一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN109929014B

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN201910119158.3

    申请日:2019-02-18

    Abstract: 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用,该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制,从而提高疫苗的免疫效力,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白;或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现,缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN‑I的产生,从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。

    鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备

    公开(公告)号:CN111763256A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010781397.8

    申请日:2020-08-06

    Abstract: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列,构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白,并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因,在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来,通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答,其导致的细胞信号传导现象,能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重,所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。

    一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株的方法

    公开(公告)号:CN109666656A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201910062666.2

    申请日:2019-01-23

    Abstract: 本发明提供了一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株(CVI-VP2)的方法,该方法将感染重组病毒CVI-VP2种子毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)在96孔细胞板上进行有限稀释,一分为二进行6孔板和96孔细胞板培养后,采用固定液将6孔板中的VP2蛋白固定,以抗IBDV VP2单克隆抗体为一抗,辣根过氧化物酶HRP标记的羊抗鼠IgG进行结合反应,再进行AEC原位染色;进一步选取上述试验的6孔板90%以上空斑为IBDV VP2表达阳性孔(空斑被染成深褐色)对应的96孔板进行下一轮的纯化,直至筛选出高效表达IBDV VP2蛋白的细胞克隆。该方法操作简便、重复性好、肉眼或光镜下即可以读取实验结果。

    一种抗传染性法氏囊病病毒VP2及鸡CR2的双特异性抗体

    公开(公告)号:CN115850500A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202211430504.8

    申请日:2022-11-15

    Abstract: 本发明涉及鸡传染性法氏囊病的防治,具体涉及一种抗传染性法氏囊病病毒VP2及鸡CR2的双特异性抗体。本发明提供一种双特异性抗体,其包含第一结合结构域和第二结合结构域;所述第一结合结构域能与鸡CR2结合;所述第二结合结构域能与传染性法氏囊病病毒VP2结合。所述双特异性抗体不仅可以结合传染性法氏囊病病毒,也可以靶向结合B细胞的膜表面分子鸡补体受体2,可用于靶向性基因工程亚单位疫苗的制备,为研制靶向型鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗奠定了基础。

    一种牛传染性鼻气管炎病毒的快速定量检测方法

    公开(公告)号:CN114878819B

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN202210811780.2

    申请日:2022-07-12

    Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的检测,具体涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒的快速定量检测方法。本发明提供用于检测IBRV的荧光微球免疫层析试纸条,包括底板以及依次搭接粘贴在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述结合垫上包被有荧光微球标记的IBRV多克隆抗体;所述硝酸纤维素膜上设有检测线,所述检测线上包被有IBRV单克隆抗体,所述IBRV单克隆抗体由保藏编号为CGMCC No.45040的杂交瘤细胞分泌。该试纸条可对感染牛的眼鼻分泌物、精液以及阴道分泌物中的IBRV进行定性或定量检测,具有敏感性高、特异性强、稳定性好、准确性高、检测速度快的优点,整个检测在15min内即可完成。

    一种牛传染性鼻气管炎病毒的快速定量检测方法

    公开(公告)号:CN114878819A

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202210811780.2

    申请日:2022-07-12

    Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的检测,具体涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒的快速定量检测方法。本发明提供用于检测IBRV的荧光微球免疫层析试纸条,包括底板以及依次搭接粘贴在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述结合垫上包被有荧光微球标记的IBRV多克隆抗体;所述硝酸纤维素膜上设有检测线,所述检测线上包被有IBRV单克隆抗体,所述IBRV单克隆抗体由保藏编号为CGMCC No.45040的杂交瘤细胞分泌。该试纸条可对感染牛的眼鼻分泌物、精液以及阴道分泌物中的IBRV进行定性或定量检测,具有敏感性高、特异性强、稳定性好、准确性高、检测速度快的优点,整个检测在15min内即可完成。

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