一种pCasRA质粒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116254284B

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202310081742.0

    申请日:2023-01-17

    Abstract: 本发明公开了一种pCasRA质粒,所述pCasRA质粒的核苷酸信息如SEQ ID NO:1所示。所述pCasRA质粒以pCas9质粒作为载体骨架,在载体骨架上接入接合转移位点oriT、pRA0726质粒的复制子和头孢西丁抗性基因,并将pCas9质粒中的crRNA部分替换成Cas9蛋白基因(SEQ ID NO:20)和整合型sgRNA(SEQ ID NO:7)的连接产物。本发明所述pCasRA质粒能够在大肠杆菌中通过接合转移到鸭疫里氏杆菌中,并且该pCasRA质粒能够在鸭疫里氏杆菌中稳定表达Cas9蛋白基因,进行基因组DNA编辑,实现基因敲除和/或单碱基突变。

    一种异丙氧苯胍-羟丙基-β-环糊精包合物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115006548B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202210590865.2

    申请日:2022-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种异丙氧苯胍‑羟丙基‑β‑环糊精包合物及其制备方法和应用。该方法将异丙氧苯胍溶解于甲醇中,得到异丙氧苯胍甲醇溶液;将羟丙基‑β‑环糊精溶解于水中,得到羟丙基‑β‑环糊精水溶液;再将异丙氧苯胍甲醇溶液与羟丙基‑β‑环糊精水溶液通过包合反应得到包合液,冻干即得到所述异丙氧苯胍‑羟丙基‑β‑环糊精包合物;其中异丙氧苯胍与羟丙基‑β‑环糊精的质量比为1︰12~24。本发明采用特定的工艺,以羟丙基‑β‑环糊精为载体对异丙氧苯胍进行包合,实现了较高的产率和包合率,显著提升了异丙氧苯胍的溶解度和溶出度,进而提升了其在动物体内的生物利用度,实现了更好的治疗效果。

    一种异丙氧苯胍-羟丙基-β-环糊精包合物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115006548A

    公开(公告)日:2022-09-06

    申请号:CN202210590865.2

    申请日:2022-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种异丙氧苯胍‑羟丙基‑β‑环糊精包合物及其制备方法和应用。该方法将异丙氧苯胍溶解于甲醇中,得到异丙氧苯胍甲醇溶液;将羟丙基‑β‑环糊精溶解于水中,得到羟丙基‑β‑环糊精水溶液;再将异丙氧苯胍甲醇溶液与羟丙基‑β‑环糊精水溶液通过包合反应得到包合液,冻干即得到所述异丙氧苯胍‑羟丙基‑β‑环糊精包合物;其中异丙氧苯胍与羟丙基‑β‑环糊精的质量比为1︰12~24。本发明采用特定的工艺,以羟丙基‑β‑环糊精为载体对异丙氧苯胍进行包合,实现了较高的产率和包合率,显著提升了异丙氧苯胍的溶解度和溶出度,进而提升了其在动物体内的生物利用度,实现了更好的治疗效果。

    一种pCasRA质粒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116254284A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202310081742.0

    申请日:2023-01-17

    Abstract: 本发明公开了一种pCasRA质粒,所述pCasRA质粒的核苷酸信息如SEQ ID NO:1所示。所述pCasRA质粒以pCas9质粒作为载体骨架,在载体骨架上接入接合转移位点oriT、pRA0726质粒的复制子和头孢西丁抗性基因,并将pCas9质粒中的crRNA部分替换成Cas9蛋白基因(SEQ ID NO:20)和整合型sgRNA(SEQ ID NO:7)的连接产物。本发明所述pCasRA质粒能够在大肠杆菌中通过接合转移到鸭疫里氏杆菌中,并且该pCasRA质粒能够在鸭疫里氏杆菌中稳定表达Cas9蛋白基因,进行基因组DNA编辑,实现基因敲除和/或单碱基突变。

    一种基于CRISPR-Cas12a可视化检测多杀性巴氏杆菌的试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN115029459A

    公开(公告)日:2022-09-09

    申请号:CN202210778136.X

    申请日:2022-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a可视化检测多杀性巴氏杆菌的试剂盒及方法,所述试剂盒通过先对待测样品进行扩增,接着在crRNA引导序列的介导下,引导CRISPR‑Cas12a体系对RPA扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的ssDNA荧光探针得到切割产物并进行显色检测判断。本发明所述的试剂盒针对多杀性巴氏杆菌核酸的检测灵敏度可达2拷贝/μL,且可选用RPA进行扩增,全程在37℃环境下进行,裸眼可直接观察,实现了脱离实验室大型仪器的依赖、实现现场快速可视化检测靶标核酸的目的。

    一种氯氰碘柳胺对映体的手性色谱分离分析方法

    公开(公告)号:CN112763586A

    公开(公告)日:2021-05-07

    申请号:CN202011345292.4

    申请日:2020-11-25

    Abstract: 本发明属于手性色谱分离技术领域,公开了一种氯氰碘柳胺对映体的手性色谱分离分析方法。该方法是以烷烃、低级醇和有机酸为流动相,在0.2~1.0mL/min的流速下对键合型异丙基环果聚糖‑6进行平衡,调整流动相烷烃和低级醇的体积比为(90~99):(1~10),有机酸为烷烃和低级醇总体积的0.05~0.5%;将氯氰碘柳胺溶液注入液相色谱系统,进样体积为0.1~10μL,紫外波长为210~254nm,色谱柱的柱温为5~40℃,进行液相色谱分离分析,可实现氯氰碘柳胺对映体的分离。本发明的手性色谱分离分析方法实现了氯氰碘柳胺两个对映体的完全分离,检测过程简单、稳定,实用性强。

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