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公开(公告)号：CN113973779B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202111371545.X
申请日：2021-11-18
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/55
Abstract: 本发明公开了一种人工诱导多倍体泥鳅的方法。通过CRISPR/Cas9技术构建cdk1基因敲除纯合子二倍体泥鳅(即cdk1‑/‑泥鳅)，然后利用cdk1‑/‑雄性泥鳅分别与天然二倍体(2N)和四倍体(4N)雌性泥鳅(即cdk1‑/‑×2N WT♀；cdk1‑/‑×4N WT♀)进行人工繁殖。通过后裔倍性鉴定表明cdk1‑/‑×2N WT♀后裔中有5.3％的三倍体鱼，cdk1‑/‑×4N WT♀后裔中有14.7％的四倍体鱼。通过对cdk1‑/‑进行精巢染色体标本制备和观察，我们发现有22.2％的精母细胞属于未减数配子(50个二价体；天然二倍体为25个二价体)。鱼类人工多倍体研制长期以来是水产界追踪研究的热点和难点，本发明为泥鳅的生产应用提供了坚实的理论和技术支持。
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公开(公告)号：CN114107336A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111399612.9
申请日：2021-11-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种台湾泥鳅elovl5基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了所述elovl5基因在提高台湾泥鳅高度不饱和脂肪酸含量的分子育种中的应用以及一种提高台湾泥鳅高度不饱和脂肪酸含量的分子育种方法，该方法利用CRISPR/Cas9系统敲除所述的elovl5基因，得到台湾泥鳅elovl5基因敲除突变体。实验结果显示，敲除型与野生型相比，体内EPA与DHA含量均有显著差异，与野生型相比敲除型EPA、DHA含量显著上升，DPA、EPA与DHA总量显著升高。
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公开(公告)号：CN114107335A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111369875.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N15/89 , C12N15/55 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多倍体泥鳅细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶1(Cyclin dependent kinase1,CDK1)基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了该基因在不育多倍体泥鳅分子育种中的应用，以及一种利用CRISPR/Cas9系统敲除CDK1基因从而导致多倍体泥鳅不育的分子育种方法。本发明能防止自然繁殖导致鱼类品种和数量的泛滥，而且性腺发育的停滞有利于提高鱼类的生长性能，促进鱼类体质量的快速生长，从而提高泥鳅养殖的经济效益。
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公开(公告)号：CN106636204B
公开(公告)日：2019-08-23
申请号：CN201710014992.7
申请日：2017-01-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种能够稳定遗传的白化大鳞副泥鳅育种方法，它是在大鳞副泥鳅TYR基因序列上设计TYR基因靶位点，然后设计上游引物及与其匹配的下游引物，以骨架质粒为模版进行PCR扩增，体外转录、纯化后得到gRNA；以线性化Cas9质粒为模版，体外转录、纯化后得到Cas9mRNA；对大鳞副泥鳅受精卵显微注射，之后将受精卵进行孵化培育，并对基因敲除鱼进行杂交，获得能够稳定遗传的白化大鳞副泥鳅。
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公开(公告)号：CN106636204A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201710014992.7
申请日：2017-01-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种能够稳定遗传的白化大鳞副泥鳅育种方法，它是在大鳞副泥鳅TYR基因序列上设计TYR基因靶位点，然后设计上游引物及与其匹配的下游引物，以骨架质粒为模版进行PCR扩增，体外转录、纯化后得到gRNA；以线性化Cas9质粒为模版，体外转录、纯化后得到Cas9mRNA；对大鳞副泥鳅受精卵显微注射，之后将受精卵进行孵化培育，并对基因敲除鱼进行杂交，获得能够稳定遗传的白化大鳞副泥鳅。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103875584B
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201410110588.6
申请日：2014-03-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K63/00 , A01K61/00 , A23K50/80 , A23K10/22 , A23K10/30 , A23K10/37 , A23K20/00 , A23K20/174 , A23K20/163 , A23K20/26 , A23K20/20
Abstract: 本发明公开了一种泥鳅大规格苗种培育池，包括方形水池和微孔曝气管，所述方形水池的上方设有进水龙头，所述方形水池的池底设有中空的第一排水筒，所述第一排水筒的下端穿过方形水池的池底与排水管连通，所述第一排水筒的筒壁上设有若干个排水孔，所述排水孔位于方形水池的池底上方，所述微孔曝气管设于方形水池的池底四周。本发明还公开了一种泥鳅大规格苗种的培育方法，采用该方法可实现高养殖密度、高成活率地培育泥鳅大规格苗种，泥鳅苗种的亩产可达130万尾，成活率达到60%以上，为国内外领先水平。
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公开(公告)号：CN103875569B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410111329.5
申请日：2014-03-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K61/00
Abstract: 本发明公开了一种通过种间杂交获得高比例雄性泥鳅的方法，它是以雌性大鳞副泥鳅与雄性四倍体泥鳅为亲本进行杂交：对雌性大鳞副泥鳅、雄性四倍体泥鳅腹腔注射催产药物，催产12-16小时后，采集雄性四倍体泥鳅的精巢和雌性大鳞副泥鳅的卵粒，将精巢与保存液研磨混匀后再与卵粒混匀，得受精卵，将受精卵进行孵化，饲养孵化后获得的杂交泥鳅苗，得到高比例的雄性泥鳅。采用本发明获得的三倍体杂交泥鳅群体，其中雄性杂交泥鳅的比例高达87.64-98.53%，雌鱼卵巢发育不良。
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公开(公告)号：CN118652938A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410894074.8
申请日：2024-07-04
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/12 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N5/10 , A01K67/0275
Abstract: 本发明公开了一种提高淡水鱼高度不饱和脂肪酸含量的分子育种方法，在本发明中，利用CRISPR/Cas9系统敲除FADS6基因，得到淡水鱼FADS6基因敲除突变体，敲除型淡水鱼体内的n‑3 HUFA含量均相比野生型显著增加，尤其是EPA（20:5n‑3）、DPA（22:5n‑3）和DHA（22:6n‑3）这三种人体必需脂肪酸的含量在三种淡水鱼中均获得明显升高。该方法适用于淡水鱼的育种，可培育出高HUFA含量且具有遗传稳定性的品系，与转基因方法不同，本方法可应用于人工养殖，无需担心转基因食品对人体的影响，易于在生产上推广。
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公开(公告)号：CN105918174B
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201610287369.4
申请日：2016-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K61/95
Abstract: 本发明公开了一种泥鳅良种选育中家系个体荧光标记方法，它是将标记液注射到泥鳅幼鱼的背鳍基部或臀鳍基部的左右两侧，注射时针头沿尾部向头部方向插入皮肤与肌肉间隙，注射标记液，同时将注射器针头缓慢向外抽出，使注射的标记液呈均匀的长条状。本发明可以向每只泥鳅幼鱼注射一种到四种的标记液，用于区分多个不同来源家系，而且标记后的泥鳅幼鱼存活率高，标记清晰、保存能力强。本发明还具有可操作性强、步骤简单等优点。
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公开(公告)号：CN104396812B
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201410581532.9
申请日：2014-10-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明公开了一种通过抑制受精卵极体释放获得异源多倍体泥鳅的方法，它以二倍体泥鳅、四倍体泥鳅和大鳞副泥鳅为繁殖亲本进行杂交获得杂交受精卵，在获得受精卵的第5分钟时，将杂交受精卵浸泡在2-3℃冰水中进行冷休克处理，处理的持续时间为30-35分钟，最后在室温条件下进行孵化，饲养，获得泥鳅异源多倍体。该方法分别获得异源三倍体泥鳅、异源四倍体泥鳅以及异源五倍体泥鳅，其诱导泥鳅异源多倍体种类多，数量大，诱导成功率高，后代生长快，12月龄比正常自交对照组体重平均增加-19.99％～142.34％，增重效果明显，具有较强的推广效益。
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