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公开(公告)号：CN110184199A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910433431.X
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法。该方法包括Foc1分生孢子悬浮液的制备、Foc1菌丝体的收集、菌丝体细胞壁的酶解、Foc1原生质体的收集、Foc1原生质体的再生等步骤。本发明通过所述方法酶解菌丝细胞，所获原生质体的制备数最高达到6.0×108个/mL，所得原生质体大小均一，形态饱满，近似圆形。本发明采用含有200g/L葡萄糖的CM固体培养基作为再生培养基，提高了Foc1原生质体的再生率，最高为28.6％，明显高于现有的香蕉枯萎病菌原生质体的再生方法，为后续原生质体转化技术研究香蕉病菌致病分子机制提供了良好的基础。本发明方法制备过程简单、高效，便于操作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113174390A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110247234.6
申请日：2021-03-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了香蕉枯萎病菌FoNpp1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建基因敲除载体，将FoNpp1基因导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体；通过构建基因回补载体，利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体。敲除突变体在生长发育方面不存在缺陷，对高渗胁迫、氧化胁迫等不敏感。致病性测定结果表明，与香蕉枯萎病菌野生型相比，敲除突变体镰刀菌酸含量及对巴西蕉的致病力显著降低。表明FoNpp1基因是香蕉枯萎病菌的致病相关基因，FoNpp1是香蕉枯萎病菌致病性所必需的，在防控香蕉枯萎病中具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN111560384B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202010322384.4
申请日：2020-04-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoRnt在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoRnt；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoRnt原生质体，获得回补突变体ΔFoRnt‑com。试验证明，ΔFoRnt在孢子形态、菌丝形态、抗高渗透、氧化胁迫等方面与野生型相比没有显著性差异；但FoRnt的缺失导致了其致病力的显著降低；本发明证实FoRnt是香蕉枯萎病菌致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN110184199B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201910433431.X
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法。该方法包括Foc1分生孢子悬浮液的制备、Foc1菌丝体的收集、菌丝体细胞壁的酶解、Foc1原生质体的收集、Foc1原生质体的再生等步骤。本发明通过所述方法酶解菌丝细胞，所获原生质体的制备数最高达到6.0×108个/mL，所得原生质体大小均一，形态饱满，近似圆形。本发明采用含有200g/L葡萄糖的CM固体培养基作为再生培养基，提高了Foc1原生质体的再生率，最高为28.6％，明显高于现有的香蕉枯萎病菌原生质体的再生方法，为后续原生质体转化技术研究香蕉病菌致病分子机制提供了良好的基础。本发明方法制备过程简单、高效，便于操作。
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公开(公告)号：CN111560384A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN202010322384.4
申请日：2020-04-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoRnt在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoRnt；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoRnt原生质体，获得回补突变体ΔFoRnt-com。试验证明，ΔFoRnt在孢子形态、菌丝形态、抗高渗透、氧化胁迫等方面与野生型相比没有显著性差异；但FoRnt的缺失导致了其致病力的显著降低；本发明证实FoRnt是香蕉枯萎病菌致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN113174390B
公开(公告)日：2023-05-19
申请号：CN202110247234.6
申请日：2021-03-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了香蕉枯萎病菌FoNpp1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建基因敲除载体，将FoNpp1基因导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体；通过构建基因回补载体，利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体。敲除突变体在生长发育方面不存在缺陷，对高渗胁迫、氧化胁迫等不敏感。致病性测定结果表明，与香蕉枯萎病菌野生型相比，敲除突变体镰刀菌酸含量及对巴西蕉的致病力显著降低。表明FoNpp1基因是香蕉枯萎病菌的致病相关基因，FoNpp1是香蕉枯萎病菌致病性所必需的，在防控香蕉枯萎病中具有较大的应用前景。
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