公开(公告)号：CN111549159A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010576699.1

申请日：2020-06-22

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 沈青春 ,  罗玉峰 ,  王芳 ,  刘博 ,  耿仁浩 ,  曲鸿飞 ,  魏津 ,  蒋卉 ,  马欣 ,  肖璐 ,  王德丽 ,  冯宇

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明涉及一种支原体通用PCR检测方法及其检测试剂盒。本发明选取16S rRNA序列V6高变区和V9高变区序列作为支原体特异性通用引物设计区域，在保证特异性的前提下，多处引入兼并碱基，设计并筛选获得MF20.1/MF20.2/MR21(序列1/序列2/序列3)作为支原体的通用PCR检测引物，能最大范围地检测各种支原体(鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体、牛支原体、猪鼻支原体、猪肺炎支原体、衣阿华支原体等)。特异性检测结果表明，各种动物细胞(Vero细胞、SP-20细胞、Marc 145细胞等)、细菌(大肠杆菌、沙门氏菌等)均无特异性扩增条带。本发明PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点，可用于细胞、病毒培养物、组织液、血清、兽用生物制品及人类疫苗及生物制品的支原体检测与检验。