一种抗草甘膦油菜的培育方法

    公开(公告)号:CN110699374A

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201810522008.2

    申请日:2018-06-21

    摘要: 本发明属于植物基因工程领域。涉及一种抗草甘膦油菜的培育方法。构建包含目标基因I.variabilis-EPSPS*的表达载体pTGH-1,利用农杆菌介导的遗传转化将转化载体导入甘蓝型油菜受体细胞中,在含有草甘膦的愈伤组织诱导培养基上筛选得到抗性愈伤组织;将抗性愈伤组织转移至分化培养基上诱导分化,当分化的外植体上再生出完整的芽时,置于生根培养基上得到再生苗。提取T0代转基因植株叶片总DNA,通过Southern杂交鉴定基因的拷贝数,发展单拷贝植株为株系,挑选转基因纯合株系进行抗草甘膦试验,利用侧翼序列进行反向PCR和Tail-PCR,筛选出对抗草甘膦抗性好、农艺性状与原品种没有差别的甘蓝型油菜。

    一种抗草铵膦油菜的培育方法

    公开(公告)号:CN110195067A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910491859.X

    申请日:2019-06-06

    摘要: 本发明属于植物基因工程技术领域,尤其涉及一种抗草铵膦油菜的培育方法。本发明将抗草铵膦基因Syn1-Rep导入受体甘蓝型油菜基因组中,外源基因能在后代中稳定遗传并保持相应的抗草铵膦除草剂特性,可节省劳动力资源,提高油菜种植效益,同时对环境友好。其技术要点包括:获取外源基因Syn1–Rep片段;构建表达载体,并与外源基因连接,得到重组载体;将重组载体导入大肠杆菌DH5α中验证;提取验证成功的质粒,导入农杆菌菌株中,得到转化工程菌;利用农杆菌介导的遗传转化方法将转化工程菌导入到植物组织中;转基因植株检测。

    一种具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因及其应用

    公开(公告)号:CN107022555A

    公开(公告)日:2017-08-08

    申请号:CN201610205670.6

    申请日:2016-04-02

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因及其应用。本发明公开了具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因exiGS的序列和编码区,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码446个氨基酸。该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。生物学功能验证证明该基因具有高活性,耐低温,高温稳定性好,本发明初步验证了具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因的功能及其在抗草铵膦作物中的应用潜能。可广泛用于不同抗除草剂转基因植物的操作上。

    一种猪粪的定量装料方法及装料机

    公开(公告)号:CN103466342B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201310421667.4

    申请日:2013-09-16

    摘要: 本发明提出了一种猪粪的定量装料方法及装料机,装料机包括上料装置,定量装料装置,下料装置和输送装置,各个部分安装有由链条和链轮组成的链传动、V带传动、圆柱齿轮传动、圆锥齿轮传动,链轮包括主动链轮、从动链轮和张紧链轮。上料装置主要是螺杆泵构成。定量装料装置包括送料箱,旋转拨片,定量盒。下料装置包括旋转板,内导轨,外导轨,活门。输送装置由链传动组成,链条附件固定在链条上。定量装料装置和下料装置的机架固定在输送装置的机架上。输送装置的机架放在平整的地面上。该方法能根据粪筐中养殖蝇蛆的数量及猪粪的养料含量来定量装入猪粪。装入量是通过调节量调节盒的高度来控制,能够连续工作,效率高,定量准确,操作简单。

    5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的分离

    公开(公告)号:CN103194465A

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201210006891.2

    申请日:2012-01-10

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦基因5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述,该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是从深海细菌Janibacter limosus菌株的基因组文库中克隆得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD001保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC NO:M2011493。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。

    显性抑制突变体F427N作为炭疽毒素抑制剂及疫苗的应用

    公开(公告)号:CN101445789B

    公开(公告)日:2011-01-26

    申请号:CN200810197554.X

    申请日:2008-11-07

    摘要: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427N作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆,蛋白表达与纯化,基因定点饱和突变等方法,得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427N),该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX-KG中,构建了重组质粒pGEX-KG-PA(F427N)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX-KG-PA(F427N),保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC-M208159。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法,利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

    一种耐盐的内切纤维素酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN101418307A

    公开(公告)日:2009-04-29

    申请号:CN200810197797.3

    申请日:2008-11-24

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种新的耐盐内切纤维素酶及其编码基因。本发明公开了所述基因的序列及其编码区,该基因的序列如SEQ ID NO:1所示,序列全长为1053bp,编码350个氨基酸。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/S664/6p/cel8h,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M208233。生物学验证表明,该内切纤维素酶对高盐浓度具有极强耐性。该酶能够广泛应用于高盐催化、纤维素发酵等工业领域。

    一种耐碱、高活性的碱性木聚糖酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN101402964A

    公开(公告)日:2009-04-08

    申请号:CN200810197564.3

    申请日:2008-11-10

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种新的碱性木聚糖酶及其编码基因。本发明公开所述基因的序列及其编码区。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/Mn22/6p/Kxyn,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M208201。经过生物学验证,证明该木聚糖酶Kxyn具有强耐碱性和热稳定性,可专门降解木聚糖。本发明的木聚糖酶Kxyn可用于造纸等相关领域。

    一种苏云金芽胞杆菌杀虫剂油剂

    公开(公告)号:CN1357237A

    公开(公告)日:2002-07-10

    申请号:CN00131222.7

    申请日:2000-12-07

    IPC分类号: A01N63/04

    摘要: 本发明属于微生物杀虫农药技术领域,具体涉一种苏云金芽胞杆菌杀虫剂油剂制备技术领域。该油剂由溶剂油、乳化剂和苏云金芽胞杆菌原粉按一定比例配制而成。其中的溶剂油从植物油和矿物油中选择,乳化剂从矿物油或乳化剂中选择。与已有技术相比,本发明提高了苏云金芽胞杆菌杀虫剂的稳定性并有效地延长了苏云金芽胞杆菌杀虫剂的贮存期,降低了生产成本,减少了环境污染。