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公开(公告)号：CN110512026B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201910661584.X
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6816 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒分子生物学技术领域，具体涉及一种检测H7N9亚型禽流感病毒基因组vRNA‑vRNA相互作用的生物素标记方法。本发明采用生物素标记H7N9亚型禽流感病毒的待测RNA对，将待测RNA对经变性、杂交和凝胶迁移后，通过链霉亲和素结合反应对待测RNA对的相互作用进行分析。利用本发明的方法能够得到纯度和浓度较高的生物素标记基因组RNA片段，同时能够有效保证杂交的特异性以及vRNA杂交条带的清晰度，进而显著提高了vRNA‑vRNA结合和相互作用检测的准确性，实现了vRNA‑vRNA相互作用强度的定量检测。
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公开(公告)号：CN110627901A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910912806.0
申请日：2019-09-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , A61K39/395 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体及其应用。本发明提供流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体，所述单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1-3所示；所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4-6所示。该单克隆抗体能够特异识别并结合多种亚型的流感病毒基质蛋白M1、在流感病毒亚型间具有广谱适用性，同时具有较高的特异性和敏感性，可以很好地应用于免疫印迹实验、间接免疫荧光实验以及免疫沉淀等技术，具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN106676104A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710117448.5
申请日：2017-03-01
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种鉴定北美分支H7亚型禽流感病毒的引物对及其应用。本发明提供了一个引物对，由引物F1和引物R1组成；所述引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子；所述引物R1为序列表的序列2所示的单链DNA分子。所述引物对的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)辅助鉴定北美分支H7亚型禽流感病毒；(b2)辅助鉴定待测样本中是否含有北美分支H7亚型禽流感病毒。采用本发明提供的引物对、试剂盒进行检测，特异性好、敏感性高，只需要3‑5小时的时间即可对临床样品进行检测，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，对于北美分支H7亚型禽流感病毒疫病诊断和流行病学调查具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN104232625A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201310231172.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种辅助鉴定H9亚型禽流感病毒的引物对及其应用。本发明保护的特异引物对由序列表的序列1所示单链DNA分子和序列表的序列2所示单链DNA分子组成。本发明还保护所述特异引物对在制备辅助鉴定H9亚型禽流感病毒的试剂盒中的应用。本发明还保护所述特异引物对在制备辅助鉴定待测样本中是否含有H9亚型禽流感病毒的试剂盒中的应用。采用本发明提供的特异引物对辅助鉴定H9亚型禽流感病毒，具有灵敏度高、特异性强、普适性强、所需时间短、成本低等优点，可以对多种临床样本进行检测，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用。本发明对于H9亚型禽流感病毒的临床诊断和流行病控制具有重大价值。
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公开(公告)号：CN104232624A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201310230937.3
申请日：2013-06-09
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种辅助鉴定H9亚型禽流感病毒和鸡传染性支气管炎病毒的引物组合物及其应用。本发明提供的特异引物对，由序列表的序列3所示单链DNA分子和序列表的序列4所示单链DNA分子组成。本发明还保护一种引物组合物，由引物对甲和所述特异引物对组成；所述引物对甲由序列表的序列1所示单链DNA分子和序列表的序列2所示单链DNA分子组成。本发明提供的特异引物对可鉴定鸡传染性支气管炎病毒，本发明提供的引物组合物结合双重RT-PCR可同时鉴定鸡传染性支气管炎病毒和H9亚型禽流感病毒，均具有灵敏度高、特异性强、普适性强、所需时间短、成本低等优点，可以对多种临床样本进行检测，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102304591B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110302176.9
申请日：2011-10-08
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鉴定H3亚型禽流感病毒的PCR引物对及其应用。本发明所提供的PCR引物对是由两条单链DNA组成，所述两条单链DNA是序列表中序列1所示的单链DNA和序列表中序列2所示的单链DNA。本发明所提供的引物对用于检测H3亚型禽流感病毒的特异性高，灵敏度可达1EID50/100μl，与病毒分离和血凝抑制实验等常规实验方法的鉴定结果相比的符合率为100％；不仅可以对待测病禽的口腔拭子、泄殖拭子进行检测，还可检测病禽尿囊液，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，可成为H3亚型禽流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。
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公开(公告)号：CN101343639B
公开(公告)日：2011-04-06
申请号：CN200810119704.5
申请日：2008-09-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种真核表达穿梭载体及其构建方法与应用。所述的真核表达穿梭载体，是一种环状载体，包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次由两个转录方向相同的启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述连接片段含有EcoR V识别序列。用本发明的真核表达穿梭载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，并且该载体含有两个真核复制起点，可以在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达的水平。本发明的真核表达穿梭载体具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101463361A
公开(公告)日：2009-06-24
申请号：CN200910076381.0
申请日：2009-01-14
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种双表达盒的表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和两个外源基因表达盒；所述两个外源基因表达盒分别为外源基因表达盒1和外源基因表达盒2；所述外源基因表达盒1自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段1和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段1含有EcoRV识别序列；所述外源基因表达盒2自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段2和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段2含有StuI识别序列。本发明的pDP－EX－vector含有两个外源基因表达盒、两个真核复制起点，可以在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达的水平，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117912568A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410020894.4
申请日：2024-01-05
IPC: G16B40/00 , G16B20/20 , G16B20/50 , G16B30/00 , G16B50/30 , G16B45/00 , G06F18/23213 , G06F18/2431 , G06F18/20
Abstract: 本发明公开了一种H9N2亚型禽流感毒株抗原性快速鉴别方法及装置，用于解决如何快速鉴别H9N2亚型禽流感毒株抗原性的技术问题。方法包括：获取H9N2亚型禽流感病毒的多组病毒对，确定每组病毒对的抗原关系，并基于抗原关系，采用多组病毒对构建预测数据集；对H9N2亚型禽流感病毒进行抗原表位系统定义，确定若干组抗原性影响特征；结合抗原关系以及若干组抗原性影响特征，构建抗原性预测模型，并采用预测数据集对抗原性预测模型进行训练，获得目标预测模型；获取待测抗原病毒数据，将其输入至目标预测模型进行抗原关系预测，并基于预测结果，对待测抗原病毒数据中多组病毒两两之间的抗原性进行鉴别。
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公开(公告)号：CN111088397B
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN201911303737.X
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及一种检测H7N9亚型禽流感病毒基因组包装变异的实时荧光绝对定量RT‑PCR方法。本发明提供分别针对HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因的高度保守区的特异性引物对，利用这些特异性引物对进行实时荧光定量RT‑PCR检测H7N9亚型流感病毒基因组中HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因的拷贝数，进而检测H7N9亚型流感病毒的基因组包装变异。该方法具有特异性高、灵敏度高、准确性高、检测时间较短，成本低等优势，能够对病毒滴度较低的临床样品做出准确诊断，适用于H7N9亚型禽流感病毒的临床诊断和流行病控制。
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