一种评价促血小板生成素受体激动剂体外活性的分析方法

    公开(公告)号:CN104181290A

    公开(公告)日:2014-12-03

    申请号:CN201410387494.3

    申请日:2014-08-08

    IPC分类号: G01N33/53

    CPC分类号: G01N33/6863

    摘要: 本发明公开了一种利用悬浮细胞MO7e评价促血小板生成素受体(TPO受体)激动剂体外活性的分析方法。该方法通过评价样品对细胞的促增殖发育能力来反映样品与TPO受体结合活性以及促血小板生成活性。本发明一方面解决了现有技术中BaF3-hMpl细胞系构建难度大耗时长,检测结果不稳定的问题;另一方面解决了悬浮细胞MTT法显色时间长并且产生不溶性甲臜产物,导致结果重现性差、准确度低的问题;同时采用优于存活率评价指标的四参数数据处理方法,可直接定义样品活性值。

    一种复杂糖蛋白二硫键定位的方法

    公开(公告)号:CN108802218B

    公开(公告)日:2021-10-19

    申请号:CN201810550275.0

    申请日:2018-05-31

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/89 G01N33/68

    摘要: 本发明公开了一种复杂糖蛋白二硫键定位的方法。该方法包括以下步骤:1)通过反相色谱法将α与β亚基进行分收;2)对分收后的α和β亚基,进行变性处理,然后用超滤管进行脱盐换液;3)采用多种特异性和/或非特异性酶对变性后的α和β亚基进行反复酶切,最后终止酶切;4)对终止酶切后的样品进行质量肽谱图分析,定位二硫键。本发明的方法可以克服复杂糖蛋白的蛋白结构和糖链等空间位阻导致酶切效率低的影响,适用于糖蛋白复杂连接方式二硫键的定位。

    一种复杂糖蛋白二硫键定位的方法

    公开(公告)号:CN108802218A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810550275.0

    申请日:2018-05-31

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/89 G01N33/68

    摘要: 本发明公开了一种复杂糖蛋白二硫键定位的方法。该方法包括以下步骤:1)通过反相色谱法将α与β亚基进行分收;2)对分收后的α和β亚基,进行变性处理,然后用超滤管进行脱盐换液;3)采用多种特异性和/或非特异性酶对变性后的α和β亚基进行反复酶切,最后终止酶切;4)对终止酶切后的样品进行质量肽谱图分析,定位二硫键。本发明的方法可以克服复杂糖蛋白的蛋白结构和糖链等空间位阻导致酶切效率低的影响,适用于糖蛋白复杂连接方式二硫键的定位。

    一种糖蛋白多种电荷异构体翻译后修饰的评价方法

    公开(公告)号:CN109932444B

    公开(公告)日:2022-03-11

    申请号:CN201910208476.7

    申请日:2019-03-19

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明公开了一种糖蛋白多种电荷异构体翻译后修饰的评价方法。该方法包括以下步骤:1)通过等电聚焦电泳将多种电荷异质体进行分离;2)对多种电荷异质体分离后的条带进行切割并收集;3)收集后的多种异质体分别进行胶内酶切;4)提取胶内酶切后的肽段;5)对提取后的肽段进行质谱分析,确认氧化、脱酰胺、C末端Lys缺失和糖基化等翻译后修饰。本发明的方法克服了多种电荷异构体对翻译后修饰分析的难点,能够精确分析单一电荷糖蛋白的多种翻译后修饰,更有利于对多种电荷异构体相关的多种翻译后修饰进行精确分析,适用于糖蛋白多种电荷异质体翻译后修饰的分析及评价。