.X

申请日：2021-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  周小枫 ,  李加琪 ,  潘向春 ,  何颖婷 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开一种RSPO2基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以RSPO2为研究对象，通过构建RSPO2超表达载体和合成小干扰RNA(RSPO2‑siRNA)，分别将RSPO2超表达载体或RSPO2‑siRNA转染到卵巢颗粒细胞，然后检测与卵巢颗粒细胞凋亡、增殖以及E2分泌相关的信号通路基因mRNA以及蛋白水平的变化，最后再检测卵巢颗粒细胞的表型变化。结果表明，RSPO2可抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究RSPO2在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁机制以及初情启动等具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN114958849A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210582507.7

申请日：2022-05-26

Applicant: 华南农业大学 ,  广东省实验动物监测所

Inventor： 张豪 ,  白国锋 ,  王希龙 ,  廖伟莉 ,  潘金春 ,  袁晓龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  G01N15/14 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明公开了lncRNACACF吸附miR‑520b‑3p在调控人脐静脉内皮细胞周期中的应用。本发明采用细胞生物学的方法第一次证实了长链非编码RNA CACF在人脐静脉内皮细胞中竞争性吸附miR‑520b‑3p，并通过Annexin V‑FITC/PI技术以及miR‑520b‑3p和lncRNA CACF超表达载体共转染回复实验，证实了lncRNA CACF吸附miR‑520b‑3p促进人脐静脉内皮细胞周期进程中的应用。

公开(公告)号：CN114875029A

公开(公告)日：2022-08-09

申请号：CN202210605334.6

申请日：2022-05-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  周小枫 ,  张哲 ,  李加琪 ,  何颖婷 ,  潘向春 ,  全洪燕

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开一种调控猪卵巢颗粒细胞中lncRNA IFFD转录表达的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以lncRNA IFFD启动子区DNA甲基化以及lncRNA IFFD为研究对象，通过分析lncRNA IFFD在卵泡发育过程中的表达与甲基化水平的关联，然后利用DNMT1‑siRNA验证lncRNA IFFD启动子低甲基化促进其表达，最后找到lncRNA IFFD启动子CGI区的低甲基化招募转录因子SP1的结合，进而促进lncRNA IFFD的转录表达。本发明对研究lncRNA IFFD启动子区DNA甲基化参与卵巢卵泡闭锁以及初情启动等的分子机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN114854756A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210605257.4

申请日：2022-05-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周小枫 ,  张哲 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  何颖婷 ,  潘向春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85 ,  C12N15/87 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种miR‑370调控GLI1表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以miR‑370为研究对象，采用了分子和细胞生物学方法研究其在猪卵巢颗粒细胞中的应用，结果表明，miR‑370可下调GLI1表达，抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究miR‑370在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁以及卵泡发育等机制具有很好的应用价值。本发明技术方案设计周详，结果可靠。为证实miR‑370对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡以及E2分泌的影响，本发明从多层次、多角度验证，在相关信号通路基因及mRNA水平验证，最后在卵巢颗粒细胞的表型上验证。