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公开(公告)号：CN118086104A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410104404.9
申请日：2024-01-25
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要： 本发明公开了一种球形芽孢杆菌及其应用，属于农业微生物技术领域。本发明从香蕉根际土壤中筛选得到一株新的球形芽孢杆菌(Bacillus stercoris)，该菌的保藏编号为GDMCC No：64032。该球形芽孢杆菌对多种植物病原真菌具有广谱的抑菌性，能够有效抑制8种植物病原真菌，抑菌率为73.07～85.96％。该球形芽孢杆菌的无菌滤液能够抑制香蕉暗双孢菌的生长，30％的无菌滤液对香蕉暗双孢菌的抑制率为79.17％。同时采用喷施球形芽孢杆菌生防菌液能显著降低病原菌对香蕉的危害。本发明为植物病原真菌的防治提供新的微生物菌株和防治方法策略，具有很好的生物防治效果。
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公开(公告)号：CN103757093B
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201310536459.9
申请日：2013-11-04
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要： 本发明公开了一种从土壤中定量检测香蕉枯萎病菌4号小种的方法，该方法步骤为：对被检样品进行预处理，提取被检样品的DNA；特异性引物的制备；荧光核酸恒温扩增检测技术RealAmp反应；RealAmp标准曲线的构建；结果判断。本发明提供的实时荧光核酸恒温扩增检测技术是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术，具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定的优点，RealAmp可以定量检测病原物，由于LAMP的特性，BstDNApolymerase具有链置换能力，对土壤DNA提取物中包含的抑制物质具有很好的耐受性，针对土壤开展检测工作，采用不开盖、不易受污染物的影响且能现场检测土壤样品，分析判断反应产物的方法极为简单，适宜于广泛地推广应用。
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公开(公告)号：CN118086104B
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410104404.9
申请日：2024-01-25
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要： 本发明公开了一种球形芽孢杆菌及其应用，属于农业微生物技术领域。本发明从香蕉根际土壤中筛选得到一株新的球形芽孢杆菌(Bacillus stercoris)，该菌的保藏编号为GDMCC No：64032。该球形芽孢杆菌对多种植物病原真菌具有广谱的抑菌性，能够有效抑制8种植物病原真菌，抑菌率为73.07～85.96％。该球形芽孢杆菌的无菌滤液能够抑制香蕉暗双孢菌的生长，30％的无菌滤液对香蕉暗双孢菌的抑制率为79.17％。同时采用喷施球形芽孢杆菌生防菌液能显著降低病原菌对香蕉的危害。本发明为植物病原真菌的防治提供新的微生物菌株和防治方法策略，具有很好的生物防治效果。
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公开(公告)号：CN108660241B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201810390429.4
申请日：2018-04-27
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q1/04 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种用于检测芒果疮痂病病原菌的特异性引物及巢式PCR检测方法，主要提供了一种用于检测芒果疮痂病病原菌的特异性引物(上游引物P1：5′‑CCCACCCTTTGCTGTTGCG‑3′和下游引物P2：5′‑AAGGCCCCGCGTTTTCG‑3′)，该引物与通用引物ITS1/ITS4配合使用，经过两轮PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，可在芒果疮痂病病原菌基因组DNA或感染芒果疮痂病病原菌的植物组织中特异性地扩增出长度为488bp的特异扩增产物。所发明的特异性引物及其用法可被用于生产实践中芒果疮痂病病原菌的快速、灵敏、特异的检测，对芒果疮痂病的鉴定和防治具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN103740806A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310545700.4
申请日：2013-11-06
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2531/119 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种从土壤中定量检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法，该方法步骤为：对被检样品进行预处理，提取被检样品的DNA；特异性引物的制备；荧光核酸恒温扩增检测技术RealAmp反应；RealAmp标准曲线的构建；结果判断。本发明的一种从土壤中定量检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法克服以往基因扩增方法的不足，具有高特异性，灵敏度高、定量检测下限为4.3×10-4ng/μl，易操作，用时短、只需2-3h，不易受污染物的影响且能现场检测土壤样品，也不需要昂贵而精密的温度循环装置、只需能达63℃的恒温装置，分析判断反应产物的方法极为简单，只需肉眼观察即可，又能定量地判别土壤中香蕉枯萎病菌热带4号小种的含量，适宜于广泛地推广应用。
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公开(公告)号：CN109234440A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811336325.1
申请日：2018-11-12
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种用于检测芒果链格孢霉叶斑病病原菌的特异性引物及检测方法，主要提供了特异性引物(P1：5′-ACTTCTTGTTTCCTTGGTGGGT-3′和P2：5′-ACGCCCAACACCAAGCAA-3′)，采用该引物，可在芒果链格孢霉叶斑病菌基因组DNA或者疑似感染了芒果链格孢霉叶斑病病原菌的植物组织中特异性地扩增出280bp的特异扩增产物。所发明的特异性引物及其用法可被用于生产实践中芒果链格孢霉叶斑病菌的快速、灵敏、特异的检测，对芒果链格孢霉叶斑病病原菌的鉴定和防治具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN108660241A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810390429.4
申请日：2018-04-27
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q1/04 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种用于检测芒果疮痂病病原菌的特异性引物及巢式PCR检测方法，主要提供了一种用于检测芒果疮痂病病原菌的特异性引物(上游引物P1：5′-CCCACCCTTTGCTGTTGCG-3′和下游引物P2：5′-AAGGCCCCGCGTTTTCG-3′)，该引物与通用引物ITS1/ITS4配合使用，经过两轮PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，可在芒果疮痂病病原菌基因组DNA或感染芒果疮痂病病原菌的植物组织中特异性地扩增出长度为488bp的特异扩增产物。所发明的特异性引物及其用法可被用于生产实践中芒果疮痂病病原菌的快速、灵敏、特异的检测，对芒果疮痂病的鉴定和防治具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN103740806B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201310545700.4
申请日：2013-11-06
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要： 本发明公开了一种从土壤中定量检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法，该方法步骤为：对被检样品进行预处理，提取被检样品的DNA；特异性引物的制备；荧光核酸恒温扩增检测技术RealAmp反应；RealAmp标准曲线的构建；结果判断。本发明的一种从土壤中定量检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法克服以往基因扩增方法的不足，具有高特异性，灵敏度高、定量检测下限为4.3×10-4ng/μl，易操作，用时短、只需2-3h，不易受污染物的影响且能现场检测土壤样品，也不需要昂贵而精密的温度循环装置、只需能达63℃的恒温装置，分析判断反应产物的方法极为简单，只需肉眼观察即可，又能定量地判别土壤中香蕉枯萎病菌热带4号小种的含量，适宜于广泛地推广应用。
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公开(公告)号：CN103583576A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310547213.1
申请日：2013-11-06
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要： 本发明公开了一种酵母菌液体生防菌剂的配方及其制备方法，该配方为：酵母菌、蔗糖、海藻糖、半乳糖、抗坏血酸、0.05mol/L磷酸缓冲液；该方法为：采用NYDB液体培养基，将酵母菌株4-4A活化后，取两环接种于50ml种子培养基中；将培养好的酵母发酵液装入50ml离心管中，4000r/min离心15min，倒掉上清液，用无菌水清洗两次，所得的沉淀加入0.05mol/L的磷酸缓冲液制成菌悬液；选用蔗糖，半乳糖，海藻糖作为保护剂，用磷酸缓冲液配制溶液；取溶液各21.6ml，加入109CFU/ml的酵母母液2.4ml，充分混匀，分装到1.5ml的离心管中；酵母制剂中活菌数的测定。本发明可以有效减少芒果采后炭疽病的发生率，在初花期至采收期施用4次～6次防治芒果炭疽病，发病率和严重度分别下降了64%～67%和89%～90%，提高了对病害的防治效果。
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公开(公告)号：CN116004892A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211344120.4
申请日：2022-10-31
申请人： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/645
摘要： 本发明提供一种香蕉灰纹病菌的PCR检测引物及检测方法，所述PCR检测引物中的上游引物序列为ATGTGCAAGGCCGGTTTCG，下游引物序列为CGTCACATCGGCTCAAATCG。基于该特异性引物，开发出香蕉灰纹病菌的PCR检测方法。利用该引物和检测方法快速检测香蕉灰纹病菌，一次PCR反应结合测序分析即可区分病原物，克服常规鉴定方法的不足，具有特异性强，准确性高、灵敏度高、适用性广及操作简便等优点。
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