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公开(公告)号：CN103952381A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410127107.2
申请日：2014-03-31
申请人： 北京化工大学
CPC分类号： C12N9/0008 , C12P7/42 , C12Y102/03001
摘要： 一个不依赖NAD+催化3-羟基丙醛产3-羟基丙酸的醛氧化酶及其应用属于生物化工生产领域，涉及一个不依赖NAD+的醛氧化酶，使肺炎克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae）能够在催化3-羟基丙醛产生3-羟基丙酸的过程中，保持胞内辅酶的平衡。醛氧化酶的序列为序列表中的SEQ ID NO:1。经过大量筛选，发现在假单胞菌（Pseudomonas sp.）中的醛氧化酶不依赖NAD+，并可催化醛类物质氧化成对应的羧酸。在此基础上，在肺炎克雷伯氏杆菌体内对该醛氧化酶进行了超表达，对其进行了体内及体外催化3-羟基丙醛的能力进行了测定。该酶具有较好的生产3-羟基丙酸的能力。
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公开(公告)号：CN106085415B
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201610562804.X
申请日：2016-07-16
申请人： 北京化工大学
IPC分类号： C09K11/06 , C07D519/00 , C07D455/03 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 一种小檗碱亲和标记探针及其制备方法属于生物检测领域。探针包括：活性基团小檗碱、亲和标记基团、连接部位和报告基团四个功能部位。此小檗碱标记探针与靶蛋白作用后，通过光照使亲和标记基团分解，得到活泼的中间体，从而使探针分子与靶点蛋白共价结合，将靶标蛋白调出，确定靶标蛋白。本探针可用于小檗碱与机体、组织、细胞、菌体作用后靶标的探究。此小檗碱亲和标记探针基于活性小分子与靶标蛋白之间的作用，具有方便、准确、灵敏高、适用于非模式生物的特点，其灵敏度明显高于蛋白质光谱探针、RNA干扰。小檗碱亲和标记探针可用于钓取人体、实验动物和微生物中的靶标蛋白，具有重要生物和医学应用价值。
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公开(公告)号：CN106085415A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610562804.X
申请日：2016-07-16
申请人： 北京化工大学
IPC分类号： C09K11/06 , C07D519/00 , C07D455/03 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC分类号： C09K11/06 , C07D455/03 , C07D519/00 , C09K2211/1022 , C09K2211/1029 , C09K2211/1044 , C09K2211/1088 , C09K2211/1092 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要： 一种小檗碱亲和标记探针及其制备方法属于生物检测领域。探针包括：活性基团小檗碱、亲和标记基团、连接部位和报告基团四个功能部位。此小檗碱标记探针与靶蛋白作用后，通过光照使亲和标记基团分解，得到活泼的中间体，从而使探针分子与靶点蛋白共价结合，将靶标蛋白调出，确定靶标蛋白。本探针可用于小檗碱与机体、组织、细胞、菌体作用后靶标的探究。此小檗碱亲和标记探针基于活性小分子与靶标蛋白之间的作用，具有方便、准确、灵敏高、适用于非模式生物的特点，其灵敏度明显高于蛋白质光谱探针、RNA干扰。小檗碱亲和标记探针可用于钓取人体、实验动物和微生物中的靶标蛋白，具有重要生物和医学应用价值。
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公开(公告)号：CN104805112B
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201510188882.3
申请日：2015-04-20
申请人： 北京化工大学
摘要： 种3‑羟基丙酸高产菌重组质粒的构建方法属于生物化工生产领域。鉴于现有产3‑羟基丙酸工程菌产量大都较低,发现了适用于肺炎克雷伯氏杆菌的高效tac启动子以及能转化3‑羟基丙醛为3‑羟基丙酸的puuc醛脱氢酶,并以此构建重组工程菌。将该酶编码基因的序列进行分析后,对该基因进行了化学合成。测序验证后将该启动子和酶在肺炎克雷伯氏杆菌中超表达,获得了重组肺炎克雷伯氏杆菌pET(ptac‑puuc),测定其体内及体外对3‑羟基丙醛的催化能力。在体外,该酶对3‑羟基丙醛的酶活达到26.31U/mg,是原代肺炎克雷伯氏杆菌(3.82U/mg)的6.9倍。在5L发酵罐中培养改造后的工程菌,经培养基成分、IPTG浓度条件优化后,其48h后3‑羟基丙酸产量高达73g/L。
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公开(公告)号：CN104805112A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510188882.3
申请日：2015-04-20
申请人： 北京化工大学
摘要： 一种3-羟基丙酸高产菌重组质粒的构建方法属于生物化工生产领域。鉴于现有产3-羟基丙酸工程菌产量大都较低，发现了适用于肺炎克雷伯氏杆菌的高效tac启动子以及能转化3-羟基丙醛为3-羟基丙酸的puuc醛脱氢酶，并以此构建重组工程菌。将该酶编码基因的序列进行分析后，对该基因进行了化学合成。测序验证后将该启动子和酶在肺炎克雷伯氏杆菌中超表达，获得了重组肺炎克雷伯氏杆菌pET(ptac-puuc)，测定其体内及体外对3-羟基丙醛的催化能力。在体外，该酶对3-羟基丙醛的酶活达到26.31U/mg，是原代肺炎克雷伯氏杆菌(3.82U/mg)的6.9倍。在5L发酵罐中培养改造后的工程菌，经培养基成分、IPTG浓度条件优化后，其48h后3-羟基丙酸产量高达73g/L。
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