用于实施免疫组库测序的组合物及试剂盒和测序方法

    公开(公告)号:CN114934096A

    公开(公告)日:2022-08-23

    申请号:CN202210616324.2

    申请日:2022-05-31

    Abstract: 一种用于实施免疫组库测序的组合物,包括如SEQ ID NO:1所示逆转录引物,含有如SEQ ID NO:17所示序列的链置换引物,第一PCR引物对,用于装在Tn5转座酶的核酸:如SEQ ID NO:3所示接头Tn‑A和SEQ ID NO:4所示的嵌合端;以及第二PCR引物对。本发明的核酸组合物适用于以短读长测序平台对全长适应性免疫组库进行测序,只需要构建一个文库即可利用短读长的测序数据组装出完整的BCR和TCR全长序列,有效降低测序的成本,进一步提高测序的通量,提高测序效率。

    一种精子染色质免疫共沉淀方法

    公开(公告)号:CN113652418A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202110936750.X

    申请日:2021-08-16

    Abstract: 本发明公开了一种精子染色质免疫共沉淀方法。属靶向核酸纯化及二代测序建库样本预处理领域。包括精子消化:将精子经多聚甲醛固定、清洗、裂解后,采用微球菌核酸酶消化‑超声相结合的方法进行消化得消化液;超声参数:超声30s、间隔45s,10个循环;微球菌核酸酶消化参数:酶加入量200U/106个精子,酶解温度37℃,酶解时间30min;染色质分离:消化液经初清后得染色质;染色质免疫共沉淀:抗体与protein A agarose形成复合物,再与染色质中相应的抗原结合,之后经清洗、洗脱得免疫共沉淀反应液。本发明把超声与酶消化结合,提高消化效率,增加DNA回收率,有助于降低建库难度,提高精子免疫共沉淀效率。

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