公开(公告)号：CN118853524B

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202411328287.0

申请日：2024-09-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王晓娜 ,  赵海渊 ,  单智夫 ,  刘芯孜 ,  张海琳 ,  王丽 ,  乔薪瑗 ,  唐丽杰 ,  李一经

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/12 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  A61K39/385 ,  A61K39/215 ,  A61K38/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种共表达猪β‑防御素2与PEDV S1蛋白的重组猪源干酪乳杆菌及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明以前期构建的表达PEDV S1基因的猪源营养缺陷型副干酪乳杆菌作为口服黏膜传递载体，并通过串联提高pBD2蛋白的外源表达量，构建重组乳杆菌n×pBD2/S1‑ΔHLJ‑27。针对PEDV的肠道黏膜感染，通过该重组乳杆菌对S1蛋白的组成型表达，刺激黏膜特异性免疫应答，从而建立阻断PEDV感染的第一道防线；与此同时，为了增强口服疫苗诱导的黏膜免疫效果，利用该重组乳杆菌进行分泌表达串联的pBD2蛋白，通过外源增加pBD2表达量来增强肠道免疫应答，提高机体获得性免疫水平，进而将口服黏膜疫苗的优势发挥更佳。

公开(公告)号：CN118460584A

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202410433277.7

申请日：2024-04-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王晓娜 ,  李佳璇 ,  张海琳 ,  赵海渊 ,  李一经 ,  唐丽杰 ,  姜艳平 ,  崔文 ,  李封赛

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N1/21 ,  C12R1/225 ,  C12R1/245

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统及应用，所述的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统包括以pLCNICK为骨架构建得到的基因编辑质粒，所述的基因编辑质粒中含有识别特异性靶序列的sgRNAs以及所要插入或敲除位点的上下游同源序列，其连接顺序为上游同源序列‑下游同源序列‑sgRNAs。所述的系统用于外源基因插入时，还包括在上、下游同源序列中间插入外源基因序列。本发明利用CRISPR‑Cas9系统和营养缺陷型选择标记建立了一套在乳酸菌基因组任意位点进行插入、缺失或突变操作的基因组编辑系统，实现了对不同乳酸菌菌株的不同基因位点高效、精确敲除及插入，实现了乳酸菌系统复制的人工控制。

公开(公告)号：CN118853524A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202411328287.0

申请日：2024-09-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王晓娜 ,  赵海渊 ,  单智夫 ,  刘芯孜 ,  张海琳 ,  王丽 ,  乔薪瑗 ,  唐丽杰 ,  李一经

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/12 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  A61K39/385 ,  A61K39/215 ,  A61K38/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种共表达猪β‑防御素2与PEDV S1蛋白的重组猪源干酪乳杆菌及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明以前期构建的表达PEDV S1基因的猪源营养缺陷型副干酪乳杆菌作为口服黏膜传递载体，并通过串联提高pBD2蛋白的外源表达量，构建重组乳杆菌n×pBD2/S1‑ΔHLJ‑27。针对PEDV的肠道黏膜感染，通过该重组乳杆菌对S1蛋白的组成型表达，刺激黏膜特异性免疫应答，从而建立阻断PEDV感染的第一道防线；与此同时，为了增强口服疫苗诱导的黏膜免疫效果，利用该重组乳杆菌进行分泌表达串联的pBD2蛋白，通过外源增加pBD2表达量来增强肠道免疫应答，提高机体获得性免疫水平，进而将口服黏膜疫苗的优势发挥更佳。