公开(公告)号：CN111848779B

公开(公告)日：2022-02-22

申请号：CN202010781505.1

申请日：2020-08-06

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  靳换 ,  孔子萌 ,  江波 ,  许健 ,  刘文晓 ,  宋翠平

IPC: C07K14/705 ,  C07K16/28 ,  C07K16/06 ,  C07K1/16 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种抗鸡补体受体2(ChCR2)单克隆抗体及其应用，本发明以纯化后的ChCR2蛋白片段作为免疫原，免疫小鼠后提取免疫合格的的小鼠脾脏B淋巴细胞，通过细胞融合技术将淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，经过筛选和亚克隆技术，获得抗ChCR2单克隆抗体，本发明的抗ChCR2单克隆抗体可以用于检测ChCR2蛋白抗原的生物学检测试剂，并应用在研究鸡B细胞功能的相关检测产品中。

公开(公告)号：CN112979789A

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN202110403118.9

申请日：2021-04-14

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 刘文晓 ,  李永清 ,  洪家兵 ,  江波 ,  许健 ,  程晶 ,  郭楠楠 ,  王晓玥

IPC: C07K16/08 ,  C12N5/20 ,  G01N33/543 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的检测，具体涉及一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA试剂盒及其应用。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒的具有中和活性的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.21015的杂交瘤细胞所分泌。还提供一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的试剂盒，其包含所述单克隆抗体。本发明基于所述单克隆抗体以及本发明设计的截短的gD蛋白，建立了一种可检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA方法，具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点。

公开(公告)号：CN106754934B

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201611063897.8

申请日：2016-11-28

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  许健 ,  张喜喜 ,  黄秀芬

IPC: C12N15/115 ,  G01N33/569 ,  G01N33/53 ,  A61K48/00 ,  A61K31/711

Abstract: 本发明提供了一种牛传染性鼻气管炎病毒的核酸适配体，该核酸适体结合力最高，特异性良好，能够一定程度抑制病毒对细胞的感染，并且在进行FAM标记后，能够进行间接免疫荧光试验(IFA)。该核酸适配体可以用于抑制病毒对细胞的感染，起到抗病毒作用，也可以作为抗IBRV的探针或靶点，用于制备抗牛传染性鼻气管炎病毒的药物或试剂。

公开(公告)号：CN109929014A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910119158.3

申请日：2019-02-18

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 许健 ,  李永清 ,  江波 ,  刘文晓 ,  靳换

IPC: C07K14/03 ,  C12N15/38 ,  C12N7/01 ,  C12N15/869 ,  A61K39/255 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用，该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制，从而提高疫苗的免疫效力，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白；或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现，缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN-I的产生，从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。

公开(公告)号：CN107815469A

公开(公告)日：2018-03-20

申请号：CN201710960317.3

申请日：2017-10-16

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  许健 ,  江波 ,  黄秀芬

IPC: C12N15/869 ,  C12N7/01 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/86 ,  C07K14/005 ,  C12N7/00 ,  C12N15/66 ,  C12N2710/16021 ,  C12N2710/16043 ,  C12N2720/10022 ,  C12N2760/18122

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种重组火鸡疱疹病毒，其具有同时表达NDV和IBDV保护性抗原基因的重组HVT，其是基于火鸡疱疹病毒(HVT)的细菌人工染色体(BAC)，利用基因重组技术先在HVT基因组的UL45-46非必需区插入巨细胞病毒启动子CMV调控下的鸡传染性法氏囊病毒LX株的VP2基因表达盒，然后在HVT基因组的另一个非必须区US1-10插入鸡β肌动蛋白启动子pec调控下的鸡新城疫病毒PX02/3株的F基因表达盒构建的。该重组火鸡疱疹病毒既可防控鸡马立克氏病，又可有效抵抗鸡新城疫及传染性法氏囊病的重组三联禽用疫苗候选株。

公开(公告)号：CN107312087A

公开(公告)日：2017-11-03

申请号：CN201710388492.X

申请日：2017-05-27

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  许健 ,  吴靖 ,  黄秀芬

IPC: C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  A61K39/42 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明提供了一种抗IBRV的单链抗体，由SEQ ID NO.1所示重链可变区、SEQ ID NO.2所示轻链可变区及连接二者的连接肽组成的蛋白质，其具有抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD蛋白抗体的特性。本发明还提供了所述单链抗体的制备方法。本发明的单链抗体能特异性地结合IBRV，也能在Western-blot中特异性结合大肠杆菌表达产物中的IBV gD蛋白；间接免疫荧光试验显示该单链抗体能够识别感染在牛肾细胞MDBK中的IBRV，将其应用在牛传染性鼻气管炎的检测与治疗制剂的研制中具有良好的应用价值。

公开(公告)号：CN106754934A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611063897.8

申请日：2016-11-28

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  许健 ,  张喜喜 ,  黄秀芬

IPC: C12N15/115 ,  G01N33/569 ,  G01N33/53 ,  A61K48/00 ,  A61K31/711

CPC classification number: C12N15/115 ,  A61K31/711 ,  C12N2310/16 ,  G01N33/5308 ,  G01N33/56983

Abstract: 本发明提供了一种牛传染性鼻气管炎病毒的核酸适配体，该核酸适体结合力最高，特异性良好，能够一定程度抑制病毒对细胞的感染，并且在进行FAM标记后，能够进行间接免疫荧光试验(IFA)。该核酸适配体可以用于抑制病毒对细胞的感染，起到抗病毒作用，也可以作为抗IBRV的探针或靶点，用于制备抗牛传染性鼻气管炎病毒的药物或试剂。

公开(公告)号：CN106405093A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610796330.5

申请日：2016-08-31

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  许健 ,  黄秀芬 ,  叶丽娜

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N33/535 ,  G01N33/56994 ,  G01N2333/06

Abstract: 本发明提供了一种检测抗牛传染性鼻气管炎病毒抗体的检测试剂盒，其包括：包被抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的单克隆抗体和IBRV抗原的酶标板、IBRV阳性标准血清、阴性血清、酶标记二抗、底物显色液、终止液。本发明利用抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的单克隆抗体，在酶联板捕获受感染的MDBK细胞裂解物中的牛传染性鼻气管炎病毒，通过方阵滴定法确定了单克隆抗体和病毒抗原的最佳包被浓度。本发明试剂盒具有良好的特异性、敏感性，中和符合率高，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114763557A

公开(公告)日：2022-07-19

申请号：CN202110044514.7

申请日：2021-01-13

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 许健 ,  李永清 ,  蔡云虹 ,  江波 ,  马振邦

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/6883 ,  G01N33/573 ,  A61K45/00 ,  A61K31/713 ,  A61K49/00 ,  A61P31/12 ,  A61P37/02

Abstract: 本发明首次通过体内外研究发现DDX5蛋白具有明显的抗病毒和抑制免疫反应的功能，这种逃避宿主免疫反应的方式与作用是全新的，为筛选和开发新的抗病毒或调节免疫反应的药物提供了新的靶点和方法。本发明所构建的DDX5+/‑基因敲除小鼠系是独一无二的，将为抗病毒药物和免疫调节药物的研发及动物疾病模型的建立提供应用价值。

公开(公告)号：CN109402274B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201811332791.2

申请日：2018-11-09

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  李霄阳 ,  许健 ,  江波 ,  刘文晓

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6809 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明通过RNA‑seq技术获得A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌菌株的差异表达基因的方法，以及通过多杀性巴氏杆菌的差异表达基因或其产物检测A型多杀性巴氏杆菌或者鉴别A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌的应用。本发明还建立了基于差异表达基因鉴别A型和B型多杀性巴氏杆菌的荧光定量RT‑PCR方法。所述RT‑PCR方法包括对多杀性巴氏杆菌TadD基因进行扩增的步骤。本发明的方法可以高灵敏度、高特异性地检测A型菌株，灵敏度为10fg cDNA/μL，是常规PCR的1000倍，且不与其他种属的细菌反应，具有良好的特异性。本发明的方法通过特异性检测A型牛源多杀性巴氏杆菌和鉴别A型与B型多杀性巴氏杆菌，不仅可以对相关疫病进行鉴别诊断，也可为今后A型疫苗的免疫效力提供有效监测，具有重大的实用价值和应用前景。