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公开(公告)号:CN104450955B
公开(公告)日:2018-06-15
申请号:CN201410641147.9
申请日:2014-11-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种欧亚类禽型H1N1猪流感病毒荧光定量RT‑PCR检测试剂盒及其应用。本发明通过序列多重比对,针对欧亚类禽型H1N1猪流感病毒、甲型H1N1(2009)猪流感病毒、经典型H1N1猪流感病毒及人源H1N1猪流感病毒的保守基因片段,设计出特异性强的检测欧亚类禽型H1N1猪流感病毒的引物和探针,用于实时荧光RT‑PCR检测。实验结果表明使用本发明所提供的试剂盒检测欧亚类禽型H1N1猪流感病毒,特异性高,对病毒RNA检测灵敏度可达4.6×10‑7ng/反应,不仅可以对待测猪群的鼻腔拭子、肺脏,气管等组织样品进行检测,还可检测鸡胚尿囊液,操作简单、容易推广,便于基层操作和应用,可成为欧亚类禽型H1N1猪流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。
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公开(公告)号:CN113817687B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202111104857.4
申请日:2021-09-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株、A型流感病毒核蛋白单克隆抗体及其应用,属于猪流感病毒检测技术领域。本发明提供了一种能够分泌A型流感病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2021165。本发明杂交瘤细胞株分泌获得的A型流感病毒单克隆抗体具有特异性好、效价高等优点,可用于鉴定待测病毒是否为A型流感病毒,鉴定待测标本是否感染A流感病毒以及待测血清中是否含有A型流感病毒的抗体。IFA检测结果显示本发明稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株可与H1N1、H1N2、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒发生特异性反应,具有广谱生物学活性。
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公开(公告)号:CN113817687A
公开(公告)日:2021-12-21
申请号:CN202111104857.4
申请日:2021-09-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株、A型流感病毒核蛋白单克隆抗体及其应用,属于猪流感病毒检测技术领域。本发明提供了一种能够分泌A型流感病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2021165。本发明杂交瘤细胞株分泌获得的A型流感病毒单克隆抗体具有特异性好、效价高等优点,可用于鉴定待测病毒是否为A型流感病毒,鉴定待测标本是否感染A流感病毒以及待测血清中是否含有A型流感病毒的抗体。IFA检测结果显示本发明稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株可与H1N1、H1N2、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒发生特异性反应,具有广谱生物学活性。
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公开(公告)号:CN105754961A
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201610191256.4
申请日:2016-03-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了表达类禽型H1N1猪流感病毒HA蛋白的重组复制缺陷型腺病毒及其构建方法和用途。本发明所述的重组复制缺陷型腺病毒是以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒骨架质粒为载体,通过同源重组在所述的E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒骨架质粒的E1区插入类禽型H1N1猪流感病毒HA囊膜糖蛋白的编码基因,以整合腺病毒E1基因的HEK293细胞为包装细胞系获得的。实验证明,本发明制备的类禽型H1N1猪流感病毒HA蛋白重组复制缺陷型腺病毒具有良好的免疫原性,能够对类禽型H1N1和2009/H1N1两种主要类型的猪流感提供有效的免疫保护,因此本发明获得的重组复制缺陷型腺病毒有望成为研制猪流感基因工程疫苗的候选种子毒株,为猪流感的防治提供新的技术手段。
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公开(公告)号:CN105238879A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510707363.3
申请日:2015-10-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明公开了一种检测A型猪流感病毒的RT-LAMP试剂盒及其用途。所述试剂盒主要由四条LAMP引物、LAMP反应液和阳性模板组成。实验证明,本发明试剂盒具有良好的特异性、灵敏度,扩增快速、高效,且结果判定简便。本发明的检测体系在63℃等温条件下,能快速、特异、高灵敏度地检测到H1N1、H1N2、H3N2亚型猪流感病毒,不需要复杂仪器,操作简单,能较好满足对猪流感病毒的现场检测,为动物流感病毒检测提供了新的技术平台,能较好的满足目前对养殖场、兽医诊断服务机构、出入境检疫等部门现场检测的迫切需要,易于大范围推广应用,具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。
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公开(公告)号:CN104232594A
公开(公告)日:2014-12-24
申请号:CN201410460909.5
申请日:2014-09-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种重组类禽型H1N1流感病毒灭活疫苗株及其制备方法和应用。本发明的一种重组类禽型H1N1流感病毒灭活疫苗株,其是以A/swine/Jiangsu/40/2011(H1N1)为表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因供体,以流感病毒A/PR/8/34(H1N1)为聚合酶PB2亚基,聚合酶PB1亚基,聚合酶PA亚基,核蛋白(NP),基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)6个内部基因的供体,通过自然重组得到,保藏号为CCTCC NO:V201419。本发明还公开了用于构建所述重组类禽型H1N1流感病毒灭活疫苗株的方法和该重组类禽型H1N1流感病毒灭活疫苗株对预防动物或人的类禽型H1N1流感的应用。
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公开(公告)号:CN101745107B
公开(公告)日:2012-06-06
申请号:CN200810239333.4
申请日:2008-12-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种重组复制缺陷型腺病毒载体H5N1亚型流感病毒基因工程疫苗,它是以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体,以整合腺病毒E1基因的HEK293细胞为包装细胞系,在E1区携带有H5N1亚型流感病毒膜糖蛋白编码基因HA及用于筛选重组病毒的绿色荧光蛋白示踪基因EGFP,所述H5N1亚型流感膜糖蛋白编码基因HA来自流感病毒株A/Swine/Fujian/1/2001(H5N1)株。
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公开(公告)号:CN101745107A
公开(公告)日:2010-06-23
申请号:CN200810239333.4
申请日:2008-12-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种重组复制缺陷型腺病毒载体H5N1亚型流感病毒基因工程疫苗,它是以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体,以整合腺病毒E1基因的HEK293细胞为包装细胞系,在E1区携带有H5N1亚型流感病毒膜糖蛋白编码基因HA及用于筛选重组病毒的绿色荧光蛋白示踪基因EGFP,所述H5N1亚型流感膜糖蛋白编码基因HA来自流感病毒株A/Swine/Fujian/1/2001(H5N1)株。
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公开(公告)号:CN1458167A
公开(公告)日:2003-11-26
申请号:CN03132413.4
申请日:2003-06-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/005 , G01N33/569 , G01N33/531 , A61K39/12 , A61P31/12
Abstract: 截短表达的猪圆环病毒II型衣壳蛋白抗原及其应用。PCV-2基因组含ORF1和ORF2,ORF1编码病毒的复制酶,ORF2编码病毒衣壳蛋白,也是研究诊断和疫苗的唯一靶抗原。本发明利用原核表达系统克隆表达PCV-2衣壳蛋白基因(Cap)羧基端393bp部分,表达的产物经纯化后用作诊断PCV感染的抗原或制备亚单位疫苗。经用PCV阳性血清检测,表达的部分衣壳蛋白具有良好的抗原反应性,可作为诊断抗原应用于琼扩诊断技术,酶联免疫吸附试验,斑点酶联免疫吸附试验,免疫荧光检测等检测PCV-2感染产生的抗体,此外,表达的衣壳蛋白可进一步配以佐剂制备亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN118185882A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410315758.8
申请日:2024-03-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N7/08 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种H3N2亚型流感病毒抗原逃逸株及其筛选方法和应用,属于疾病防治技术领域。本发明将A/swine/Guangdong/9/2005(简称GD9/05)与HA蛋白单克隆抗体2F10在MDCK细胞中连续传代共培养,筛选到GD9/05病毒逃逸中和性mAbs 2F10的抗原突变株GD9‑2F10‑P14,其HA蛋白相应的逃逸位点为P21S/K397E。本发明提供的所述抗原逃逸株在A549细胞中的复制滴度较亲本毒株显著增高,同时逃逸株在MDCK细胞中形成蚀斑的大小和数量也均受到一定的影响。
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