一种热带植物多糖多酚小RNA提取方法

    公开(公告)号:CN103740698A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201310547550.0

    申请日:2013-11-06

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种热带植物多糖多酚小RNA提取方法,该热带植物多糖多酚小RNA提取方法包括以下步骤:采样热带植物叶片,冻入液氮,-80℃保存;准备小RNA提取的试剂,CTAB裂解缓冲液、PEG8000沉淀缓冲液、EDC交联缓冲液、miRNA?Northern?blotting杂交缓冲液、7%dPAGE、Washing?Buffer;按照小RNA提取的预处理、Trizol抽提、分级沉淀高分子量RNA、沉淀小RNA,提取小RNA;按照17%dPAGE分离、转膜及交联、miRNA杂交及洗膜、小RNA杂交及洗膜、曝光及保存,实现RNA杂交;miRNA?stem-loop?RT-PCR扩增;开展多糖多酚植物小RNA的提取以及检测分析。本发明克服了目前植物小RNA提取方法的不足,具有快速、稳定、操作简便的特点,可以针对miRNA和siRNA进行快速提取和检测分析,具有广泛的应用前景。

    一种从土壤中快速检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法

    公开(公告)号:CN103409518A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310323011.9

    申请日:2013-07-29

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/04 C12R1/77

    摘要: 本发明公开了一种从土壤中快速检测香蕉枯萎病菌热带4号小种的方法,包括如下步骤:1)对样品进行预处理,提取备检样品的DNA;2)特异性引物的制备;3)进行DNA环介导等温扩增技术反应;4)结果分析,在反应产物中加入1μl的核酸染料、瞬时离心至充分混匀,静止用肉眼观察。本发明的DNA环介导等温扩增技术,高特异性、灵敏度高、易操作、用时短、不易受污染物的影响且能现场检测土壤样品,也不需要昂贵而精密的温度循环装置,分析判断反应产物的方法极为简单,只需肉眼观察即可,适宜于广泛地推广应用。