公开(公告)号：CN113249237A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110356267.4

申请日：2021-04-01

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 肖萌 ,  米哈尔·卡茨马雷克 ,  蒋莹 ,  毛睿慈

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/56 ,  C12N15/55 ,  C12N9/42 ,  C12N9/80 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种毕赤酵母工程菌株及其构建方法和应用。本发明构建的工程菌株经过甲醇诱导后，可同时在胞外分泌几丁质酶蛋白(ChdaII)、壳聚糖酶蛋白(ChiA)和几丁质脱乙酰酶蛋白(ChoA)，对几丁质及其衍生物进行酶促降解，其对应酶活分别为1.99U/mL，3.46U/mL，0.25U/mL。相比于传统的热化学降解法，本发明的工程菌株高效，环保，产物专一，适合于工业化应用。

公开(公告)号：CN106544327B

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201610967094.9

申请日：2016-10-28

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  成家杨 ,  毛睿慈

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明公开了一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，包括步骤：将S7942 NSIIRA、S7942 NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再扩增收获第一菌体，提取质粒作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将接种液添加至新鲜的Bg‑11液体培养基中培养，直至聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向第一培养体系中加入重组质粒并培养，直至第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将第二培养体系涂布于含有筛选抗性的Bg‑11固体培养基上并培养，直至出现转化子，获得漆酶。根据本发明的方法所获得的漆酶对染料具有良好的降解作用。

公开(公告)号：CN106544327A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201610967094.9

申请日：2016-10-28

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  成家杨 ,  毛睿慈

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明公开了一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，包括步骤：将S7942 NSIIRA、S7942 NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再扩增收获第一菌体，提取质粒作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将接种液添加至新鲜的Bg‑11液体培养基中培养，直至聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向第一培养体系中加入重组质粒并培养，直至第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将第二培养体系涂布于含有筛选抗性的Bg‑11固体培养基上并培养，直至出现转化子，获得漆酶。根据本发明的方法所获得的漆酶对染料具有良好的降解作用。

公开(公告)号：CN118165906A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410596352.1

申请日：2024-05-14

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 尤大伟 ,  毛睿慈

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/42 ,  C12N15/74 ,  C12N15/53 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供了一种直接利用废弃二氧化碳产3‑羟基丙酸的重组菌及其构建方法与应用,并公开了针对嗜热蓝细菌E542进行密码子优化后的编码丙二酰‑CoA还原酶基因MCR和编码丙二酸半醛还原酶基因MSR的核苷酸序列，属于基因工程技术领域。针对3‑羟基丙酸的生物合成，本发明提供了一种直接利用废弃二氧化碳为原料进行生物合成3‑羟基丙酸的重组嗜热蓝细菌，该菌株是将编码丙二酰‑CoA还原酶基因MCR与丙二酸半醛还原酶基因MSR通过游离的穿梭质粒导入嗜热蓝细菌E542中获得。本发明制备的重组嗜热蓝细菌实现了直接利用废弃二氧化碳为原料生物合成3‑羟基丙酸，该方法生产安全、环境友好、成本低且可持续，为3‑羟基丙酸进一步绿色可再生生产提供了新的思路。

公开(公告)号：CN107353337A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710597354.2

申请日：2017-07-20

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  毛睿慈

IPC: C07K14/795 ,  C07K1/14 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01

CPC classification number: C07K14/795 ,  C12N1/20

Abstract: 本发明公开了一种嗜热C-藻蓝蛋白，其具有如序列1所示的氨基酸序列，并且该氨基酸序列的第21、28、33、37、42及145位中的不超过3个特征位置的氨基酸可调。本发明还提供了从聚球藻属蓝细菌中提取上述嗜热C-藻蓝蛋白的方法。根据本发明的从聚球藻属蓝细菌中提取嗜热C-藻蓝蛋白的方法，其获得的嗜热C-藻蓝蛋白具有良好的热稳定性以及酸碱耐受力；相比现有技术中通过螺旋藻等提取的藻蓝蛋白，其良好的热稳定性和酸碱耐受力能够使得其在工业应用中具有更广泛的应用范围，表现出更为显著的应用优势。