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公开(公告)号:CN119614755A
公开(公告)日:2025-03-14
申请号:CN202510106687.5
申请日:2025-01-23
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6881 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及非复制性腺病毒载体技术领域,具体而言,涉及引物组合及非复制性腺病毒载体的宿主细胞E1区DNA片段残留的检测方法。该引物组合包括E1A引物对和E1B引物对,E1A引物对包括如SEQ ID NO.1所示的第一引物和如SEQ ID NO.2所示的第二引物,E1B引物对包括如SEQ ID NO.3所示的第三引物和如SEQ ID NO.4所示的第四引物。该引物组合能够对HEK293细胞宿主DNA中E1残留片段进行特异性检测;该检测方法,具有效率高、效果好、特异性高、灵敏性好以及重复性好的优点。
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公开(公告)号:CN120060369A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510223335.8
申请日:2025-02-27
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N15/861 , C12N15/12 , C12N5/10 , A61K47/46 , A61K35/761 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体而言,涉及一种表达CD40L的仿生纳米囊泡、制备方法及应用。该方法采用肿瘤细胞膜包被溶瘤腺病毒载体,得到仿生纳米囊泡;溶瘤腺病毒载体具有能够表达CD40L的核苷酸序列。该仿生纳米囊泡制备的治疗恶性肿瘤的制剂,为腹腔注射制剂或静脉注射制剂。该仿生纳米囊泡可帮助腺病毒逃逸机体的免疫识别,以网格蛋白依赖形式入胞,摆脱了腺病毒对肿瘤细胞的CAR依赖性转导,实现腺病毒在体内强靶向、低免疫的效果;可解决机体免疫微环境复杂、对腺病毒进行攻击中和等问题,肿瘤细胞膜可实现对腺病毒的良好遮蔽,避免机体的免疫识别;可实现腺病毒直接到达肿瘤部位,提高溶瘤病毒的靶向性。
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公开(公告)号:CN119985973A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510155121.1
申请日:2025-02-12
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: G01N33/569 , G01N33/53 , G01N27/447
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域,具体而言,涉及一种HPV三价治疗性疫苗的活性检测方法。采用构建的搭载HPV16/18/52型E6/E7抗原的非复制5型腺病毒接种并感染BEAS‑2B细胞,培养后提取总蛋白,再依次进行SDS‑PAGE电泳、蛋白质印迹法检测、免疫反应和显色成像的步骤,对融合蛋白进行检测;构建的腺病毒的转染复数MOI为15‑25,BEAS‑2B细胞的汇合度大于80%;蛋白质印迹法的转膜电流为220‑280mA,时间为50‑80min。该方法避免了在不同的动物种属中生物学活性具有明显差异导致检测结果不准确的问题,具有良好的准确性、稳定性和耐用性,步骤简单,成本低,可进行有效的推广和使用。
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公开(公告)号:CN119753023A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411932947.6
申请日:2024-12-26
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N15/861 , C12N15/34 , C07K14/075 , C12N15/90 , A61K35/761 , A61P35/00 , A61K39/235
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体而言,涉及一种新型Ad5/35嵌合型溶瘤腺病毒载体、制备方法及应用。重组质粒包括5型腺病毒质粒骨架和六邻体核苷酸序列,所述六邻体核苷酸序列中包括用于编码35型腺病毒六邻体蛋白高变区的核苷酸序列。该新型Ad5/35嵌合型溶瘤腺病毒载体的六邻体蛋白高变区氨基酸序列包括如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示的氨基酸序列。该腺病毒载体可应用于制备治疗癌症制剂中。该腺病毒载体能够有效抵御预存中和抗体的影响,具有良好的抗肿瘤能力。
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公开(公告)号:CN118853767A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202411158973.8
申请日:2024-08-22
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N15/861 , C12N15/64 , C12N15/27 , A61K35/761 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及一种新型溶瘤腺病毒载体及其构建方法和应用,所述新型溶瘤腺病毒载体为5型腺病毒载体删除E1A区第920nt‑946nt区域和删除E3区的gp19k区域,且在删除的所述E3区的gp19k区域插入CMV启动子GM‑CSF表达框,所述第920nt‑946nt区域的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述E3区的gp19k区域的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述CMV启动子GM‑CSF表达框的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。与内源性启动子驱动GM‑CSF表达的溶瘤腺载体相比,该新型溶瘤腺病毒载体具有更优异的抗肿瘤作用。
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公开(公告)号:CN118344491B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202410543160.4
申请日:2024-05-03
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/861 , C12N15/11 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,特别是一种HPV16/18治疗性疫苗、制备方法和应用,本发明公开了一种融合蛋白,是如下a)或b)的蛋白:a)氨基酸序列是SEQ ID No.2的融合蛋白;b)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有结合HPV16/18E6‑E7活性的融合蛋白。本发明提供的可表达融合蛋白HPV16/18E7蛋白重组腺病毒作为HPV16/18治疗性疫苗(MATV3),其在小鼠模型上具有良好的免疫原性,能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫反应。在TC‑1小鼠皮下瘤模型的抑瘤效果研究显示,两次接种MATV3后能够明显抑制TC‑1肿瘤的成长,并且在小鼠体内能产生HPV 16E7和HPV18E7特异性的细胞免疫反应。该疫苗制备方法快速简便,可实现大规模生产用于社区人群。
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公开(公告)号:CN118344491A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410543160.4
申请日:2024-05-03
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/861 , C12N15/11 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,特别是一种HPV16/18治疗性疫苗、制备方法和应用,本发明公开了一种融合蛋白,是如下a)或b)的蛋白:a)氨基酸序列是SEQ ID No.2的融合蛋白;b)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有结合HPV16/18E6‑E7活性的融合蛋白。本发明提供的可表达融合蛋白HPV16/18E7蛋白重组腺病毒作为HPV16/18治疗性疫苗(MATV3),其在小鼠模型上具有良好的免疫原性,能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫反应。在TC‑1小鼠皮下瘤模型的抑瘤效果研究显示,两次接种MATV3后能够明显抑制TC‑1肿瘤的成长,并且在小鼠体内能产生HPV 16E7和HPV18E7特异性的细胞免疫反应。该疫苗制备方法快速简便,可实现大规模生产用于社区人群。
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公开(公告)号:CN114262692A
公开(公告)日:2022-04-01
申请号:CN202111448959.8
申请日:2021-11-30
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N7/01 , C12N15/11 , C12N15/54 , C12N15/861 , A61K35/761 , A61K38/08 , A61K48/00 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种携带TMVP1和HSV‑TK的溶瘤腺病毒重组体、其构建方法及应用,属于医学基因工程技术领域。本发明是在人类5型腺病毒基因的E1A保守序列2区缺失第920nt‑946nt区域的27个碱基,再在Hexon高变区5的第19641nt‑19655nt区域插入编码肿瘤靶向肽TMVP1的基因序列,同时缺失E3区位于ADP基因第29477nt‑29714nt区域,构成缺失区,再在所述缺失区插入编码HSV‑TK基因的全长编码序列并引入Cla1酶切位点。本发明还公开了上述溶瘤腺病毒重组体的构建方法及应用。本发明的携带TMVP1和HSV‑TK的溶瘤腺病毒重组体兼具理想的靶向作用和强效杀伤作用。
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