一种精子染色质免疫共沉淀方法

    公开(公告)号:CN113652418A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202110936750.X

    申请日:2021-08-16

    Abstract: 本发明公开了一种精子染色质免疫共沉淀方法。属靶向核酸纯化及二代测序建库样本预处理领域。包括精子消化:将精子经多聚甲醛固定、清洗、裂解后,采用微球菌核酸酶消化‑超声相结合的方法进行消化得消化液;超声参数:超声30s、间隔45s,10个循环;微球菌核酸酶消化参数:酶加入量200U/106个精子,酶解温度37℃,酶解时间30min;染色质分离:消化液经初清后得染色质;染色质免疫共沉淀:抗体与protein A agarose形成复合物,再与染色质中相应的抗原结合,之后经清洗、洗脱得免疫共沉淀反应液。本发明把超声与酶消化结合,提高消化效率,增加DNA回收率,有助于降低建库难度,提高精子免疫共沉淀效率。

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