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公开(公告)号：CN109312328B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201780038352.8
申请日：2017-06-19
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明提供一种突变型甲虫荧光素酶等，其在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型北美萤火虫荧光素酶的氨基酸序列中、第288位的缬氨酸相当的氨基酸突变为异亮氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸；与其中第376位的亮氨酸相当的氨基酸突变为脯氨酸；与其中第455位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸；或者与其中第488位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或者苯丙氨酸，并且在0.9质量％的氯化钠溶液中由荧光素－荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含氯化钠的溶液中该反应的发光强度的50％以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115074338B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202210230083.8
申请日：2022-03-10
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明的目的在于提供一种突变型甲虫荧光素酶，其不易受到NaCl的发光抑制的影响。本发明的突变型甲虫荧光素酶在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型平家萤荧光素酶的氨基酸序列中的第294位苯丙氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸或与第533位天冬氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸，且在0.9质量％的NaCl溶液中由荧光素‑荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含NaCl的溶液中该反应的发光强度的50％以上。
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公开(公告)号：CN115572755A
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202210690960.X
申请日：2022-06-17
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明提供一种能够消除各试剂盒不同的背景发光的影响而再现性良好地测定内毒素浓度的内毒素测定方法。该内毒素测定方法中，将试样液、由内毒素激活的试剂、通过激活了的试剂使发光基质游离的发光合成基质、使游离出的发光基质发光的发光酶混合而制备测定液，对在制备了所述测定液后经过了第1时间T1时的第1发光量L1和经过了第2时间T2时的第2发光量L2进行测定，根据所述第1发光量L1和所述第2发光量L2，求得基于内毒素的净发光量LX，根据求得的净发光量LX，求得试样液中的内毒素浓度。
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公开(公告)号：CN115074338A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210230083.8
申请日：2022-03-10
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明的目的在于提供一种突变型甲虫荧光素酶，其不易受到NaCl的发光抑制的影响。本发明的突变型甲虫荧光素酶在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型平家萤荧光素酶的氨基酸序列中的第294位苯丙氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸或与第533位天冬氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸，且在0.9质量％的NaCl溶液中由荧光素‑荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含NaCl的溶液中该反应的发光强度的50％以上。
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公开(公告)号：CN115433761A
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN202210600211.3
申请日：2022-05-27
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明目的在于提供一种用于更高精度地测定透析液的内毒素浓度的方法，其使用由水制作的校准曲线，及用于该方法的试剂盒。本发明提供的内毒素的测定方法如下所述：将规定量的被测试样与含溶解物试剂的干燥粉末混合来制备第一反应溶液，然后将该第一反应溶液以规定时间进行温育后，在避光下，将所述第一反应溶液与含荧光素酶生物发光试剂的干燥粉末混合来制备第二反应溶液，并测定该第二反应溶液的发光量，根据所述发光量测定所述被测试样的内毒素浓度，所述被测试样为透析液或水，所述第二反应溶液的钠离子浓度为250～390mM，钙离子浓度为0.5～10mM，氯化物离子浓度为250～361.5mM，以及Tris浓度为20～30mM。
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公开(公告)号：CN109312328A
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201780038352.8
申请日：2017-06-19
Applicant: 东亚DKK株式会社
Abstract: 本发明提供一种突变型甲虫荧光素酶等，其在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型北美萤火虫荧光素酶的氨基酸序列中、第288位的缬氨酸相当的氨基酸突变为异亮氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸；与其中第376位的亮氨酸相当的氨基酸突变为脯氨酸；与其中第455位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸；或者与其中第488位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或者苯丙氨酸，并且在0.9质量％的氯化钠溶液中由荧光素－荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含氯化钠的溶液中该反应的发光强度的50％以上。
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