一种树鼩黑质DJ-1基因敲除的帕金森病模型构建方法和应用

    公开(公告)号:CN117467702A

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311421903.2

    申请日:2023-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种树鼩黑质DJ‑1基因敲除的帕金森病模型(Parkinson’sdisease,PD)构建方法和应用,属于动物模型构建技术领域。本发明在树鼩特定脑区进行病毒工具介导的原位DJ‑1基因编辑建立PD动物模型,不仅能够模拟早发性PD患者的病因与发病过程,也更容易再现PD经典的行为症状与病理特征。构建得到的树鼩模型逐渐出现PD运动症状,其PD评分随时间缓慢升高;此外,树鼩个体之间表现出一定的差异性,这也充分模拟了人类家族性PD发病的个体差异模式。由此,本发明所述树鼩模型可对PD的病因、发病机理、早期诊断与干预研究提供全新的视角,提供一种成本低、周期短、可广泛用于新药评价的小动物模型。

    一种将病毒工具注入非人灵长类动物黑质实现DJ-1基因原位敲除的方法及其应用

    公开(公告)号:CN118272433A

    公开(公告)日:2024-07-02

    申请号:CN202311422362.5

    申请日:2023-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种将病毒工具注入非人灵长类动物黑质实现DJ‑1基因原位敲除的方法及其应用。所述方法包括步骤:设计一套特异性敲除神经元中DJ‑1基因外显子的sgRNA,构建与SaCas9共表达的载体;通过体外细胞转染测试,挑选高效的DJ‑1基因敲除载体包装成高质量的AAV9;再通过非人灵长类动物脑内转染测试,确定病毒工具的有效性;之后,利用微量注射器将所述病毒工具直接注入非人灵长类动物的黑质,实现DJ‑1基因的原位敲除。本发明所述具有高效敲除DJ‑1基因的病毒工具原位转染猕猴黑质能够在短时间内获得大量具备核心帕金森病表型且能模拟人类基因突变的“病因性”帕金森病猕猴模型,为该病的早期预警与诊断标志物发掘提供借鉴。

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