公开(公告)号：CN117106090A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202311022743.4

申请日：2023-08-15

Applicant: 十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)

Inventor： 张敏 ,  董志强 ,  李兰 ,  段超

IPC: C07K16/40 ,  C12N15/13 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种靶向GSK3β的纳米抗体及其制备方法，属于生物技术领域。该靶向GSK3β的纳米抗体的核酸序列如Seq ID No.1所示。本发明还提出一种上述纳米抗体的制备方法，包括：S1、构建多样性为109的全合成纳米抗体酵母展示文库；S2、将转化后接种于液体培养基的酵母细胞接种于SD‑Trp培养基中二次传代培养；S3、取二次传代的细胞接种于SD‑Trp培养基培养至OD＝0.5‑1；以GSK3β的eIF4E2结合域为抗原，偶联羧基磁珠，通过三轮磁珠筛选和三轮流式筛选得到所述纳米抗体。本发明提出的纳米抗体能够成功特异性激活GSK3β的S/T‑P激酶活性。

公开(公告)号：CN117106090B

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202311022743.4

申请日：2023-08-15

Applicant: 十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)

Inventor： 张敏 ,  董志强 ,  李兰 ,  段超

IPC: C07K16/40 ,  C12N15/13 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种靶向GSK3β的纳米抗体及其制备方法，属于生物技术领域。该靶向GSK3β的纳米抗体的核酸序列如Seq ID No.1所示。本发明还提出一种上述纳米抗体的制备方法，包括：S1、构建多样性为109的全合成纳米抗体酵母展示文库；S2、将转化后接种于液体培养基的酵母细胞接种于SD‑Trp培养基中二次传代培养；S3、取二次传代的细胞接种于SD‑Trp培养基培养至OD＝0.5‑1；以GSK3β的eIF4E2结合域为抗原，偶联羧基磁珠，通过三轮磁珠筛选和三轮流式筛选得到所述纳米抗体。本发明提出的纳米抗体能够成功特异性激活GSK3β的S/T‑P激酶活性。