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公开(公告)号:CN103614340B
公开(公告)日:2015-09-02
申请号:CN201310572460.7
申请日:2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司
Abstract: 本发明公开了稳定表达鸡白介素10蛋白的细胞系及其构建方法和应用。本发明将去信号肽的鸡白介素10编码基因定向克隆于含有新霉素抗性基因的真核表达载体中,获得重组质粒并将其转染中国仓鼠卵巢细胞系CHO-K1细胞,经G418加压筛选、纯化、获得稳定、高效表达chIL-10蛋白的细胞系CHO-chIL-10M,其微生物保藏号是CGMCC NO.7659。本发明所构建的细胞系CHO-chIL-10M在制备重组鸡白介素10蛋白以及鸡白介素10单克隆抗体等方面有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103589690A
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201310572459.4
申请日:2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司
Abstract: 本发明公开了鸡白介素-18单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明以原核表达的重组蛋白ChIL-18为免疫原,真核细胞系表达的ChIL-18蛋白为筛选原,细胞融合后以IFA筛选杂交瘤细胞,筛选获得8株分泌鸡白介素-18单克隆抗体的细胞株;其中,杂交瘤细胞株4E11稳定性最好,所分泌的单抗效价最高、特异性最强,其微生物保藏号为CGMCC NO.7658。本发明进一步提供了杂交瘤细胞株4E11以及所分泌的单克隆抗体在检测或纯化鸡白介素-18蛋白中的应用。
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公开(公告)号:CN103571796A
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201310572486.1
申请日:2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司
Abstract: 本发明公开了鸡白介素-10单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明以原核表达的重组蛋白ChIL-10为免疫原,真核细胞系表达的ChIL-10蛋白为筛选原,细胞融合后以IFA筛选杂交瘤细胞,筛选获得3株分泌鸡白介素-10单抗的细胞株;其中杂交瘤细胞株2F6所分泌的单抗效价最高、稳定性最高、特异性最强,其微生物保藏号为CGMCC NO.7657。本发明进一步提供了杂交瘤细胞株2F6及其分泌的单克隆抗体在检测或纯化鸡白介素-10蛋白中的应用。
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公开(公告)号:CN102250234B
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201110156924.7
申请日:2011-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种与兔出血症病毒VP60蛋白相结合的蛋白及其应用,其特征在于至少包含如SEQ ID NO:1所示的序列。在发明中,通过酵母双杂交技术,从兔肝脏组织cDNA文库中钓取得到与兔出血症病毒结构蛋白VP60相互作用的膜突蛋白MSN。通过免疫共沉淀试验,体外验证了该蛋白具有和病毒粒子相互结合的功能,纯化的MSN蛋白可以抑制8个血凝单位的病毒抗原对人“O”型血红细胞的凝集作用。以该蛋白质与兔出血症病毒室温内孵育,经口服、滴鼻接种RHDV抗体阴性兔,8天后兔仍然存活,外表健康,病理解剖及切片检查各脏器也无异常。病毒感染兔,于3日内死亡。可见该蛋白可以用于制备治疗兔出血症的药物中。
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公开(公告)号:CN102807970A
公开(公告)日:2012-12-05
申请号:CN201210152860.8
申请日:2012-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一株犬瘟热病毒敏感细胞系及其建立方法和应用,属于生物技术领域。本发明采用慢病毒四质粒包装系统,获得了一株表达犬源SLAM的稳定细胞系MDCK-CSL,其菌种保藏编号为:CGMCC No.5881。通过比较CDV标准株在MDCK-CSL和MDCK细胞上的繁殖情况,表明CDV-Snyder Hill标准毒株感染MDCK-CSL细胞系24小时即可观察到细胞相互融合、圆缩、明显死亡等细胞病变;而感染MDCK细胞持续6天仅表现为细胞生长缓慢,未出现细胞病变。本发明建立的CDV敏感细胞系MDCK-CSL,为CDV野毒株的分离及其完整的生物学特性研究提供了技术平台,也为犬瘟热病的防控奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102250239A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201110156915.8
申请日:2011-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/00 , C12N15/13 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , A61K39/395 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种与兔出血症病毒VP60蛋白相结合的蛋白及其应用,其特征在于至少含有如SEQ ID NO:1所示的序列。在发明中,通过酵母双杂交技术,从兔肝脏组织cDNA文库中钓取得到与兔出血症病毒结构蛋白VP60相互作用的215M22 kappa1蛋白。通过免疫共沉淀试验,体外验证了该蛋白具有和病毒粒子相互结合的功能,纯化的kappa 1蛋白在0.43μg的条件下,可以抑制病毒抗原对人“O”型血红细胞的凝集作用。该蛋白质与兔出血症病毒孵育后接种RHDV抗体阴性兔,8天后兔仍然存活,外表健康,病理解剖及切片检查各脏器也无异常。可见该蛋白kappa1可以用于制备治疗兔出血症的药物中。
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公开(公告)号:CN102250234A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201110156924.7
申请日:2011-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种与兔出血症病毒VP60蛋白相结合的蛋白及其应用,其特征在于至少包含如SEQ ID NO:1所示的序列。在发明中,通过酵母双杂交技术,从兔肝脏组织cDNA文库中钓取得到与兔出血症病毒结构蛋白VP60相互作用的膜突蛋白MSN。通过免疫共沉淀试验,体外验证了该蛋白具有和病毒粒子相互结合的功能,纯化的MSN蛋白可以抑制8个血凝单位的病毒抗原对人“O”型血红细胞的凝集作用。以该蛋白质与兔出血症病毒室温内孵育,经口服、滴鼻接种RHDV抗体阴性兔,8天后兔仍然存活,外表健康,病理解剖及切片检查各脏器也无异常。病毒感染兔,于3日内死亡。可见该蛋白可以用于制备治疗兔出血症的药物中。
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公开(公告)号:CN103571796B
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201310572486.1
申请日:2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司
Abstract: 本发明公开了鸡白介素-10单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明以原核表达的重组蛋白ChIL-10为免疫原,真核细胞系表达的ChIL-10蛋白为筛选原,细胞融合后以IFA筛选杂交瘤细胞,筛选获得3株分泌鸡白介素-10单抗的细胞株;其中杂交瘤细胞株2F6所分泌的单抗效价最高、稳定性最高、特异性最强,其微生物保藏号为CGMCC NO.7657。本发明进一步提供了杂交瘤细胞株2F6及其分泌的单克隆抗体在检测或纯化鸡白介素-10蛋白中的应用。
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公开(公告)号:CN102250239B
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201110156915.8
申请日:2011-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/00 , C12N15/13 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , A61K39/395 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种与兔出血症病毒VP60蛋白相结合的蛋白及其应用,其特征在于至少含有如SEQ ID NO:1所示的序列。在发明中,通过酵母双杂交技术,从兔肝脏组织cDNA文库中钓取得到与兔出血症病毒结构蛋白VP60相互作用的215M22 kappa1蛋白。通过免疫共沉淀试验,体外验证了该蛋白具有和病毒粒子相互结合的功能,纯化的kappa 1蛋白在0.43μg的条件下,可以抑制病毒抗原对人“O ”型血红细胞的凝集作用。该蛋白质与兔出血症病毒孵育后接种RHDV抗体阴性兔,8天后兔仍然存活,外表健康,病理解剖及切片检查各脏器也无异常。可见该蛋白kappa1可以用于制备治疗兔出血症的药物中。
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公开(公告)号:CN101942419B
公开(公告)日:2012-08-22
申请号:CN201010244838.7
申请日:2010-07-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了犬细小病毒弱毒疫苗株及其应用。本发明将所分离的犬细小病毒强毒株通过细胞上传代,培育了犬细小病毒弱毒疫苗株,其微生物保藏号是:CGMCC No.3841。安全性和免疫原性试验结果表明,本发明弱毒疫苗株CPV-YNR株对同源强毒攻击的犬可以提供很好的保护力,具有良好的免疫原性,本发明弱毒疫苗株CPV-YNR可制备成单苗或联苗,可有效预防或治疗由犬细小病毒所致疾病。本发明弱毒疫苗株CPV-YNR遗传性稳定,具有免疫持久、效果好、安全可靠、保存期长等优点。
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